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落新妇苷抑制弹力蛋白酶诱导的腹主动脉瘤扩张的效果研究: 目的:研究落新妇苷对腹主动脉瘤的抑制作用方法:将30只Sprague Dawley品系大鼠随机分为5组,假手术组(Sham)、实验1组(低剂量)、实验2组(中剂量)、实验3组(高剂量)、AAA组(对照组)。5组大鼠分别用...; 李若曦; 关键词：腹主动脉瘤落新妇苷中药基质金属蛋白酶

人工血管补片成形结合弹力蛋白酶灌注法构建比格犬腹主动脉瘤动物模型及建模效果验证: 2023年; 目的评估人工血管补片成形结合弹力蛋白酶灌注法构建比格犬腹主动脉瘤(abdominal aortica neurysm,AAA)疾病模型的效果。方法本研究共纳入60只比格犬,除10只作为对照组以获取正常腹主动脉壁组织外,其余50只均使用人工血管补片成形结合弹力蛋白酶灌注法行AAA建模,于建模术后14 d行腹部血管超声检查,建模术后28 d行超声及CTA检查评估建模效果。评估建模成功的标准为腹主动脉瘤体最大直径较肾动脉下方正常腹主动脉直径增大超过50%。AAA建模术后35 d处死20只建模组及5只对照组比格犬,并获取肾下段腹主动脉,行HE、Masson及弹力纤维染色观察腹主动脉组织的病理特征。结果共50只比格犬接受AAA建模,平均手术时间为(119.4±18.9) min,平均麻醉时间为(137.4±15.8) min,术中平均出血量为(43.6±7.7) mL,术中腹主动脉平均阻断时间为(39.7±5.3) min,术中测量腹主动脉平均直径为(6.5±0.4) mm。术中死亡率为0%,术后30 d死亡率2%(1只)。术后彩超及CTA检查结果提示49只比格犬建模成功率为100%,病理检查提示动物疾病模型在形态学及病理改变两个层次均较好地模拟了人AAA的相关病理生理变化。结论人工血管补片成形结合弹力蛋白酶灌注法可用于构建比格犬AAA疾病模型,该方法成瘤效果稳定可靠,且手术操作容易复制,是一种结合了既往建模方式优点的AAA动物建模方法,可在该模型的基础上进行AAA的发病机制研究。; 葛劲廷朱臣谋翁诚馨袁丁; 关键词：腹主动脉瘤

弹力蛋白酶灌注诱导小鼠腹主动脉瘤模型建立及机制研究: 2021年; 目的通过弹力蛋白酶灌注法构建小鼠腹主动脉瘤模型,为腹主动脉瘤形成相关机制研究提供参考。方法选用C57BL/6野生型小鼠构建猪胰蛋白酶(PPE)灌注模型,对照组用生理盐水(Saline)进行灌注,灌注后14天解剖比较腹主动脉直径的变化,HE染色并测量腹主动脉管腔直径,弹力板染色观察腹主动脉壁弹力板的破坏情况,TUNEL法来评估动脉瘤组织中的细胞凋亡情况。结果通过猪胰蛋白酶(PPE)灌注法成功构建了小鼠腹主动脉瘤模型,术后14天成瘤率100%,建模后小鼠腹主动脉直径明显增加,高于Saline对照组(P<0.05);PPE组观察到主动脉壁弹力板拉直、变薄,并出现中断现象;PPE组TUNEL阳性细胞比例明显高于Saline对照组(P<0.05)。结论弹力蛋白酶灌注法能够较为稳定地构建腹主动脉瘤模型,我们在模型中观察到腹主动脉壁中层弹力板的破坏及细胞凋亡过程的上调。为更进一步研究腹主动脉瘤发病机制提供参考。; 李光李平张帅尤斌; 关键词：腹主动脉瘤小鼠模型

