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细胞因子与类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞: 2024年; 类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种伴有多个关节肿、痛、畸形的免疫性疾病,严重情况下会引起关节功能的严重障碍,现已证实成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)与RA有极强的关联性,RA-FLS在RA发病机制中起关键作用。RA-FLS可自行产生多种炎性细胞因子,也可被某些细胞因子或物质刺激而产生多种炎性细胞因子,这些炎性细胞因子可增加RA-FLS的侵袭性和增殖能力,并减少RA-FLS的凋亡,从而进一步加重关节炎。文章重点探讨了几种可对RA-FLS产生影响的细胞因子,以期为治疗RA提供新的思路。; 李山山王皓周海舟; 关键词：成纤维样滑膜细胞肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-1Β 白细胞介素-6 白细胞介素-17

从NF-κB/Bcl-2信号通路调控成纤维样滑膜细胞凋亡角度探讨中医药抑制类风湿关节炎滑膜炎症机制的研究进展: 2024年; 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎症为主要特征的自身免疫性疾病,成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的抗凋亡是导致该病病情发展的主要因素。如何促进FLS凋亡并抑制炎症反应是目前RA治疗和研究的重点。核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)/B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)信号通路在RA发病过程中发挥了关键作用,其与FLS炎症倾向、抗凋亡等密切相关。研究并探讨NF-κB/Bcl-2信号通路调控FLS凋亡的机制及作用,介绍中医药靶向该通路促进FLS凋亡进而抑制RA滑膜炎症的研究现状,旨在为中医药治疗RA的研究提供一定基础。; 陈平杜小正王海东井维尧刘翠李浩林陶鹏飞王金磊; 关键词：类风湿关节炎滑膜炎症成纤维样滑膜细胞凋亡

雷公藤甲素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞线粒体自噬、NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的影响被引量：1: 2024年; 目的探究雷公藤甲素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(FLSs)线粒体自噬、NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化和细胞焦亡的影响。方法将FLSs细胞和类风湿关节炎FLSs细胞进行传代培养。将类风湿性关节炎FLSs细胞采用0、10、20、40 ng/mL雷公藤甲素进行处理。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测线粒体自噬相关蛋白LC3B、p62、PHB2、NLRP3的蛋白表达。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18的水平。采用流式细胞术检测细胞焦亡情况,并采用Western blotting法检测焦亡相关蛋白GSDMD和GSDMD-N表达。结果采用10、20、40ng/mL雷公藤甲素处理类风湿关节炎FLSs后,雷公藤甲素各剂量组均能显著减弱类风湿关节炎FLSs细胞的线粒体自噬相关蛋白LC3B的表达,上调p62和PHB2的表达;NLRP3表达水平均显著降低,IL-1β和IL-18水平显著降低;细胞焦亡率显著降低;GSDMD蛋白表达显著上升,GSDMD-N蛋白表达下降(P<0.05、0.01、0.001),且呈剂量相关性。结论雷公藤甲素能通过抑制线粒体自噬、NLRP3炎症小体激活和细胞焦亡,抑制细胞炎症反应。; 康艳慧穆萍萍张海雷; 关键词：雷公藤甲素类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞

盐酸小檗碱对强直性脊柱炎患者成纤维样滑膜细胞体外增殖和成骨分化的影响: 2024年; 目的:探讨盐酸小檗碱对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)患者成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)体外增殖和成骨分化的影响。方法:从AS患者的髋关节滑膜组织中分离培养FLS,经免疫荧光染色鉴定后进行后续实验。取第3代FLS,以白细胞介素(interleukin, IL)-17、IL-23预处理,再以0μmol·L^(-1)(空白组)、80μmol·L^(-1)(盐酸小檗碱低剂量组)、120μmol·L^(-1)(盐酸小檗碱中剂量组)、200μmol·L^(-1)(盐酸小檗碱高剂量组)的盐酸小檗碱干预后,采用光学显微镜观察细胞增殖情况,以酶联免疫吸附法检测炎症因子水平和骨稳态调节因子水平,通过茜素红染色观察细胞成骨分化情况。结果:(1)炎症因子水平测定结果。盐酸小檗碱低、中、高剂量组IL-17、IL-23、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平均低于空白组(IL-17:P=0.046,P=0.005,P=0.004;IL-23:P=0.024,P=0.002,P=0.000;IL-6:P=0.012,P=0.000,P=0.000;TNF-α:P=0.012,P=0.004,P=0.001),盐酸小檗碱中、高剂量组IL-17、IL-23、IL-6、TNF-α水平均低于盐酸小檗碱低剂量组(IL-17:P=0.034,P=0.024;IL-23:P=0.020,P=0.000;IL-6:P=0.000,P=0.000;TNF-α:P=0.012,P=0.002),盐酸小檗碱高剂量组IL-17、IL-23、IL-6、TNF-α水平均低于盐酸小檗碱中剂量组(IL-17:P=0.029;IL-23:P=0.014;IL-6:P=0.005;TNF-α:P=0.026)。(2)FLS增殖情况观察结果。光学显微镜观察结果显示,与空白组相比,盐酸小檗碱低、中、高剂量组细胞间隙增大、凋亡细胞数量增加,变化程度呈现剂量依赖性。(3)FLS成骨分化情况观察结果。与空白组相比,盐酸小檗碱低、中、高剂量组茜素红染色程度均降低,而且降低程度呈现剂量依赖性。(4)骨稳态调节因子水平测定结果。盐酸小檗碱低、中、高剂量组Dickkopf相关蛋白1(dickkopf-related protein 1,DKK-1)和核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator of NF-κB ligand, RANKL)水平均低于空白组(DKK-1:P=0.048,P=0.032,P=; 刘跃振张邦能汪丽娟孟祥云张磊李红专; 关键词：脊柱炎强直性小檗碱成纤维样滑膜细胞

