目的以高滴度天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)转基因小鼠为模型,分析AK auto Ab在抵御金黄色葡萄球菌感染中的作用。方法取天然抗角蛋白自身抗体转基因小鼠及阴性对照小鼠,ELISA法检测小鼠腹腔冲洗液总IgM、抗角蛋白IgM抗体以及抗金黄色葡萄球菌IgM抗体水平:腹腔接种金黄色葡萄球菌制备感染模型,检测腹腔接种金黄色葡萄球菌后腹腔及肾脏菌落形成单位数量.测定菌负荷,流式细胞仪检测中性粒细胞比率、炎症因子浓度等。结果ELISA检测发现,转基因小鼠腹腔冲洗液抗角蛋白IgM、抗金黄色葡萄球菌IgM水平高于阴性对照小鼠.差异有统计学意义(P<0.01);菌落形成实验显示,转基因小鼠腹腔及肾脏菌负荷低于阴性对照(P<0.01):流式细胞仪分析发现.转基因小鼠腹腔中性粒细胞比率、炎症因子浓度低于阴性对照(P<0.01)。结论AK auto Ab在小鼠体内对金黄色葡萄球菌感染具有良好的保护作用。
目的:探讨高滴度天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)对小鼠多器官系统的影响.方法:AK auto Ab转基因小鼠及同窝对照小鼠于常规条件下饲养,观察小鼠体质量、生存时间等一般情况,Kaplan-Meier法绘制生存曲线.取20周龄以上小鼠检测血常规和血生化值.结果:与同窝对照小鼠相比,转基因小鼠体质量减轻(P<0.001),生存时间缩短(P<0.05),脾肿大,肝脏、脾脏、肾脏与体质量的比值增大(P<0.05);血常规显示白细胞数降低,淋巴细胞数下降(P<0.001);血小板升高,血清总蛋白升高,尿素氮升高(P<0.05).结论:AKautoAb的过度表达可能对小鼠的机体造成一定的损害,对多器官系统也产生重要的影响.本研究对于全面分析天然自身抗体的功能具有重要的意义.
目的明确产生天然抗角蛋白自身抗体(anti-keratin autoantibody,AK auto Ab)的B细胞的类群和定位。方法取SPF级C57BL/6小鼠的腹腔细胞及脾细胞,进行体外培养,采用ELISA方法分析培养细胞分泌AK auto Ab的水平,ELISPOT方法分析分泌AK auto Ab的细胞数。结果腹腔细胞中分泌AK auto Ab的细胞数远多于脾细胞,其分泌的抗体滴度也显著高于脾细胞。结论AK auto Ab主要来源于腹腔B细胞,B1细胞可能是产生AK auto Ab的主要细胞。
目的探讨抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)对角质形成细胞凋亡的影响。方法以不同浓度AK auto Ab作用体外培养人角质形成细胞后,用光镜及透射电镜观察细胞形态变化、用流式细胞仪分析细胞周期变化以及提取角质形成细胞DNA作电泳特征分析。结果 AK auto Ab作用后培养的角质形成细胞光镜、电镜下形态发生凋亡特有的改变,出现核固缩、染色质凝聚,并形成凋亡小体；细胞周期分析图中出现凋亡峰；DNA电泳呈有一定间隔的梯状条带。结论 AK auto Ab对角质形成细胞的凋亡具有诱导作用。
目的建立天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)的转基因小鼠模型。方法将转基因表达质粒显微注射法转入CBA×C57BL/6小鼠受精卵,导入假孕雌鼠输卵管后培育子代小鼠;PCR鉴定子代小鼠基因型;ELISA法分析转基因小鼠体内AK auto Ab水平的变化。结果共获得12系转基因阳性的 Founder小鼠,其中9系传至第3代;3系转基因小鼠体内的AK auto Ab水平显著增高。结论成功建立 AK auto Ab的转基因小鼠,获得了血清AK auto Ab水平增高的动物模型。
