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清毒栓提取物对人子宫颈鳞癌细胞免疫逃逸的影响: 2024年; 目的研究清毒栓提取物对人子宫颈鳞癌细胞(SiHa细胞)免疫逃逸的影响,探讨清毒栓提取物治疗宫颈人乳头瘤病毒感染的免疫机制。方法选择均匀成团生长的jurkat细胞,使用SiHa上清液培养jurkat细胞48小时,采用染色质免疫沉淀技术检测SiHa细胞上清液处理后jurkat细胞中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Forkhead boxP3,Foxp3)含量。取Foxp3高表达的T细胞模型,用血清药理学方法制备的清毒栓含药血清和对照血清进行干预,采用染色质免疫沉淀技术、实时荧光定量PCR法、流式细胞术分别检测jurkat细胞中Foxp3蛋白表达水平、Foxp3转录水平,以及Foxp3阳性细胞比例。结果 SiHa上清液可以显著增加jurkat细胞中Foxp3含量(P<0.05),且处理48小时效果最为显著;jurkat细胞经清毒栓含药血清处理后,细胞中的Foxp3蛋白表达显著下调(P<0.05);在含药血清浓度为15%和20%时,Foxp3的蛋白表达量最低,但两者无明显差别(P>0.05);清毒栓含药血清可以显著降低jurkat细胞模型中Foxp3转录和蛋白水平以及Foxp3阳性细胞数(P<0.05)。结论清毒栓含药血清通过抑制jurkat T细胞中的Foxp3转录和蛋白表达,降低Foxp3阳性细胞数及Treg细胞比例,从而抑制宫颈SiHa细胞的免疫逃逸,增加机体对宫颈SiHa细胞的免疫反应性。; 李美楼姣英; 关键词：宫颈人乳头瘤病毒感染 JURKAT细胞

清毒栓对宫颈癌细胞凋亡及Th1/Th2、Th17/Treg平衡调控的影响被引量：1: 2023年; 目的基于细胞凋亡及免疫调控探讨清毒栓体内外抗宫颈癌的作用及机制。方法(1)细胞实验:将宫颈癌SiHa细胞分为5%、10%、15%、20%空白血清组;5%、10%、15%、20%含药血清组,CCK8法测定不同浓度血清对SiHa细胞活性的影响。流式细胞技术检测15%含药血清处理SiHa细胞72 h后,细胞凋亡及周期分布情况。(2)动物实验:构建宫颈癌荷瘤小鼠模型,随机数字表法将小鼠分为宫颈癌对照组(磷酸盐缓冲液灌胃)、清毒栓低剂量组(14.4 g/kg中药灌胃)、清毒栓高剂量组(28.8 g/kg中药灌胃),每组6只,连续给药28 d,记录并计算瘤体积和体质量。分别用Ki67法和Tunel法检测3组小鼠癌组织增殖、凋亡,并用流式检测3组小鼠外周血单个核细胞中T细胞亚型表达。结果细胞实验表明含药血清可以抑制SiHa细胞活性,其中15%和20%含药血清处理72 h时,抑制作用最强烈,且差异无统计学意义。与15%空白血清组相比,15%含药血清组凋亡细胞增多;15%含药血清增加G0/G1期细胞,减少S期和G2/M期细胞,差异均具有统计学意义(P<0.01)。动物实验表明相较于宫颈癌对照组,清毒栓组癌组织中Ki67阳性细胞比例降低、Tunel阳性细胞比例增加,且高剂量组降低或增加更明显,差异均有统计学意义(P<0.01)。相较于宫颈癌对照组,清毒栓高剂量组小鼠外周血中Th1、Th17细胞比例增加,Th2、Treg细胞比例降低,Th1/Th2、Th17/Treg比例增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论清毒栓抑制SiHa细胞活性的最佳剂量是15%的含药血清,作用72 h。清毒栓可能是通过促进癌细胞凋亡,或通过免疫微环境,调控Th2向Th1漂移,抑制Treg细胞,解除免疫抑制,从而实现抑制宫颈癌。; 耿韦华楼姣英王莹余碧波; 关键词：清毒栓宫颈癌凋亡 TH1/TH2 TH17/TREG