兔膝骨关节炎成纤维样滑膜细胞分离培养方法的研究被引量：1: 2024年; 目的在传统细胞组织块培养方法的基础上进行改进,建立一种简单、可重复性操作的兔膝骨关节炎成纤维样滑膜细胞分离培养方法。方法通过手术诱导建立兔膝骨关节炎模型,在无菌条件下,快速取出兔膝骨关节炎的滑膜组织,经过冲洗处理后剪成一定大小碎片,用无菌滤纸吸净组织上附着的水分,接种在培养皿后,进行观察、换液、传代、拍照。将原代培养的细胞传至第三代细胞接种于96孔板中,采用噻唑蓝(MTT)法分别在不同时间梯度检测各孔对应吸光度,制作生长曲线;采用免疫荧光染色法观察细胞中波形蛋白的表达情况。结果培养的细胞为典型的梭形,符合成纤维样滑膜细胞的生长形态特征,免疫荧光染色显示波形蛋白强表达。结论改进后的组织块培养方法简单、操作可重复性强,可以获得大量兔膝骨关节炎成纤维样滑膜细胞,为后续膝骨关节炎的机理研究提供了大量细胞支持。; 陈芳朱以良张传成刘琴喻晶杨丽君张宜; 关键词：膝骨关节炎成纤维样滑膜细胞

芒果苷抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖、迁移及炎性因子的表达: 2024年; 背景:芒果苷是一种从芒果叶、树皮、根中提取的双苯吡酮类化合物,前期研究表明芒果苷可以通过NF-κB、JAK/STAT等转录因子的活化发挥抗全身性炎症作用。目的:探讨芒果苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synovial cells,RA-FLS)增殖、迁移和炎症因子表达的影响及机制。方法:RA-FLS分为空白组、R848(TLR7/8激动剂)刺激组、芒果苷低、中、高浓度组(2,4,8μg/mL)、阳性对照组(Cu-CPT8,TLR8通路抑制剂)。CCK-8法检测不同质量浓度芒果苷对RA-FLS毒性的影响并筛选最终细胞用药质量浓度,细胞克隆形成实验检测RA-FLS的增殖能力,划痕实验及Transwell迁移实验检测RA-FLS的迁移能力,qRT-PCR检测RA-FLS中白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA的表达。结果与结论:①与空白组比较,2-10μg/mL的芒果苷干预组对RA-FLS活力有抑制趋势,但差异不显著(P>0.05),说明对RA-FLS的毒性影响很小;②与R848刺激组比较,芒果苷低、中、高浓度组RA-FLS克隆数、划痕愈合率及迁移细胞数均降低(P<0.01);芒果苷中浓度和高浓度组白细胞介素1β、白细胞介素6及肿瘤坏死因子αmRNA的表达降低(P<0.01);③与R848刺激组比较,阳性对照组细胞克隆数、划痕愈合率及迁移细胞数以及白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01);白细胞介素1βmRNA表达水平无明显差异;④结果表明,芒果苷可能通过TLR7/8信号通路抑制RA-FLS增殖、迁移以及炎症因子表达发挥抗类风湿关节炎的作用。; 胡梦凡颜秋慧邓梦然梁美美梁亮易思思邓家刚运晨霞; 关键词：类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞芒果苷增殖迁移

