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一种优化的眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂基因OH-TCI及其表达方法和应用
本发明提供了一种优化的眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂基因OH-TCI及其表达载体和应用,合成优化的眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂基因OH-TCI,构建重组质粒pUC18-T-OH-TCI和pET43.1-OH-TCI,并转到大肠杆菌中,...
孙同毅
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眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂及其衍生物的应用
本发明涉及眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂及其衍生物,与其它天然来源小分子量蛋白酶抑制剂相比,具有结构简单、基因表达产量高、活性特殊的有益特点。本发明眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂的制备方法可以是从蛇毒粗毒进行分离纯化获得,也可以通过基因...
李文辉张云何英英刘树柏
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眼镜蛇毒单克隆抗体的制备
2009年
目的:应用眼镜蛇毒基因疫苗,免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体(mAb)。方法:应用眼镜蛇Oh-3基因真核表达质粒pIRES-Oh3,佐以脂质体制成基因疫苗,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与同源Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA筛选,有限稀释法克隆,制备mAb。结果:获得了2株分泌抗眼镜蛇毒mAb的杂交瘤细胞株(F5、F11),细胞培养上清液的抗体效价分别为3.2×10-1、6.4×10-1,腹水抗体效价分别为1.28×10-4、2.56×10-4。结论:成功地制备了2株眼镜蛇毒mAb。
李丽红严晔李作生邱薇范泉水
关键词:眼镜王蛇毒单克隆抗体
广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶体外抗NACC细胞活性研究被引量:1
2009年
目的:利用抑制肿瘤细胞增殖作用的体外实验方法,探讨广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(LAAO)对培养人类腭部小涎腺样囊性癌细胞系(NACC)增殖的抑制作用。方法:采用MTT法、台盼蓝拒染法和集落形成法,以0.02M pH7.4 Tris-HCl为阴性对照,丝裂霉素C(MMC)为阳性对照,人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为正常细胞对照,观察LAAO不同浓度不同作用时间对NACC细胞系体外增殖的抑制作用。结果:NACC细胞经LAAO处理24h、48h及96h后,生长明显受抑制,浓度、时间效应关系明显(P<0.05)。结论:眼镜蛇毒LAAO对NACC肿瘤细胞具有细胞毒性和生长抑制作用,对HUVEC细胞毒性作用的LAAO浓度为对NACC细胞的10.35倍。
黄红坤黎渊弘李佳荃黎肇炎
关键词:蛇毒L-氨基酸氧化酶
眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂及其衍生物的应用
本发明涉及眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂及其衍生物,与其它天然来源小分子量蛋白酶抑制剂相比,具有结构简单、基因表达产量高、活性特殊的有益特点。本发明眼镜蛇毒蛋白酶抑制剂的制备方法可以是从蛇毒粗毒进行分离纯化获得,也可以通过基因...
李文辉张云何英英刘树柏
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精制抗眼镜蛇毒血清的制备被引量:9
2008年
目的研制抗眼镜蛇毒血清,以解决被眼镜蛇咬伤后的救治问题。方法以眼镜蛇毒为免疫原免疫马获得免疫血浆,经盐析制备IgG,IgG再经酶解、疏水柱纯化后得到F(ab′)_2活性片段,并以免疫扩散、ELISA测定其抗体特异性,以小鼠实验法测定其中和眼镜蛇毒能力。结果得到的抗血清F(ab′)_2冻干品纯度达90%以上。结论研制出了特异性强、效价高的抗眼镜蛇毒血清。
张连江郑颖范泉水邱薇李江冯子良
眼镜蛇毒卵黄抗体及其制备方法和用途
眼镜蛇毒卵黄抗体及其制备方法和用途,本发明通过对眼镜蛇毒抗原的广泛的研究,利用眼镜蛇毒抗原免疫母鸡,使之在卵黄中产生大量特异性的免疫球蛋白,结果制得了可应用于眼镜蛇伤的治疗及眼镜蛇科属蛇伤的治疗的抗眼镜蛇毒卵...
