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白藜芦醇诱导大肠癌SW480细胞发生铁死亡及机制研究被引量:1
2022年
目的:研究白藜芦醇对大肠癌SW480细胞铁死亡的激活,并探讨其可能的作用机制。方法:利用不同剂量白藜芦醇(0、10、20、40、80、160μmol/L)干预SW480细胞24、48、72 h后,CCK8法分析白藜芦醇对细胞增殖抑制率的影响;不同剂量白藜芦醇(0、20、40、80μmol/L)干预SW480细胞48 h后,采用蛋白质印迹法分析谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、胱氨酸-谷氨酸反向转运体亚基xCT蛋白及二价金属离子转运体1(DMT1)的表达水平,流式细胞仪分析细胞内荧光强度用于监测活性氧(ROS)含量的变化。结果:白藜芦醇处理SW480细胞后,细胞增殖抑制率明显升高,表现出时间和浓度依赖性(P<0.05);白藜芦醇能够显著抑制细胞内xCT、GPX4蛋白表达,促使DMT1蛋白表达(P<0.05);还能诱导SW480细胞内ROS的积累(P<0.05)。结论:白藜芦醇通过抑制xCT、GPX4蛋白表达使SW480细胞中ROS大量累积,细胞发生铁死亡,DMT1的激活可能是其机制之一。
杨艳华张自雄
关键词:大肠肿瘤白藜芦醇
“莪黄灌肠液”对人大肠癌SW480细胞HIF-1α通路uPA、uPAR基因表达的影响被引量:1
2020年
目的:通过莪黄灌肠液对SW480细胞HIF-1α通路uPA、uPAR基因表达的影响,探讨莪黄灌肠液对SW480细胞侵袭与迁移的影响。方法:根据随机数学分组的原则,将50只健康SD雄性大鼠分成随机5组并逐个编号,体重控制在(200±20)g。通过预实验得出的药物分组量分别灌胃给药:莪黄灌肠液(莪黄汤)每毫升药液中含生药2 g,莪黄灌肠液(莪黄汤)组由低、中、高(6.075 g/kg,12.15 g/kg,24.3 g/kg)剂量组(灌胃剂量2 ml)组成,空白组为生理盐水组(灌胃剂量2 ml,pH 7.2),阳性对照组由腹腔注射氟尿嘧啶0.025 g/(kg·d),调整注射剂量1 ml构成。标准化灌胃1周,无菌条件下提取各组含药血清。在体外使用含药血清体培养SW480细胞,划痕实验观察莪黄灌肠液含药血清在体外对SW480细胞迁移能力的影响;Transwell实验检测肿瘤细胞侵袭能力;Western-blot实验检测各组细胞中HIF-1α、uPA、uPAR蛋白表达。结果:预实验提示莪黄灌肠液对大鼠无明显副作用。SW480细胞具有明显的迁移及侵袭能力。各组莪黄灌肠液含药血清能抑制SW480细胞的侵袭与迁移特性,其中莪黄灌肠液各组(24.3 g/kg,12.15 g/kg,6.075 g/kg)和氟尿嘧啶组较空白组均能够有效抑制肿瘤细胞的侵袭与迁移作用,且氟尿嘧啶组作用最强,中药24.3 g/kg组表现出的抑制侵袭作用较12.15 g/kg,6.075 g/kg组均强(P<0.05)。莪黄灌肠液含药血清作用于肿瘤细胞24 h后,其细胞内HIF-1α、uPA、uPAR蛋白含量均有明显的下降,HIF-1α、uPA、uPAR蛋白表现出浓度依赖性(P<0.05)。结论:"莪黄灌肠液"可能通过作用于HIF-1α通路抑制SW480细胞的侵袭与转移。
侯俊明贾勇文建华杨得振冯飞雪惠阳马宗慧赵唯含
关键词:大肠癌SW480细胞缺氧微环境UPA
四君子汤含药血清对RNA干扰后的大肠癌SW480细胞超微结构、端粒长度及h TERT表达的影响被引量:8
2019年
目的:运用四君子汤含药血清干预经RNA干扰后的大肠癌SW480细胞,观察其超微结构、端粒相对长度、端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA及蛋白表达变化,探讨四君子汤含药血清防治溃疡性结肠炎癌变的可能机制。方法:培养人大肠癌SW480细胞,经RNA干扰后,予低、中、高不同剂量的四君子汤含药血清,空白胎牛血清,美沙拉嗪含药血清,分别干预48h,运用透射电镜观察细胞超微结构,荧光定量PCR(SYBR Green法)和Westernblotting技术检测端粒相对长度、hTERT mRNA及蛋白表达变化。结果:经不同剂量四君子汤含药血清和美沙拉嗪含药血清干预后,RNA干扰后的大肠癌SW480细胞出现了自噬现象。各给药组端粒长度均明显小于空白组(P<0.05),其中四君子汤低剂量组端粒长度与美沙拉嗪组相当(P>0.05),中、高剂量组端粒长度大于美沙拉嗪组(P<0.05)。各给药组hTERT mRNA和蛋白表达明显低于空白组(P<0.05),其中四君子汤中剂量组hTERT mRNA表达明显低于美沙拉嗪组(P<0.05),低、高剂量组hTERT mRNA明显高于美沙拉嗪组(P<0.05),低、中剂量组hTRET蛋白表达明显低于美沙拉嗪组(P<0.05),高剂量组hTRET蛋白表达与美沙拉嗪组相当(P>0.05)。结论:四君子汤含药血清可能通过诱导细胞自噬,减缓炎症反应,下调hTERT表达,降低端粒酶活性,缩短端粒长度,抑制癌细胞增殖,达到防治溃疡性结肠炎相关癌变的效用。