清毒栓提取物通过调节Zeste基因增强子同源物2抑制SiHa细胞活性的研究被引量：3: 2021年; 目的研究清毒栓提取物对人子宫颈鳞癌(SiHa)细胞活性的影响,并基于Zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)探讨其可能的作用机制。方法取稳定并进入对数生长期的SiHa细胞,采用血清药理学方法制备的清毒栓含药血清和EZH2抑制剂GSK126进行干预,使用八肽胆囊收缩素、实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法、染色质免疫沉淀技术等技术,研究清毒栓含药血清对SiHa细胞活性、增殖与凋亡、叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Forkhead box P3,Foxp3)表达与其组蛋白甲基化水平、β-连环蛋白通路、EZH2表达影响。结果清毒栓含药血清促进Foxp3启动子区组蛋白甲基化水平,并可增加EZH2含量;而Foxp3过表达质粒和EZH2抑制剂GSK126可以逆转清毒栓含药血清诱导的Foxp3表达下调,增殖凋亡相关蛋白表达改变以及SiHa细胞活性下调。结论清毒栓对SiHa细胞的抑制作用是通过增加EZH2含量促进Foxp3启动子组蛋白甲基化来改变Foxp3表达,从而抑制SiHa细胞中β-连环蛋白通路实现的。; 李美楼姣英耿韦华乔晓叶

清毒栓提取物通过调节Foxp3影响β-catenin通路从而抑制SiHa细胞活性的研究被引量：1: 2020年; [目的]考察清毒栓提取物对宫颈癌SiHa细胞活性的影响,并基于叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)探讨其可能的作用机制。[方法]利用脂质体介导转染方法,建立Foxp3过表达人乳头瘤病毒(HPV)感染阳性SiHa细胞株,同时利用pcDNA3.1空载体转染SiHa细胞株作为阴性对照。用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测经空白血清和15%含药血清分别处理的Foxp3过表达质粒组及空白质粒组SiHa细胞中Foxp3蛋白及其下游信号分子水平,并用CCK8法检测4组SiHa细胞活性。[结果]Foxp3过表达载体转染处理可以显著增加SiHa细胞中Foxp3蛋白、Foxp3下游信号分子β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的蛋白含量并增加SiHa细胞活性(P<0.01),而抑制凋亡基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)剪切(P<0.05);清毒栓含药血清可以显著抑制SiHa细胞中Foxp3及其下游信号分子蛋白水平(P<0.05)并抑制SiHa细胞活性(P<0.01),促进Caspase-3剪切(P<0.01)。Foxp3过表达质粒可以抑制含药血清诱导的SiHa细胞中Foxp3下调和活性下降,抑制含药血清诱导的β-catenin、c-Myc、cyclinD1含量下调以及Caspase-3剪切增加。[结论]Foxp3可通过激活β-catenin通路来增加SiHa细胞活性,在SiHa细胞中扮演着原癌基因角色,而清毒栓含药血清通过调节Foxp3影响β-catenin通路从而抑制SiHa细胞活性。; 耿韦华楼姣英张静王莹李美; 关键词：清毒栓宫颈癌 SIHA细胞

清毒栓对宫颈癌小鼠抑瘤作用的研究及HR-HPV感染的中药用药规律探讨: 目的1.通过建立宫颈癌荷瘤小鼠模型,观察中药清毒栓的抑瘤效果;2.探讨中药清毒栓对宫颈癌荷瘤小鼠外周血清INF-γ、TGF-β1及IL-10水平的影响,分析清毒栓的抑瘤机制;3.通过运用中医传承辅助平台,深入挖掘中药治疗...; 王莹; 关键词：宫颈癌清毒栓人乳头瘤病毒细胞因子; 文献传递