基于中性粒细胞弹力蛋白酶介导的通路研究地胆头干预慢性阻塞性肺疾病患者气道黏液高分泌及疗效观察被引量：14: 2021年; 目的:观察地胆头对慢性阻塞性肺疾病(简称:慢阻肺)疗效,探讨其对慢阻肺急性加重期病人中性粒细胞弹力蛋白酶(NE)介导的气道黏液高分泌MUC5AC的影响,并观察其对肺功能(FEV1、FEV1/FVC)的影响,以期为慢阻肺的治疗提供新依据。方法:将160例慢阻肺急性加重病人,随机分成观察组与对照组各80例,观察组在常规诊治基础上加用地胆头液雾化吸入,两组均治疗2周,选同期80名健康体检者为健康对照组;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测观察组、对照组诊疗前后及健康对照组血清中NE、MUC5AC表达,比对分析观察组、对照组治疗后FEV1、FEV1/FVC变化,并观察地胆头对慢阻肺病人的疗效。结果:与对照组比较,观察组总有效率优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组及对照组血清NE、MUC5AC与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗前后血清NE、MUC5AC、FEV1、FEV1/FVC比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后血清NE、MUC5AC与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05),FEV1/FVC、FEV1升高明显优于对照组诊疗后(P<0.05)。结论:地胆头能够明显提高慢阻肺急性加重住院患者临床治疗效果,改善肺功能及气道黏液高分泌状态,可有效抑制其血液中NE、MUC5AC的表达,观察组、对照组治疗后血清中NE、MUC5AC存在明显差异(P<0.05),呈正相关关系,提示地胆头液抑制慢阻肺患者MUC5AC的分泌可能与NE介导的通路相关。; 贾盼红李琪熊晓嫚周向东; 关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重气道黏液高分泌 NE MUC5AC

内质网应激通路需肌醇酶1α/X盒结合蛋白1在中性粒细胞弹力蛋白酶诱导的气道黏液分泌中的作用被引量：3: 2019年; 目的·探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应在中性粒细胞弹力蛋白酶(neutrophil elastase,NE)诱导人气道上皮细胞黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)分泌中的作用及机制。方法·培养人气道上皮细胞HBE16,分别给予活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)、ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyrate,4-PBA)预处理,或分别转染需肌醇酶1α(inositol-requiring kinase 1α,IRE-1α)小干扰RNA(siRNA)、X盒结合蛋白1(X-boxbinding protein 1,XBP-1)siRNA,再予以NE刺激;同时设单纯NE组和空白对照组。试剂盒检测ROS的生成水平;Westernblotting检测干预后ERS相关信号分子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(phosphorylated protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,pPERK)、活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)、磷酸化IRE-1α(pIRE-1α)及XBP-1蛋白表达量的变化;实时荧光定量PCR检测剪切的XBP-1(XBP-1s)mRNA水平;ELISA和免疫荧光检测MUC5AC在各组细胞中的蛋白表达情况。结果·与空白对照组相比,NE刺激24 h后细胞ROS含量增加,GRP78、ATF6、pPERK及pIRE-1α蛋白水平均显著升高(均P<0.05),XBP-1s mRNA及蛋白表达也明显增加(均P<0.05),同时MUC5AC蛋白表达增加(均P<0.05);NAC及4-PBA预处理后均使上述ERS相关蛋白表达较单纯NE组降低(均P<0.05),MUC5AC蛋白水平降低(均P<0.05);转染IRE-1αsiRNA或XBP-1 siRNA,细胞中MUC5AC蛋白表达也较单纯NE组明显降低,同时XBP-1s mRNA及蛋白表达也有明显下降(均P<0.05)。结论·NE通过产生ROS引起ERS反应,诱导MUC5AC蛋白表达及分泌增加,ERS通路IRE-1α/XBP-1在其中发挥着一定的作用。; 李琪周向东曾曼Victor P.KOLOSOVJuliy M.PERELMAN; 关键词：内质网应激活性氧黏蛋白5AC