黄晓燕王萌刘礼剑郑超伟刘熙荣李生发
关键词:HTERT人结肠癌细胞株
过表达CD44v6基因对人大肠癌SW480细胞侵袭迁移能力的影响被引量:3
2016年
目的:研究CD44v6基因过表达对SW480细胞侵袭和迁移能力的影响.方法:慢病毒介导的CD44v6过表达细胞(CD44v6组)和空载体对照细胞(NC组)由前期实验构建.采用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表达、实时荧光定量PCR检测CD44v6 mRNA表达水平、免疫荧光检测Flag标签蛋白三种方法重新鉴定过表达细胞模型;CCK-8法检测细胞增殖活性;划痕试验和Transwell试验检测细胞侵袭和迁移能力.结果:绿色荧光蛋白观察显示细胞转染效率近100%;实时荧光定量PCR显示CD44v6组细胞CD44v6 mRNA表达水平较对照组.显著升高(P<0.001);Flag标签蛋白免疫荧光染色显示过表达CD44v6蛋白主要定位于细胞膜.CCK-8结果显示2组细胞增殖无明显差异;划痕试验结果显示CD44v6组细胞划痕愈合指数较对照组显著增高(P<0.05);Transwell试验结果显示CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较对照组显著增高(均P<0.05),且CD44v6抗体处理后,CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较前显著减低(均P<0.05).结论:CD44v6基因过表达能显著增强SW480细胞侵袭和迁移能力.
吕林刘海光张筱骅
关键词:大肠癌CD44V6过表达
FOXQ1基因在大肠癌SW480细胞的EMT中的作用
目的:探讨FOXQ1(Forkhead Box Q1,FOXQ1)基因对大肠癌细胞的上皮-间质转化(Epithelial-Mesenchymal transition,EMT)的作用及其可能的机制。  方法:构建针对人类...
彭旭东
关键词:上皮间质转化大肠癌SW480细胞
阿霉素对大肠癌SW480细胞周期及周期相关蛋白表达的影响
2014年
目的探讨阿霉素对大肠癌SW480细胞周期及周期相关蛋白表达的影响。方法体外培养SW480细胞,随机分为A(空白对照组)、B、C、D、E组,阿霉素浓度分别为0、2.5、5、10、20μg/mL。采用MTT法测定各组细胞培养12、24、48、72 h后的细胞生长抑制率;流式细胞术分析各组细胞培养48 h后细胞周期;Western blot法测定各组细胞培养48 h后SW480细胞周期相关蛋白Cyclin B1、Cyclin A表达水平。结果阿霉素抑制SW480细胞增殖具有浓度和时间依赖性。不同浓度阿霉素作用于SW480细胞48 h后,D、E组G0/G1期细胞百分率低于A、B、C组,SubG1期细胞百分率、凋亡指数(AI)高于A、B、C组,P均<0.05;与A组比较,B、C组Cyclin B1表达量增高(P均<0.05),D、E组表达量下降(P均<0.05);随着阿霉素浓度增加,Cyclin A的表达量逐渐降低(P<0.05)。结论阿霉素可将SW480细胞周期阻滞于G0/G1期,影响细胞周期及Cyclin B1、Cyclin A的表达。
孟永亮孙彦
关键词:大肠肿瘤阿霉素SW480细胞细胞周期
3-甲基腺嘌呤对人耐药大肠癌SW480细胞增殖及自噬活性的影响被引量:2
2014年
