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噬菌体随机肽库筛选HPV45亚型L1蛋白抗原表位: 2022年; 高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)可诱发女性宫颈癌,HPV45是HPV主要高危亚型之一,L1蛋白是主要的保护性蛋白。以大肠杆菌表达、纯化获得的重组蛋白SUMO-45 L1作为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗HPV45 L1蛋白的单克隆抗体,并以单克隆抗体3C11为靶分子,使用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行亲和淘选,三轮筛选后挑选12个与单抗3C11反应较强的克隆进行测序并分析。结果表明,噬菌体所展示的氨基酸序列与HPV45 L1蛋白序列“381VPNTYD386”相同,将其进行肽的合成,并通过斑点-酶联免疫吸附测定(dot enzyme-linked immunosorbent assay,Dot-ELISA)和间接竞争ELISA鉴定,最终鉴定出单克隆抗体3C11识别的L1蛋白线性表位“381VPNTYD386”。该表位的鉴定,为进一步分析HPV45 L1蛋白的结构和功能关系奠定了基础。; 彭亚允栗宁陈玉梅周景明刘红亮祁艳华梁超丁培阳朱习芳王爱萍; 关键词：人乳头瘤病毒 L1蛋白噬菌体展示技术表位

噬菌体随机肽库筛选TGF--β1和KGF活性多肽及其促进糖尿病创面愈合的实验研究: 研究背景创面愈合是世界性难题,给全球卫生系统造成了沉重的经济负担。随着老龄化的加重,糖尿病已经超越创伤成为慢性创面的主要原因。创面愈合是一个需要多种细胞、细胞外基质及生长因子共同参与协调的动态有序的过程,而在糖尿病创面中...; 杜宏; 关键词：KGF 噬菌体展示多肽

肿瘤靶向FoxM1-DBDp蛋白的噬菌体随机肽库筛选与分子模拟: 2019年; 目的从噬菌体随机十二肽库中筛选和获得分子靶向FoxM1-DBDp重组蛋白的高亲和力和肿瘤细胞毒性作用的多肽小分子。方法通过IPTG诱导、原核细菌体外重组表达和Ni-NTA亲和纯化,获得FoxM1-DBDp结合结构域蛋白;以其为靶标对噬菌体随机十二肽库进行四轮生物淘选,获取噬菌斑单克隆,反筛测定阳性克隆与靶蛋白亲和力;采用Discovery Studio 3.0(DS 3.0)分子模拟对接并用CCK-8测定高亲和力多肽对肿瘤细胞的抑制作用。结果经过四轮生物淘选,高亲和力噬菌体明显得到富集;成功测序了15条序列。反筛测定结果表明:多肽P15具有较高的亲和力;DS分子模拟对接发现该序列与FoxM1-DBD具有最低的结合自由能。CCK-8测定结果显示:100μg·mL-1处理浓度下,P15多肽对肝癌HepG2细胞的抑制率达75.52%。结论通过噬菌体随机十二肽库筛选,成功筛选获得了多条分子靶向FoxM1-DBDp的高亲和力多肽序列,为分子靶向肿瘤密切相关FoxM1的多肽先导药物的研发提供了重要的前期理论基础。; 付鹏德邬怡然王思怡李良建郭红萍崔健茆灿泉; 关键词：噬菌体随机肽库细胞生长抑制率肿瘤

利用噬菌体随机肽库筛选膀胱癌EJ细胞导向肽的实验研究: 目的:利用噬菌体随机七肽库体外筛选能与人膀胱癌EJ细胞特异性结合的小分子多肽,为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供理论基础。方法:以膀胱癌细胞系EJ为靶细胞,人正常膀胱移行上皮细胞为吸附细胞,对噬菌体随机七肽库进行3轮体外减...; 逯晓青; 关键词：噬菌体展示肽库膀胱癌 EJ细胞; 文献传递

基于噬菌体随机肽库研制新型酿酒酵母表面吸附剂: 重金属镉的污染问题是困扰科研工作者的严重问题。与传统重金属污染治理的方式相比,生物修复方式更为有效、方便、节约。然而,单纯地利用微生物修复的方式往往满足不了整治环境中重金属的要求。于是,我们利用生物展示肽库与细胞表面的展...; 曹晓婉; 关键词：含镉废水噬菌体肽库细胞固定化; 文献传递