胰弹力蛋白酶联合血管紧张素Ⅱ制作兔腹主动脉瘤模型的效果观察被引量：1: 2018年; 目的观察胰弹力蛋白酶腔内灌注联合血管紧张素Ⅱ皮下持续泵入制作兔腹主动脉瘤模型的效果。方法选取健康新西兰雄性白兔20只,随机分为A组和B组,每组10只。制备腹主动脉瘤模型,A组经导管给予腹主动脉内灌注弹力蛋白酶,B组给予腹主动脉内灌注弹力蛋白酶联合皮下持续泵注血管紧张素Ⅱ。分别于术前及术后2、4、16周测血压,行腹主动脉彩色超声检查,并检测血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9水平;16周时处死兔,取血管标本行苏木精-伊红染色、EVG弹力纤维染色、Masson染色及免疫组织化学CD_(68)巨噬细胞染色。结果术后2、4、16周时,B组血压明显高于A组[(92±9)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)比(73±7)mmHg、(105±9)mmHg比(74±6)mmHg、(102±10)mmHg比(73±7)mmHg](P<0.05)。术后2周时,2组成瘤率及扩张率差异无统计学意义(P>0.05);术后4、16周时,A组和B组成瘤率及瘤体直径扩张率差异有统计学意义(4周:5/7比10/10、68.0%比96.0%,16周:1/7比10/10、12.0%比104.0%)(P<0.05)。术后2周时2组MMP-2、MMP-9水平均明显高于术前,术后4、16周时仅B组MMP-2、MMP-9水平明显高于术前;术后4、16周时,B组MMP-2、MMP-9水平明显高于A组[4周:(31.4±0.7)μg/L比(22.9±0.5)μg/L、(83.9±3.2)μg/L比(58.6±2.5)μg/L;16周:(29.2±0.9)μg/L比(21.8±0.7)μg/L、(85.1±2.9)μg/L比(53.1±2.0)μg/L](P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,B组CD_(68)阳性细胞染色累积吸光度值明显低于A组[(5 624±986)比(8 937±1 021)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论胰弹力蛋白酶腔内灌注联合皮下持续泵入血管紧张素Ⅱ是一种可靠的制作兔腹主动脉瘤模型的方法,可使腹主动脉瘤较长时间维持瘤体的形态。; 聂毛晓张学慧闫云峰冯婷婷赵欣赵全明; 关键词：腹主动脉瘤弹力蛋白酶兔模型

低浓度弹力蛋白酶不同腔内灌注压力对建立兔腹主动脉瘤模型的影响被引量：1: 2018年; 目的探讨不同灌注压力条件下,经腹主动脉腔内灌注低浓度弹力蛋白酶对兔腹主动脉瘤(AAA)成瘤率及死亡率的影响。方法 30只雄性新西兰大白兔随机分为A、B、C三组,每组各10只,均经双腔导管向腹主动脉腔内注入10μl浓度为50 u/ml的弹力蛋白酶,灌注保持时间为7～10 min,灌注保持压力分别为A组0 mmHg,B组100～200 mmHg,C组300～400 mmHg,分别于术前及术后第7天行腹主动脉超声检查,计算各组腹主动脉扩张率、成瘤率及存活率,后处死动物,对血管灌注部位行组织病理及免疫组织化学染色。结果将灌注后血管直径大于正常腹主动脉内经的50%者定义为腹主动脉瘤形成。A组存活10只,灌注部位血管扩张率为(16±9.4)%,成瘤率为0%,存活率为100%;B组存活10只,灌注部位血管扩张率为(98.8±16.4)%,成瘤率100%,存活率为100%;C组存活4只,存活动物灌注部位血管扩张率为(110±13.3)%,成瘤率100%,存活率为40%。结论经腹主动脉腔内灌注低浓度弹力蛋白酶(50 u/ml),将灌注压保持在100～200 mmHg,能够在较短时间内成功制备腹主动脉瘤模型,且成瘤率高、死亡率低。; 张学慧赵全明聂毛晓闫云峰陈雪冯婷婷赵欣张明多; 关键词：腹主动脉瘤弹力蛋白酶