目的 :研究自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对耐5-氟尿嘧啶(5-Fu)结肠癌SW480细胞增殖及自噬活性的影响,探讨自噬抑制剂在逆转结直肠癌耐药中的作用。方法:浓度递增筛选法诱导耐5-Fu(100μg/L)的SW480细胞株,用10μmol/L浓度的3-MA处理后,再用5-Fu(浓度200μg/L)作用24 h。采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,丹酰戊二胺(MDC)染色和电镜检测细胞自噬活性变化。结果:3-MA对耐药细胞自噬活性的抑制率达89.7%,增殖抑制率为9.6%,凋亡率为5.7%,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。经3-MA处理后,5-Fu对耐药SW480细胞增殖抑制率达71.6%±2.9%,凋亡率达36.6%±2.9%,而单用5-Fu细胞增殖抑制率仅为23.6%±2.9%,凋亡率仅为10.3%±2.5%,3-MA预处理后5-Fu对耐药细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显增强(P<0.05),自噬泡数量显著减少,自噬活性明显降低(P<0.05)。结论:3-MA单用时仅有较弱的抗肿瘤作用,与5-FU联用时耐药细胞的增殖及自噬活性被显著抑制,增强了SW480耐药细胞对5-Fu的敏感性,提高了化疗效果。
胡万乐王玲琴陈苏苹陈荣
关键词:结直肠肿瘤氟尿嘧啶耐药
蜂胶黄酮PB3A对人大肠癌SW480细胞株CXCL1和FOS基因表达的影响被引量:6
2014年
目的探讨蜂胶黄酮短叶松素-3-乙酸酯(pinobanksin-3-acetate,PB3A)处理SW480细胞后CXCL1和FOS基因表达的改变及其与PB3A抑制人大肠癌细胞增殖的关系。方法采用实时荧光定量RT-PCR和Western blot法检测PB3A(100 mg/L)处理24小时后SW480细胞的CXCL1和FOS基因转录和蛋白质表达水平。结果药物干预诱导CXCL1基因的mRNA转录水平下调,差异倍数为0.03(ΔCT比较,P<0.01),蛋白质表达强度也降低(0.24±0.03)与非干预的对照组(0.52±0.04)比较表达水平差异有统计学意义(P<0.01);药物干预诱导FOS基因的mRNA转录水平上调,差异倍数为13.64(ΔCT比较,P<0.01),蛋白质表达水平也升高(1.43±0.16),与非干预的对照组(0.58±0.07)比较表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。结论蜂胶黄酮PB3A抗人大肠癌细胞的作用可能与其下调CXCL1基因和上调FOS基因的表达有关。
祖丽比亚.司马义布威海丽且木.阿巴拜科日买热艳木.艾尔肯其曼古丽.吐尔洪阿达莱提.麦麦提依米提.热合曼
关键词:黄酮药物作用逆转录聚合酶链反应
5-Fu诱导人大肠癌SW480细胞株耐药与自噬活性的变化被引量:5
2013年
目的:观察结直肠癌细胞产生5-Fu耐药过程中自噬水平的变化,探讨自噬活性变化在结直肠癌细胞耐药形成过程中的作用。方法:用浓度递增筛选法诱导耐受不同5-Fu浓度的耐药SW480细胞株,MDC染色和透射电镜观察SW480细胞内的自噬泡数量,CCK-8法检测细胞活力。结果:成功的诱导出三个水平的耐药细胞株;随着耐药浓度的升高,结直肠癌细胞的自噬水平逐渐增高,高水平耐药细胞株内自噬泡的数量较低水平耐药及正常SW480细胞显著增高(P<0.05),而5-Fu对其抑制率却相应的降低。结论:细胞自噬活性的增加参与了结直肠癌细胞对5-Fu的耐药过程。
胡万乐何占红蒋芳刘长宝
关键词:自噬耐药SW480
稳定表达荧光素酶的人大肠癌SW480细胞系及其构建方法
本发明涉及稳定表达荧光素酶的人大肠癌SW480-luc细胞系及其构建方法。该细胞系利用阳离子脂质体将携带荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的PGL4.51[luc2/CMV/neo]质粒转染入人大肠癌SW480细胞株;转染...
徐少勇王璠魏刚
文献传递

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李美宁
作品数:56被引量:137H指数:6
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程牛亮
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研究主题:大肠癌SW480细胞 HTERT RNA干扰抑制 端粒酶活性 RNAI
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作品数:6被引量:5H指数:1
供职机构:山西医科大学
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