应用噬菌体随机肽库技术筛选鼠疫耶尔森菌F1抗原中和性表位: 2015年; 目的:筛选鼠疫耶尔森菌F1抗原的中和性表位,构建基于鞭毛蛋白佐剂的重组表位疫苗。方法:利用鼠疫菌F1抗原的中和抗体F2H5筛选噬菌体随机12肽库,对得到的阳性克隆采用ELISA进行特异性鉴定,采用竞争抑制ELISA确定具有竞争性的噬菌体单克隆并对其DNA测序,重组表达并纯化获得肽序列与截短型鞭毛蛋白Fli Cdel的融合蛋白,并通过Western印迹和ELISA鉴定重组蛋白与F2H5的结合。结果:获得了2株能够与F1抗原竞争结合F2H5的噬菌体单克隆12-1和12-14,其中12-14的竞争能力较强;通过序列比对,并没有发现这2株噬菌体克隆的插入肽序列与F1抗原序列存在一致性,但这2个插入肽序列与Fli Cdel的重组蛋白在Western印迹和ELISA结果中均显示出能够被抗F1的单克隆抗体识别。结论:F1中和性抗体筛选出的肽序列与截短的鞭毛蛋白融合表达后能够被F2H5特异性识别,为进一步对重组表位抗原进行免疫保护评价奠定了基础。; 尹可欣迟象阳任军房婷刘树玲刘炬杨秀旭李建民于长明; 关键词：鼠疫耶尔森菌 F1抗原噬菌体随机肽库表位

噬菌体随机肽库筛选亲铬噬菌体及其在Cr(Ⅲ)分离富集中的应用: 本研究首先利用Ni-NTA亲和树脂制备了不同金属离子的亲和树脂,以NEB噬菌体七肽文库为作用对象,通过多轮正筛选和负筛选,去除对其他金属离子(Fe、Zn、Cu、Cd、Hg)有结合作用的噬菌体,保留对Cr(Ⅲ)具有亲和能力...; 张晓雨; 关键词：铬形态分析; 文献传递

运用噬菌体随机肽库筛选与DON毒素特异结合的亲和肽段: 2015年; 为获得与毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)高亲和力的特异性多肽,利用丁基硼酸封闭法制备DON人工抗原DON-HG-BSA,以其为靶分子筛选噬菌体肽库,对阳性克隆进行DNA序列测定与氨基酸推导,并进行亲和特异性验证。结果显示,经过4轮亲和肽段筛选与酶联免疫检测法鉴定,从M13噬菌体随机7肽库中得到15个DON人工抗原包被孔与牛血清白蛋白包被孔OD比值大于3.8的阳性克隆,其中10个与DON人工抗原高亲和力结合的阳性克隆经测序后共推导出4种多肽序列。经抗原梯度酶联免疫检测法验证,多肽MAPGWVP与DON人工抗原浓度的相关性高达0.99,对人工抗原具有高亲和力。该多肽的获得将为进一步开发高效的DON诊断试剂盒奠定基础。; 邢锦城张旭马鸿翔徐海侯继波; 关键词：酶联免疫检测小麦赤霉病

应用噬菌体随机肽库筛选阴道毛滴虫特异性B细胞表位: 背景与目的:　　阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis，Donne1837），是一种主要寄生于人体泌尿生殖道的鞭毛虫，它所引起的阴道毛滴虫病是常见的性传播疾病之一，据WHO统计，全球每年约有1.8亿人感染...; 杨森; 关键词：阴道毛滴虫噬菌体随机肽库 B细胞表位性传播疾病免疫原性; 文献传递

诺氟沙星模拟表位的淘选、应用及针对小分子噬菌体随机肽库的建立: 诺氟沙星为氟喹诺酮类药物,过度服用会造成细菌的耐药性。本研究以抗NFLX单抗为靶分子,采用噬菌体展示技术淘选到了NFLX模拟表位,并建立了基于NFLX模拟表位建立起了Phage-ELISA和Phage-CLEIA这两种免...; 熊争平; 关键词：诺氟沙星模拟表位免疫学检测噬菌体展示随机肽库; 文献传递

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