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犬新孢子虫miRNAs的鉴定与分析被引量：1: 2024年; 为鉴定犬新孢子虫(Neospora caninum)特异表达的miRNAs,并研究其在宿主细胞中的表达情况,本研究收集N.caninum速殖子感染的山羊子宫内膜上皮细胞(caprine endometrial epithelial cells,EECs)24和48 h的样本,用Illumina高通量测序平台和生物信息学分析犬新孢子虫特异表达的miRNAs及其体外表达情况,并研究了一个上调的miRNA novel3_mature对犬新孢子虫在山羊EECs增殖的影响。结果发现,共鉴定出3404个犬新孢子虫特异表达的miRNAs(155个新预测miRNAs),其中77个(47个上调和30个下调)miRNAs显著差异表达;随机选取7个显著差异表达的miRNAs进行实时荧光定量PCR分析,结果与高通量测序结果一致;预测分析发现61个miRNAs的3978个靶基因,功能富集分析发现这些靶基因可能主要参与MAPK信号通路、突触导向、黏着斑、cMAP信号通路、钙信号通路等;转染novel3_mature的模拟物显著促进犬新孢子虫在山羊EECs中的增殖。犬新孢子虫存在多个特异表达的miRNAs,其在虫体增殖中发挥重要作用,研究成果为深入理解犬新孢子虫胞内生存提供了新的思路。; 李京宇陈金铭张明一赵姗姗陶德良宋军科杨新樊莹莹赵光辉; 关键词：犬新孢子虫 MIRNAS 增殖

一种用于检测犬新孢子虫的探针、试剂盒及方法: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于检测犬新孢子虫的探针、试剂盒及方法。该探针包括上游扩增内引物、下游扩增内引物、上游扩增外引物和下游扩增引物，上游扩增内引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的方法具有...; 魏正凯刘婷婷张德志余新刚李前勇杨正涛刘全

新孢子虫入侵对宿主细胞炎症反应与应答的调节: 2024年; 犬新孢子虫是一种寄生在动物细胞内的原虫,可引起新孢子虫病。该病临床表现为母牛的繁殖障碍,导致其流产或死胎,严重影响养殖业的正常发展。新孢子虫病广泛分布世界各地,但由于新孢子虫感染与宿主之间相互作用的机制尚未阐明,尚未研制出特效的药物与商品化疫苗。有研究表明,在虫体入侵宿主的过程中,宿主的天然免疫在抵抗新孢子虫感染中的作用不可忽视。论文主要阐述了犬新孢子虫入侵对宿主细胞免疫调节的影响以及虫体分泌的外泌体在新孢子虫入侵过程中的作用,为深入了解犬新孢子虫的致病机制以及新孢子虫病防治提供新的思路。; 刘禹馨贾芮于龙政; 关键词：犬新孢子虫宿主细胞免疫调控

新孢子虫融合蛋白作为新孢子虫检测抗原中的应用: 本发明公开了新孢子虫融合蛋白作为新孢子虫检测抗原中的应用，本发明利用新孢子虫融合蛋白作为诊断靶标，将新孢子虫融合蛋白作为新孢虫抗体的抗原，制备成双抗原夹心金标法检测试纸卡，制得的检测试纸卡具有灵敏度更高，特异性更强优点，...; 马湘琳王永红武煊胡宇莉李小桥邹锐孙航王程玉

患肿瘤病犬与非患瘤犬新孢子虫感染情况的比较分析: 2024年; 犬是新孢子虫的终末宿主,有报道显示新孢子虫具有抗肿瘤的作用,而犬感染新孢子虫与患肿瘤病之间的关系尚不清楚。本研究的目的是比较分析患肿瘤病犬和非患瘤犬新孢子虫感染率的差异。在洛阳地区3家宠物医院对126只犬进行采样检测,共采集犬抗凝血液样品126份,其中患瘤犬79份,非患瘤犬47份;粪便样品58份,其中患瘤犬33份,非患瘤犬25份。采用饱和盐水漂浮法检测粪便中新孢子虫的卵囊,PCR方法检测粪便和血液中新孢子虫的DNA。结果显示,犬新孢子虫总感染率为10.3%(13/126),其中非患瘤犬的感染率(19.1%,9/47)在统计学上显著高于患瘤犬(5.1%,4/79)(P<0.05)。58份犬粪便样品中,1份检出新孢子虫卵囊,7份检出新孢子虫DNA(12.1%);126份血液样品中,7份检出新孢子虫DNA(5.6%)。结果表明,犬感染新孢子虫与患肿瘤病之间呈负相关,该研究为进一步探索新孢子虫抗肿瘤的机制提供参考,为犬肿瘤病的研究提供新的思路。; 李晨陈亚奇王天奇钱伟锋; 关键词：肿瘤新孢子虫感染率