余清声王桂平朱柳刘新艳戴丽军袁牧
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眼镜蛇毒卵黄抗体的免疫活性及其对眼镜蛇毒的中和作用被引量:4
2007年
目的:探讨抗眼镜蛇毒卵黄抗体的免疫活性及其在体内外对眼镜蛇毒的中和作用。方法:采用嗜硫色谱法一步分离纯化抗眼镜蛇毒卵黄抗体,通过间接ELISA法对制备的抗眼镜蛇毒卵黄抗体进行免疫活性检测,采用小鼠体内外保护实验评估抗眼镜蛇毒卵黄抗体对眼镜蛇毒的中和作用。结果:嗜硫色谱法制备的卵黄抗体具有良好的免疫活性,并且对眼镜蛇毒素显示较好的中和效应,在体外6mg/kg抗眼镜蛇毒卵黄抗体可有效地中和约4LD50(约1.6mg/kg)的眼镜蛇毒素,而在体内可有效地中和约3LD50(约1.2mg/kg)的眼镜蛇毒素。结论:抗眼镜蛇毒卵黄抗体对眼镜蛇毒具有良好的中和作用,本项目为抗眼镜蛇毒卵黄抗体的进一步研究开发提供实验依据。
王桂平刘新艳朱柳余清声
关键词:眼镜王蛇毒卵黄抗体免疫活性
广西眼镜蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化及性质研究被引量:2
2007年
目的:广西眼镜蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化和性质研究。方法:分离纯化采用DEAE-Sepharose CL-6B离子交换柱层析,Sephadex G-75凝胶过滤和CM-Sepharose CL-6B离子交换柱层析;通过电泳,磷脂酶A2(PLA2)酶活力测定,氨基酸组成分析,N端序列测定及药理实验进行性质研究。结果:从广西眼镜蛇毒中分离到一种电泳纯的碱性蛋白(命名为CM-IV),相对分子质量约为14000,等电点约为8.65;PLA2的比活力为23μmol·mg-1/min。氨基酸组成分析表明,其分子中Cys的含量占6.85%;利用蛋白质直接测序N端序列为TKCYVTPDVK。药理实验表明它对实验用小白鼠有致死性(LD50约为0.2mg/kg),并具有心脏毒性,但无血小板抑制活性。根据Genebank Blast分析软件,它的N端序列与神经毒素具有高度的同源性。结论:这种碱性蛋白可能为神经毒素,但却拥有PLA2的活力。
林文珍庄茂辛舒雨雁林政炯周元聪
关键词:眼镜王蛇纯化碱性蛋白
眼镜蛇毒鸡卵黄抗体的保护试验被引量:1
2007年
目的:制备特异性高的鸡眼镜蛇毒卵黄抗体,并对其进行体外和体内保护试验。方法:用眼镜蛇毒免疫母鸡,在卵黄中产生抗眼镜蛇毒抗体IgY,用水溶解法提取IgY,进行小鼠体外中和试验和体内保护试验。结果:体外、体内保护试验显示,6mg/kg的IgY可有效中和小鼠体内低剂量(≤3LD50)的蛇毒,对致死剂量蛇毒有很好的保护效应。结论:从卵黄中制备的抗眼镜蛇毒IgY可有效地中和眼镜蛇毒
黄月玲丘剑峰刘寒英余清声王桂平

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王桂平
作品数:50被引量:159H指数:6
供职机构:广州医科大学卫生职业技术学院
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余清声
作品数:77被引量:254H指数:9
供职机构:广州医学院药物研究中心
研究主题:眼镜蛇毒 中华眼镜蛇毒 蛇毒 血管生成 血小板聚集
李其斌
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供职机构:广西医科大学第一附属医院
研究主题:蛇伤 蛇咬伤 毒蛇咬伤 抗蛇毒血清 中毒
黄劭
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研究主题:蛇毒 眼镜王蛇毒 红色荧光蛋白 启动子 卵黄抗体
覃媛
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研究主题:眼镜王蛇毒 卵黄抗体 毒素 东亚钳蝎 鸡卵黄抗体