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- A20对脂多糖诱导人树突状细胞成熟度及功能的影响
- 2023年
- 目的探讨A20对脂多糖诱导的树突状细胞成熟度及功能的影响。方法在脂多糖诱导树突状细胞成熟过程中,沉默A20,采用定量RT-PCR检测树突状细胞中A20的表达水平,流式细胞术检测树突状细胞表面共刺激分子CD80、CD86及HLA-DR的表达水平,ELISA检测树突状细胞分泌的细胞因子IL-1β、IL-6和IL-27的水平。结果荧光显微镜下观察到绝大部分DCs被携带有GFP荧光基团标记的腺病毒转染,呈绿色荧光表达;定量RT-PCR检测显示,转染A20-shRNA腺病毒的树突状细胞A20的表达低于未转染腺病毒的树突状细胞(P<0.05);流式细胞术检测显示,沉默A20后,树突状细胞细胞表面的成熟标记分子CD80、CD86和HLA-DR的表达水平没有变化;ELISA检测显示,沉默A20的树突状细胞分泌IL-1β和IL-6的水平增加(P<0.05),而IL-27的水平降低(P<0.05)。结论携带A20-shRNA的腺病毒能够顺利转染树突状细胞,且A20对树突状细胞的成熟度无调控作用,但沉默A20后能够促进树突状细胞分泌促炎细胞因子IL-1β和IL-6,降低抑炎细胞因子IL-27的表达水平。
- 何跃黄丽姚天玉张芷茹陈洁
- 关键词:树突状细胞脂多糖成熟度细胞因子
- 小球藻多糖对人树突状细胞成熟的作用和机制研究
- 2023年
- 目的:探讨小球藻多糖(PFC)对人树突状细胞(DC)的成熟作用及其相关机制的初步研究。方法:使用纯化后的PFC对外周血单核细胞来源的不成熟DC进行干预,使用流式细胞术检测PFC干预后DC表面CD83和CD86表达变化,利用酶联免疫法(ELISA)检测细胞因子IL-6、TNF-α和IL-10水平的变化;继而通过比较PFC处理组和对照组的转录谱基因表达差异及通路富集分析,寻找其作用途径,并使用相关分子通路抑制剂进行初步验证。结果:PFC可上调DC表面CD83和CD86的表达,促进DC细胞因子IL-10的释放;生信分析结果提示PFC可能通过Toll样受体2/4(TLR2/4)发挥作用,利用TLR2和TLR4通路抑制剂下调了PFC诱导的DC CD86表达。其中TLR4抑制剂干预后CD86表达水平显著下降(P<0.05)。结论:PFC可能通过TLR2和TLR4通路上调人外周血单核细胞来源DC表面标志物CD83和CD86表达水平的提高,从而促进DC成熟。
- 梁镕伊袁清霞赵龙岩张丽峰肖健
- 关键词:人树突状细胞转录组
- 人树突状细胞的大量培养及鉴定
- 2022年
- 目的:探讨人树突状细胞体外大量培养及鉴定方法。方法:采用免疫磁珠法分离纯化CD34^(+)干细胞;采用含有TPO、SCF、Flt3L和IL-3的扩增培养基培养1周,以及含有SCF、Flt3L、GM-CSF和IL-4的分化培养基培养2-3周,获得CD34^(+)细胞来源树突状细胞。采用普通光学显微镜观察细胞形态,牛鲍氏血细胞计数板进行细胞计数,荧光抗体标记、流式细胞仪检测细胞纯度和细胞表面共刺激分子的表达情况。结果:以含有TPO、SCF、Flt3L和IL-3的培养基扩展培养一周,及含有SCF、Flt3L、GM-CSF和IL-4的培养基诱导分化3周,可获得大量悬浮细胞;细胞数目扩增倍数约达50倍;普通光学显微镜下可见悬浮细胞有明显的树突状凸起;流式细胞术检测结果显示悬浮细胞中CD141和CD11c双阳性细胞(等同于单核细胞来源树突状细胞)比例达30%,此群细胞高表达HLA-DR和CD209,低表达共刺激分子CD80和CD86;细胞寿命较短,40天时培养体系中悬浮细胞和CD34^(+)细胞来源树突状细胞数目急剧减少。结论:采用多细胞因子联合刺激可获得大量的树突状细胞,为树突状细胞的特性及功能学研究奠定了基础。
- 彭霞李延宁蔺丽慧赵金艳高燕婷戈伊芹黄雨霁李莉
- 关键词:树突状细胞干细胞
- 一种制备高纯度的成熟人树突状细胞的方法及应用
- 本发明涉及一种制备高纯度、成熟人树突状细胞的方法及应用,具体地,本发明通过单核细胞诱导分化为高纯度的非成熟树突状细胞、非成熟树突状细胞摄取加工抗原、非成熟树突状细胞诱导为成熟树突状细胞几个环节,使得制备的树突状细胞具有高...
- 吁亭蒋应明陈国友
- 文献传递
- 一种制备高纯度的成熟人树突状细胞的方法及应用
- 本发明涉及一种制备高纯度、成熟人树突状细胞的方法及应用,具体地,本发明通过单核细胞诱导分化为高纯度的非成熟树突状细胞、非成熟树突状细胞摄取加工抗原、非成熟树突状细胞诱导为成熟树突状细胞几个环节,使得制备的树突状细胞具有高...