新孢子虫、微小隐孢子虫RPA-CRISPR/Cas12a可视化检测方法的建立与初步应用: 新孢子虫(Neospora caninum,N.caninum)是一种专性细胞内寄生的顶复门原虫,牛、羊等动物为中间宿主,犬科动物为终末宿主。新孢子虫病主要引起妊娠母畜流产、死胎、新生犊牛的神经系统疾病,是导致牛繁殖失败...; 王丽; 关键词：RPA 新孢子虫微小隐孢子虫

构建新孢子虫弱毒虫株的方法以及该弱毒虫株在免疫保护方面的应用: 本发明公开了构建新孢子虫弱毒虫株的方法以及该弱毒虫株在免疫保护方面的应用，属于基因工程技术领域。本发明要解决的技术问题是：如何预防或/和治疗新孢子虫病。为解决该技术问题，本发明提供一种构建cacna1和cacna2双基因...; 刘晶王先梅刘群祝子伏王丽芳

新孢子虫硫氧还蛋白的生物信息学分析及其原核表达的鉴定: 2024年; 为研究新孢子虫硫氧还蛋白(Trx)的生物学特性,本研究利用PCR扩增犬新孢子虫Trx(NcTrx)基因的编码区序列,构建pET-32a(+)-NcTrx原核表达载体,经双酶切与测序鉴定正确后,利用系列生物信息学软件分析NcTrx基因及其编码氨基酸序列的生物信息学特征,并对其蛋白互作网络中排名前100的蛋白进行GO功能和KEGG信号通路的富集分析。重组质粒中NcTrx基因的测序结果显示,NcTrx基因片段为1 287 bp,编码428个氨基酸;该蛋白含1个信号肽,1个跨膜区,主要位于内质网上;NcTrx蛋白的二、三级结构主要由α-螺旋、无规则卷曲组成,有12个B细胞抗原表位;该蛋白属于硫氧还蛋白家族,存在典型的氧化还原基序“-CXXC-”,有38个磷酸化位点、10个O-糖基化位点;与NcTrx蛋白互作最强的为酪氨酸激酶样蛋白,二者通过氢键和静电作用实现相互对接;GO功能及KEGG信号通路的显著性富集分析结果显示,NcTrx与其互作的蛋白主要参与蛋白质转运、蛋白质二硫键异构酶活性等生物学过程,与内质网蛋白质加工、硫代谢等信号通路密切相关。将pET-32a(+)-NcTrx转化BL21(DE3)感受态细胞,并经IPTG诱导表达后采用镍亲和层析法纯化重组NcTrx蛋白(rNcTrx),经SDS-PAGE检测该蛋白的表达及纯化效果,采用Bradford法测定纯化蛋白的浓度。采用western blot鉴定rNcTrx的反应原性。SDS-PAGE结果显示,rNcTrx分子量约66 ku,主要以包涵体的形式表达,且纯化效果较好,浓度为0.8 mg/mL。Western blot检测结果显示,纯化的rNcTrx能够与鼠His MAb、新孢子虫感染的小鼠血清发生特异性反应,在66 ku处出现特异性条带。本研究首次经PCR扩增NcTrx基因,对NcTrx基因及其蛋白进行了生物信息学分析,并经原核系统表达及鉴定了NcTrx蛋白,为后续深入探究该蛋白的生物学功能提供参考依据。; 齐闻新张旻李晨周思含徐啊慧钱伟锋胡苏辉王天奇位治国洪炀闫文朝; 关键词：新孢子虫硫氧还蛋白生物信息学原核表达

7种中药提取物体外抗新孢子虫效果的检测: 2024年; 为了检测7种中药提取物(鸦胆子苦素D、川楝素、槟榔碱、青蒿琥酯、棕矢车菊素、异泽兰黄素和槲皮素)的体外抗新孢子虫效果,本试验利用Vero细胞和表达绿色荧光蛋白的新孢子虫虫株作为药物体外筛选系统,以青蒿素为对照药物,借助荧光显微镜计数法统计不同药物对新孢子虫入侵和增殖的影响,并检测了对新孢子虫入侵和增殖均有效的药物对新孢子虫的半数抑制浓度(IC50)。结果显示,青蒿琥酯、槟榔碱、槲皮素、异泽兰黄素和鸦胆子苦素D浓度分别为30.00、20.0、7.500、4.0和1.0μg/mL时,对新孢子虫入侵细胞具有显著抑制作用(P<0.05或P<0.01);青蒿琥酯和青蒿素浓度分别为30和60μg/mL时,可极显著抑制新孢子虫的增殖(P<0.01);青蒿素和青蒿琥酯对新孢子虫的IC50分别为(7.12±1.71)和(2.50±0.71)μg/mL。综上,7种中药提取物中仅青蒿琥酯在体外对新孢子虫的入侵和增殖均有显著抑制作用,该结果为进一步研究有效的抗新孢子虫病药物提供参考。; 刘海燕钱伟锋李小瑾严文岚李晨王天奇; 关键词：新孢子虫 VERO细胞中药提取物青蒿琥酯

XR001919077.1调控宿主细胞线粒体功能和自噬影响犬新孢子虫在山羊EECs增殖的机制: 赵姗姗

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