盐酸小檗碱对强直性脊柱炎成纤维样滑膜细胞的影响: 2024年; 目的:探讨盐酸小檗碱对脂多糖诱导的强直性脊柱炎成纤维样滑膜(FLS)细胞增殖、迁移及侵袭的影响及分子机制。方法:从强直性脊柱炎患者滑膜组织活检中分离出成纤维样滑膜细胞进行培养。待成纤维样滑膜细胞传至第3代后,用脂多糖提前预处理细胞24 h,再用含有不同浓度盐酸小檗碱的培养基干预细胞24 h。随后,采用倒置显微镜观察盐酸小檗碱对成纤维样滑膜细胞的形态学变化,CCK-8检测盐酸小檗碱对脂多糖刺激下成纤维样滑膜细胞增殖的影响,平板克隆形成实验和钙黄绿素/碘化丙啶(Calcein/PI)染色实验检测盐酸小檗碱对脂多糖刺激下成纤维样滑膜细胞增殖的影响,Hoechst33342染色实验和Annexin-V/PI流式细胞仪检测盐酸小檗碱对脂多糖刺激下成纤维样滑膜细胞凋亡的影响,ELISA检测盐酸小檗碱对脂多糖刺激下成纤维样滑膜细胞上清液中IL-6、TNF-α、IL-17、IL-23表达水平的影响,Transwell小室实验检测盐酸小檗碱对成纤维样滑膜细胞侵袭能力的影响,划痕实验检测盐酸小檗碱对成纤维样滑膜细胞迁移能力的影响,用蛋白质印迹技术检测盐酸小檗碱对脂多糖刺激下成纤维样滑膜细胞中相关凋亡、迁移及通路蛋白表达水平的影响。结果:与空白组相比,盐酸小檗碱处理组(观察组)对脂多糖刺激下成纤维样滑膜细胞的增殖、侵袭、迁移力及炎性因子均具有一定的抑制作用,且诱导脂多糖刺激下成纤维样滑膜细胞的凋亡。盐酸小檗碱可以上调Bax、Cleaved-casepase-3、E-cadherin的相对表达(P<0.01),且下调Bcl-2、IL-17、IL-23、c-Jun NH2末端激酶和细胞外信号调节蛋白激酶、N-cadherin的表达水平(P<0.01)。结论:盐酸小檗碱抑制成纤维样滑膜细胞的增殖、侵袭及迁移能力并诱导其凋亡,该机制可能与抑制p-JNK、p-ERK1/2通路有关。; 刘跃振张邦能汪丽娟孟祥云张磊李红专张效收; 关键词：盐酸小檗碱强直性脊柱炎成纤维样滑膜细胞增殖迁移

基于IL-23/IL-17信号通路探讨黄连提取物小檗碱对强直性脊柱炎成纤维样滑膜细胞的影响: 目的:基于IL-23/IL-17信号通路探讨黄连提取物小檗碱(Berberine,BBR)对脂多糖诱导的强直性脊柱炎(Ankylosing spondylitis,AS)成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like ...; 刘跃振; 关键词：强直性脊柱炎成纤维样滑膜细胞

CircHIPK2促进类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的机制初探: 目的:探讨circHIPK2在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜中的表达情况,分析其与RA患者临床指标的相关性,验证circHIPK2在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(rheumatoi...; 王雯鑫; 关键词：类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞

人参皂苷CK对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞凋亡/自噬的调控作用: 2024年; 目的基于PKM2/mTOR信号通路探讨人参皂苷CK(ginsenoside compound K,CK)对大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)凋亡/自噬的调控作用和机制。方法将SD大鼠分为正常组(n=10)、模型组(n=10),CK组(n=10)和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)组(n=10)。大鼠右后足跖皮内注射10 mg/mL弗氏完全佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)0.1 mL,制备大鼠AA模型。注射免疫后第15天开始,CK组每天灌胃给药80 mg/kg CK,连续18 d;MTX组每天灌胃给药0.5 mg/kg MTX,每3 d给药一次。每3 d记录大鼠体质量,全身关节炎评分,关节炎指数和足爪肿胀度;计算脾脏和胸腺指数;Western blot检测FLS凋亡和自噬相关蛋白及PKM2和mTOR通路相关蛋白的表达;过表达质粒试剂盒检测FLS自噬流;流式细胞术检测FLS凋亡。结果与AA组比较,CK组和MTX组全身炎症评分、关节炎指数、足爪肿胀度和脾脏指数明显降低(P<0.05),Bax、p62和p-mTOR/mTOR的蛋白水平显著上调(P<0.05),Beclin1、Bcl-2和PKM2的蛋白水平显著下调(P<0.05),FLS凋亡率升高(P<0.05),自噬小体减少。MTX组和CK组全身炎症评分、关节炎指数、足爪肿胀度和脾脏指数的差异无统计学意义(P>0.05)。结论CK可能通过PKM2/mTOR信号通路调节大鼠FLS凋亡/自噬缓解AA大鼠关节炎症。; 王颖张韩梦鲍秀蓉王亚婷江婷婷温婧依刘勤伟宋宜宁魏芳; 关键词：成纤维样滑膜细胞佐剂性关节炎自噬凋亡

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