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产酸克雷伯氏菌耐氧产氢 及其可溶性 氢 酶 耐氧特性研究 被引量:4 2008年 目的:考察产酸克雷伯氏菌(Klebsielal oxytoca HP1)耐氧产氢 特性及其可溶性 氢 酶 的氧耐受特性。方法:研究K.oxytoca HP1在不同气相氧浓度条件下利用葡萄糖(1%,m/v)、丙酮酸钠(0.5%,m/v)及甲酸(0.1%,v/v)等底物产氢 活性的以及K.oxyto-ca HP1可溶性 氢 酶 在空气及氧饱和溶液中催化产氢 活性。结果:K.oxytoca HP1在葡萄糖(1%,m/v)底物中具有较高耐氧产氢 活性,6h内在气相氧浓度为5%、10%和21%条件下的氢 产量分别为厌氧条件下的20.9%、13.7%、8.3%;K.oxytoca HP1可溶性 氢 酶 在空气中孵育12h后,其活性残余85.4%,在氧饱和溶液中活性损失一半约3h。结论:试验结果提示K.oxytoca HP1具有耐氧产氢 特性,其可溶性 氢 酶 具有较高氧耐受性,在氢 能源的开发中具有潜在的应用前景。 邬小兵 徐惠娟 丛一博 李倩一 徐方成 龙敏南关键词:氢酶 产氢 产酸克雷伯氏菌HP1可溶性 氢 酶 的分离纯化及特性的研究 氢 酶 是微生物氢 代谢过程中的关键酶 ,它催化分子氢 的氧化与质子还原(H2←→2H++2e-).对氢 酶 的研究不仅可以揭示微生物的生理代谢规律,而且对探索和利用微生物制取燃料氢 有重要意义.产酸克雷伯氏菌HP1(Klebsiell... 徐云玲关键词:可溶性氢酶 分离提纯 理化特性 文献传递 光合细菌Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 的某些理化性质 被引量:1 2001年 光合细菌 Chromatium vinosum含有一种可溶性 氢 酶 和一种膜结合态氢 酶 .在培养基中加入终浓度为 1μmol/ L的 Se,细胞中可溶性 氢 酶 的含量增加 1.7倍 .C.vinosum可溶性 氢 酶 可以利用甲基紫精、苄基紫精和细胞色素 C为电子载体催化吸氢 与放氢 ,但不能利用 NAD,NADH,NADP和NADPH等进行催化放氢 和吸氢 .可溶性 氢 酶 易被 CO所抑制 ,在反应系统中加入终浓度为 2 .5μmol/ L的 CO时 ,可抑制氢 酶 最大放氢 活性的一半 .与 C.vinosum膜结合态氢 酶 相比 ,可溶性 氢 酶 较易被胰蛋白酶 降解而使氢 酶 催化吸氢 和放氢 的活性降低 . 龙敏南 苏文金 S P J A lbracht 张凤章 许良树关键词:CHROMATIUM VINOSUM 可溶性氢酶 理化特性 光合细菌 光合细菌Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 的EPR研究 被引量:3 2001年 光合细菌 Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 经 5次柱层析 ( DE-2 3,TSK-DEAE( ) ,Ultragel Ac A-4 4 ,TSK-DEAE( ) ,Superdex TM75 )分离后被纯化 365倍 ,得率为 32 % ,其催化放氢 的活性为 8.4μmol H2 /( min· mg prot) .氧化态可溶性 氢 酶 在 4 5 K下 ,产生了 Ni( )的典型 EPR信号 ( gx,y,z=2 .37,2 .1 6,2 .0 1 6和 gx,y,z=2 .30 ,2 .2 3,2 .0 1 6) ;在 1 0 K下 ,没有出现膜结合态氢 酶 中存在的 [3Fe-4 S]簇特征 EPR信号 .可溶性 氢 酶 被 H2 还原后 ,Ni( )的特征 EPR信号消失 ,同时出现一个 [4 Fe-4 S]簇的特征 EPR信号 ( gx,y,z=1 .88,1 .90 ,2 .0 4 5 ) .研究结果表明 ,C.vinosum可溶性 氢 酶 在结构和功能上不同于膜结合态氢 酶 ,是一种新的催化放氢 的 Ni 龙敏南 苏文金 Albracht S.P.J 张凤章 许良树关键词:CHROMATIUM VINOSUM 可溶性氢酶 EPR谱 光合细菌 光合细菌Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 的研究 光合细菌 Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 经5次柱层析(DE-52,TSK-DEAE(Ⅰ),Ultragel AcA-44,TSK-DEAE(Ⅱ),Superdex TW75)分离后被纯化365倍,得率为3... 龙敏南 苏文金 S P J Albracht 张凤章 许良树关键词:可溶性氢酶 理化特性 基因克隆 文献传递 光合细菌Chromatiun Vinosum可溶性 氢 酶 的研究 光合细菌Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 经5次柱层析(DE-52,TSK-DEAE(Ⅰ),Ultragel AcA-44,TSK-DEAE(Ⅱ),Superdex TM75)分离后被纯化365倍,得率为32... 龙敏南 S P J Albracht 苏文金 张凤章 许良树关键词:光合细菌 可溶性氢酶 理化特性 基因克隆 文献传递 光合细菌Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 的FTIR谱的研究 被引量:7 2001年 光合细菌Chromatiumvinosum含有一种可溶性 氢 酶 和一种膜结合态氢 酶 。