中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞产生免疫相关细胞因子的影响被引量：4: 2017年; 目的探讨中药清毒栓含药血清对宫颈癌SiHa细胞产生免疫相关细胞因子的影响。方法选取SPF级SD大鼠雌性30只[体重(220±10)g],分成两组,分别用纯净水和中药灌胃处理后抽血提取含药血清,设立空白对照组(0%含药大鼠血清)、清毒栓低、中、高剂量组(浓度分别为1%、4%、8%含药大鼠血清),采用q-PCR法检测细胞IL-2、IL-8、TNF-α、IFN-γ的基因表达情况,采用Western Blot法检测SiHa细胞内IL-8、TNF-α的蛋白表达情况。结果不同剂量的清毒栓含药血清在12 h、24 h、48 h对宫颈癌SiHa细胞免疫相关细胞因子的基因表达均有一定促进表达作用,其中以IL-8、TNF-α在8%浓度含药血清给药后12~24 h内呈现显著上升的趋势(P<0.05);细胞内IL-8、TNF-α蛋白表达量在高剂量组给药后48 h呈现显著上升的趋势。结论高剂量清毒栓含药血清可显著诱导免疫相关细胞因子IL-8、TNF-α基因的表达,并能够使细胞内IL-8、TNF-α蛋白的表达量增加,其作用机制可能是通过促进相关基因的表达量来增加相应细胞因子蛋白的表达。; 楼姣英金哲李洋; 关键词：SIHA细胞含药血清

中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响: 2016年; 目的:探讨中药清毒栓对宫颈癌Si Ha细胞增殖的影响及其诱导凋亡作用的可能机制。方法:设立空白对照组,清毒栓高、中、低剂量组(0.16、0.04、0.01 g/ml)及保妇康栓组(0.017 5 g/ml),分别以不同药液作用于宫颈癌Si Ha细胞24 h、48 h、72 h,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测细胞增殖情况,采用线粒体膜电位法检测细胞凋亡情况。结果:不同剂量的清毒栓作用24 h、48 h、72 h时对宫颈癌Si Ha细胞的增殖均具有一定的抑制作用,其中以清毒栓高剂量组在48 h时作用最为明显。不同剂量的清毒栓均可引起宫颈癌Si Ha细胞线粒体膜电位的改变,进而引起不同程度的细胞凋亡;经统计学分析显示,清毒栓各剂量组、保妇康栓组的凋亡率与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),清毒栓低、中剂量组与清毒栓高剂量组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论:高剂量的中药清毒栓在48 h时对宫颈癌Si Ha细胞增殖的抑制作用最为明显,其作用机制可能是通过使线粒体膜电位降低来促进肿瘤细胞的凋亡。; 王艳萍王惠张丽钰金哲; 关键词：清毒栓宫颈癌 SI 体外实验

中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞抑制作用的影响被引量：3: 2016年; 目的研究中药清毒栓对体外培养的宫颈癌Si Ha细胞增殖及凋亡是否具有抑制和诱导的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色实验及吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法检测Si Ha细胞增殖及凋亡的变化及细胞迁移实验法检测Si Ha细胞迁移数量。结果不同剂量清毒栓及保妇康栓药物作用后各组Si Ha细胞增殖数量明显减少、凋亡率明显增加及迁移数量明显减少。中药清毒栓作用于Si Ha细胞48 h其抑制作用最明显。清毒栓高剂量组分别与清毒栓中、低剂量组及正常对照组差异显著(P<0.05);中药清毒栓作用Si Ha细胞在24、72 h时各组差异均不明显(P>0.05)。结论清毒栓的作用可能是通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡导致肿瘤细胞减少对宫颈癌Si Ha细胞产生影响。; 王艳萍徐静张丽钰金哲; 关键词：清毒栓宫颈癌 SIHA细胞细胞凋亡

中药清毒栓对人宫颈癌SiHa细胞抑制作用的实验研究: 目的：从细胞水平研究中药清毒栓对人宫颈癌SiHa细胞的体外增殖、细胞凋亡的影响，探讨清毒栓对体外培养人宫颈癌SiHa细胞的抑制作用。通过本实验从细胞水平研究中药清毒栓对体外培养的宫颈癌SiHa细胞的增殖及凋亡是否具有抑制...; 徐静; 关键词：SIHA细胞细胞凋亡宫颈癌

中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞凋亡的影响及其相关实验研究: 目的：通过对中药清毒栓体外作用于人宫颈癌SiHa细胞对其凋亡的影响的实验研究，探讨中药清毒栓防治宫颈癌的作用机制，进一步完善中药清毒栓临床运用的理论依据。　　方法：　　1.利用氯仿(三氯甲烷)提取法提取中药清毒栓中的有效...; 王惠; 关键词：宫颈癌细胞凋亡 SIHA细胞临床疗效; 文献传递

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