- 吁亭蒋应明陈国友
- 文献传递
- 用于抗病毒抗肿瘤的人树突状细胞诱导方法及组合物
- 本发明涉及细胞培养、免疫细胞抗病毒抗肿瘤领域,具体公开了一种用于抗病毒抗肿瘤的人树突状细胞诱导方法及组合物,该人树突状细胞诱导组合物包括由聚肌胞苷酸(polyI:C)和重组人白细胞介素1β(IL‑1β)组成的成熟人树突状...
- 张丽峰冷静皮亦华肖健梁鎔伊
- 一种嵌合抗原受体、载体、人树突状细胞、细胞系、实体肿瘤治疗药物及制备方法和应用
- 本发明涉及一种嵌合抗原受体、慢病毒载体、人树突状细胞、细胞系、免疫抑制性实体肿瘤治疗药物及制备方法和应用,属于嵌合抗原受体技术领域。本发明所述嵌合抗原受体胞内信号域选自TLR4、TNFR2、Dectin‑1和Fc受体γ链...
- 徐洋
- 犀角地黄汤合方对脂多糖诱导的人树突状细胞功能的影响被引量:4
- 2022年
- 目的:观察犀角地黄汤合方含药血清(XJDH)对体外诱导的树突状细胞(DC)相关功能的影响,探讨犀角地黄汤合方治疗ITP的作用机制。方法:采集6名健康志愿者外周血样本,利用密度梯度离心法分离出单个核细胞,利用磁珠分选出CD14+单核细胞,用重组人粒细胞⁃巨噬细胞集落刺激因子(GM⁃CSF)及重组人白介素4(IL⁃4)诱导成DC。将DC分为3组:对照组、模型组和XJDH组。通过CCK⁃8法确定含药血清干预浓度及时间,模型组和XJDH组分别加入终浓度为1μg/mL的脂多糖(LPS)刺激24 h后诱导DC成熟,对照组、模型组加入正常大鼠血清,XJDH组加入犀角地黄汤合方含药血清均干预24 h。利用流式细胞术(FCM)检测DC表面分子CD80,CD83,HLA⁃DR的水平,利用蛋白印迹法(WB)检测细胞TLR4和NF⁃κB表达情况,用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液中IL⁃6,IL⁃12,TNF⁃α的水平。结果:与对照组相比,LPS刺激能够使DC表面分子CD80、CD83、HLA⁃DR表达增加,TLR4和NF⁃κB表达随之上升,分泌的相关促炎因子IL⁃6、IL⁃12、TNF⁃α增加(P<0.05)。相比于模型组,经XJDH干预后DC表面分子CD80、CD83、HLA⁃DR表达减少(P<0.05),TLR4、NF⁃κB蛋白表达下降(P<0.05),DC细胞上清液中IL⁃6、IL⁃12、TNF⁃α水平明显降低(P<0.05)。结论:犀角地黄汤合方含药血清可下调TLR4/NF⁃κB信号通路相关蛋白表达,抑制DC成熟,减少促炎因子的分泌,这可能是犀角地黄汤合方治疗免疫性血小板减少症的机制之一。
- 杨武霞吴玉红王梦晓倪润丰范栗玮李润杰李萌王爱迪刘宝山
- 关键词:免疫性血小板减少症树突细胞脂多糖
- 用于抗病毒抗肿瘤的人树突状细胞诱导方法及组合物
- 本发明涉及细胞培养、免疫细胞抗病毒抗肿瘤领域,具体公开了一种用于抗病毒抗肿瘤的人树突状细胞诱导方法及组合物,该人树突状细胞诱导组合物包括由聚肌胞苷酸(polyI:C)和重组人白细胞介素1β(IL‑1β)组成的成熟人树突状...
- 张丽峰冷静皮亦华肖健梁鎔伊
- 文献传递
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- 本发明涉及一种嵌合抗原受体、慢病毒载体、人树突状细胞、细胞系、免疫抑制性实体肿瘤治疗药物及制备方法和应用,属于嵌合抗原受体技术领域。本发明所述嵌合抗原受体胞内信号域选自TLR4、TNFR2、Dectin‑1和Fc受体γ链...
- 徐洋
- 文献传递
相关作者
- 曹雪涛

- 作品数:967被引量:2,865H指数:24
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所
- 研究主题:肿瘤 树突状细胞 基因治疗 基因疗法 蛋白分子
- 孔练花

- 作品数:70被引量:103H指数:5
- 供职机构:江苏省人民医院
- 研究主题:树突状细胞 人树突状细胞 TOLL样受体 脂质体介导 发热伴血小板减少综合征
- 陈涛涌

- 作品数:72被引量:50H指数:4
- 供职机构:第二军医大学免疫学研究所
- 研究主题:蛋白分子 天然免疫 E3泛素连接酶 人树突状细胞 DRP
- 周四维

- 作品数:374被引量:2,845H指数:21
- 供职机构:华中科技大学同济医学院
- 研究主题:膀胱肿瘤 膀胱癌 膀胱移行细胞癌 草酸钙 肾结石
- 李军

- 作品数:482被引量:1,658H指数:19
- 供职机构:江苏省人民医院
- 研究主题:儿童 慢性乙型肝炎患者 肺动脉高压 川崎病 核酸疫苗