氧化态可溶性 氢 酶 在红外光谱区(1860 -2140cm -1)有四个特征吸收峰 (2103.7 ,2086.2,2054.8和1962.5cm -1)。其中1962.5cm -1处吸收带的位置与已知的NiFe -氢 酶 活性中心 -CO基团所产生的吸收带位置相近 ;另外三条吸收带的位置与已知的NiFe -氢 酶 活性中心 -CN基团所产生的吸收带的位置相近。以2 ,6 -二氯酚靛酚 (DPIP)氧化可溶性 氢 酶 时 ,四条吸收谱带的位置基本上没有发生变化。可溶性 氢 酶 被Na2S2O4 充分还原时,-CO基团的吸收带移至1946.8cm -1 ,而 -CN基团的三条吸收带中的两条分别移至2076.8cm-1 和2093.1cm-1 处 ,另一条则消失了。还原态可溶性 氢 酶 与CO反应后 ,其红外光谱显示七条吸收带 ,在 -CO基团红外光谱区和 -CN基团红外光谱区各产生了两条新的吸收带。研究表明 ,C.vinosum可溶性 氢 酶 的活性中心的结构类似于其它已知的NiFe -氢 酶 ,但与活性中心金属原子相连的可能包括三个 -CN基团和一个 -CO基团 ,结合可溶性 氢 酶 的EPR谱特征 ,推测C.vinosum可溶性 氢 酶 活性中心的结构可能为Ni(CN)Fe(CN)2(CO)。 龙敏南 苏文金 S P J Albracht 张凤章 许良树关键词:可溶性氢酶 光合细菌 光合细菌Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 小亚基基因的克隆 被引量:8 2000年 光合细菌 C.vinosum可溶性 氢 酶 由 52 k Da和 2 1.5k Da两个亚基组成 .该酶 大亚基 N-末端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR,小亚基 N末端氨基酸序列为 :STQPKITVATXL DG.根椐大、小亚基 N-末端氨基酸序列设计两套引物 ,Primer1:5′g AT(g/ C) g T g AT(g/ C) g T(g/ A) Cg3′和 Primer2 :5′A g C AC(C/ g) CAg CC(C/ g) AA(g/ A) ATC3′,通过 PCR扩增获得 0 .6 kb的扩增片段 .克隆并对该片段序列进行分析 ,结果表明 ,该片段包含小亚基基因的全序列 .可溶性 氢 酶 小亚基由 179个氨基酸残基组成 ,分子量为 2 1.8k Da,含有 Ni Fe-氢 酶 保守的序列框 :Cxx C......Gx Cxxx G...... 龙敏南 苏文金 S P J Albracht 吴健民 张凤章 许良树关键词:VINOSUM 可溶性氢酶 基因克隆 光合细菌 小亚基 光合细菌Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 的分离提纯及特性 被引量:3 2000年 光合细菌 Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 经 4次柱层析 (Whatman DE- 52 ,TSK- DEAE,Ultragel Ac A- 44 ,Mono Q)分离提纯后被纯化 630倍 ,得率为 33.5% .可溶性 氢 酶 催化放氢 比活性为 7.5μmol· min-1· mg-1.SDS- PAGE结果显示 ,可溶性 氢 酶 由 52 k D和 2 1 .5k D两个亚基组成 .大亚基 N端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR;小亚基 N端氨基酸序列为 :STQPKIT-VATXLDG.氧化态可溶性 氢 酶 在 54K时产生了典型的 Ni( )电子顺磁共振 (EPR)信号 (gxyz=2 .37、2 .1 6、2 .0 1 6和 gxyz=2 .30、2 .2 3、2 .0 1 6) .研究结果表明 ,C.vinosum可溶性 氢 酶 是一种新的催化放氢 的 Ni Fe-氢 酶 . 龙敏南 苏文金 S.P.J.ALBRACHT 张凤章 许良树关键词:可溶性氢酶 纯化 光合细菌 光合细菌Chromatium vinosum可溶性 氢 酶 分离提纯、理化特性及基因克隆 氢 酶 (EC 1.12.-.-)是一类催化放氢 与吸氢 的酶 .氢 酶 的研究不仅对揭示微生物的生 理代谢规律,而且对探索利用微生物生产能源氢 有重要意义.光合细菌培养条件简单粗放,催化放氢 的速率比蓝细菌高两个数量级,产氢 的能量转化率... 龙敏南关键词:理化特性 基因克隆 文献传递
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龙敏南 作品数:150 被引量:502 H指数:12 供职机构:厦门大学 研究主题:氢酶 纤维素酶 生物制氢 VINOSUM 光合细菌 张凤章 作品数:41 被引量:175 H指数:8 供职机构:厦门大学生命科学学院 研究主题:棕色固氮菌 固氮酶 花生根瘤菌 可溶性氢酶 铁 许良树 作品数:37 被引量:158 H指数:7 供职机构:厦门大学生命科学学院 研究主题:花生根瘤菌 根瘤菌 棕色固氮菌 固氮酶 氢酶 苏文金 作品数:428 被引量:2,205 H指数:24 供职机构:集美大学 研究主题:纯化 原肌球蛋白 抗肿瘤活性 内生真菌 发酵 徐云玲 作品数:2 被引量:2 H指数:1 供职机构:厦门大学生命科学学院 研究主题:分离提纯 分离纯化 可溶性氢酶 氢酶 理化特性