高浓度弹力蛋白酶不同灌注保持时间对建立兔腹主动脉瘤模型的影响: 2017年; 目的通过经腹主动脉腔内灌注高浓度弹力蛋白酶建立兔腹主动脉瘤(AAA)模型,观察不同灌注保持时间对兔AAA成瘤率及死亡率的影响。方法 24只新西兰雄兔随机分为A组、B组、C组各8只,每组均经双腔导管注入10μl、浓度为100 U/ml的弹力蛋白酶,灌注保持时间A组3~5 min,B组7~10 min,C组20~30 min;后用生理盐水冲洗管腔3次;分别于术前及术后第7天行腹主动脉彩超检查,术后第7天处死动物,行组织学病理染色观察血管灌注部位组织学变化。结果 A组存活8只,灌注局部血管扩张率40.3%~63.1%,其中5只扩张率大于50%,达到AAA成瘤标准,成瘤率62.5%,术后7 d存活率100%;B组存活8只,局部血管扩张率87.5%~109.2%,均达到成瘤标准,成瘤率100%,术后7 d存活率100%;C组存活3只,灌注局部血管扩张率237.7%~252.0%,成瘤率100%,术后7 d存活率为37.5%。结论高浓度弹力蛋白酶制作兔AAA模型,灌注时间保持7~10 min具有成瘤率高、死亡率低、操作简易等优点,易于推广。; 聂毛晓赵全明闫云峰李昕和冯婷婷赵欣张明多; 关键词：腹主动脉瘤弹力蛋白酶

不同浓度弹力蛋白酶对建立兔腹主动脉瘤模型成瘤率的影响被引量：1: 2016年; 目的通过腹主动脉腔内低压力灌注猪胰弹力蛋白酶建立兔腹主动脉瘤模型,探索不同浓度猪胰弹力蛋白酶对兔腹主动脉成瘤率的影响。方法新西兰雄兔50只,体质量(2.50±0.20)kg,随机分为5组:A组、B组、C组、D组、E组,每组各10只。A组经双腔导管注入生理盐水10μl,其余4组经双腔导管注入10μl浓度分别为1U/ml、10U/ml、100U/ml、200U/ml的猪胰弹力蛋白酶,灌注保持7min。术后第7天处死动物,分别于术前及术后第7天行腹主动脉彩超检查,观察灌注血管部位变化。结果 E组实验动物存活率较A组、B组、C组及D组明显下降(40%vs 90%、90%、90%及90%)。腹主动脉术后最大直径随给予灌注浓度增加而增大。与术前最大直径比较,A组及B组术后最大直径未见明显扩张;C组、D组及E组术后最大直径明显扩张;D组及E组较A组、B组及C组,术后第7天腹主动脉扩张率[(125.40±16.10)%及(248.20±5.60)%vs 0%、(24.90±2.50)%及(43.90±7.69)%,P<0.05]及成瘤率[100.0%及100.0%vs 0%、0%及33.3%,P<0.05]均明显升高。结论高浓度猪胰弹力蛋白酶(100U/ml)在低压力状态下较短时间灌注可成功建立兔腹主动脉瘤模型,且成瘤率高、死亡率低。; 聂毛晓赵全明闫云峰李昕和冯婷婷赵欣张明多; 关键词：胰弹性蛋白酶存活率

高浓度弹力蛋白酶低压力下腔内灌注制备兔腹主动脉瘤模型被引量：2: 2016年; 目的：探讨高浓度（100IU/mL）弹力蛋白酶在低压力下,短时间腔内灌注制备兔腹主动脉瘤模型的新方法,为腹主动脉瘤的研究提供简便、易制作的动物模型。方法：雄性新西兰大白兔30只,按1：2的比例随机分为对照组（A组）10只,实验组（B组）20只,实验组在低压力下灌注高浓度（100IU/mL）弹力蛋白酶,并维持7-10min,对照组灌注0.9%氯化钠液,所有动物于术后第3周超声检查,后处死所有动物进行大体标本观察并行病理染色（HE、弹力纤维EVG、胶原纤维masson）,比较组间病死率及病死率有无差别。结果：实验组动物病死率为15%,对照组病死率为20%,两组比较,差异无统计意义（P〉0.05）。实验组成瘤率为100%,动脉壁弹力纤维降解,平滑肌细胞减少;对照组成瘤率为0%,动脉壁正常结构未见明显破坏,两组成瘤率比较,差异有统计学意义（P〈0.001）。结论：腔内灌注高浓度弹力蛋白酶（100IU/mL）在低压力状态下,短时间内可成功制备家兔腹主动脉瘤模型,其病死率低,病死率高。; 闫云峰赵全明李昕禾聂毛晓; 关键词：腹主动脉瘤弹力蛋白酶

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