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一种蛇毒类凝血酶纯化新方法: 2024年; 目的提供一种蛇毒类凝血酶的新纯化方法。方法蛇毒经预处理后,依次经过苯甲脒琼脂糖凝胶亲和色谱、阳离子交换色谱和疏水色谱后获得蛇毒类凝血酶,分别对活性、分子量及纯度进行检测,并与使用现有专利方法制备的蛇毒类凝血酶进行质量比较。结果新方法制备的蛇毒类凝血酶与现有专利方法相比,分子量无明显差异,但新方法的比活力更高,且纯度更高,同时新方法的工艺稳定性更佳。结论新方法与现有专利方法相比,简化了工艺步骤,缩短了纯化周期,减少了过程环境暴露风险,可获得高纯度类凝血酶,工艺稳定性高,产品质量一致性好,利于临床安全用药。; 李秀琳董敬刘阳李爽; 关键词：蛇毒类凝血酶纯化

一种蛇毒类凝血酶蛋白及其制备方法与应用: 本发明公开了一种蛇毒类凝血酶蛋白及其制备方法与应用。属于蛇毒蛋白技术领域。本发明采用SUPERDEX 75INCREASE 10/300GL凝胶层析柱和C18SP‑100‑5‑ODS‑P液相色谱柱从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化...; 彭艳梅蔡媛刘平安陈曹娟冯小龙郭德志谭群英

基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱法检测矛头蝮蛇蛇毒种属来源及类凝血酶含量被引量：7: 2022年; 蛇毒血凝酶类药物是以蝮蛇蛇毒为原料制备的止血药,主要活性成分为蛇毒类凝血酶(svTLEs)。不同蛇种来源的svTLEs结构不同,止血机制不同,药理作用也存在差异,因此准确鉴别蛇毒种属来源和svTLEs含量对于保障该类产品的质量至关重要。研究基于蛋白质组学技术,筛选出了具有种属特异性的矛头蝮蛇svTLE特征肽,并建立了基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)检测矛头蝮蛇蛇毒种属来源及类凝血酶含量的方法。采用胰蛋白酶对纯化的矛头蝮蛇svTLE进行酶解,利用纳升液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(Nano LC-Q-Exactive-MS)和Proteome Discoverer^(2).2软件分别进行多肽的检测和鉴定,通过BLAST搜索与Uniprot数据库对比分析,筛选出具有种属特异性的矛头蝮蛇svTLEs特征肽“EAYNGLPAK”。针对该特征肽对酶解温度、酶解时间和酶用量等样品前处理方法进行了优化,利用超高效液相色谱-串联质谱,以m/z 481.9>315.2和481.9>485.2作为检测离子对,采用ESI+模式进行了多反应监测(MRM)定性定量分析。结果显示,特征肽在2.5~30 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)大于0.9996,多水平加标回收率范围为95.5%~101.9%,各水平平行测定结果的相对标准偏差(RSD)为1.1%~3.2%,完全能够满足实际样品检测需求。方法简便快捷,灵敏度高,专属性强,可用于矛头蝮蛇蛇毒种属鉴别及svTLE含量测定,从源头保证血凝酶类产品的质量,并可为其他蛇毒类产品的质量控制提供参考。; 咸瑞卿咸瑞卿巩丽萍王聪聪张迅杰彭丽石峰; 关键词：超高效液相色谱-串联质谱蛇毒类凝血酶蛇毒

UPLC-MS/MS检测长白山白眉蝮蛇蛇毒中的类凝血酶被引量：1: 2022年; 目的基于具有种属特异性的长白山白眉蝮蛇类凝血酶特征肽,建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)检测蛇毒种属来源及类凝血酶含量的方法。方法样品经还原、烷基化、胰蛋白酶消化后,利用UPLC-MS/MS对类凝血酶特征肽进行检测。色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7µm);流动相:0.1%甲酸溶液-0.1%甲酸乙腈,梯度洗脱;流速:0.2 ml/min;以m/z 877.4(双电荷)→892.4,550.2作为检测离子,采用ESI+模式进行多反应监测(MRM)。结果特征肽在20~400 ng/ml范围内浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.9990),3个水平的加标回收率为91.2%~107.8%,精密度和重复性均良好。结论本方法准确、可靠,可用于长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的定性定量分析,为蛇毒血凝酶类药物的质量控制提供技术支持。; 咸瑞卿咸瑞卿巩丽萍张迅杰彭丽石峰; 关键词：类凝血酶超高效液相色谱-串联质谱

一种蛇毒类凝血酶的定量检测方法: 本发明涉及化学分析定量检测技术领域，特别涉及一种蛇毒类凝血酶的定量检测方法。上述蛇毒类凝血酶的定量检测方法为：取氨基酸序列为LDSPVSNSAHIAPLSLPSSAPSVGSVCR的白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽对照品，制...; 石峰咸瑞卿巩丽萍迟连利张群业杜宏明王聪聪; 文献传递

一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽及其应用: 本发明涉及化学分析检测及应用领域，特别涉及一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽及其应用。一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽，氨基酸序列为TLCAGVMEGGIDTCNR。使用上述特征多肽表征待测样品中蛇毒类凝血酶的种属来源和含...; 咸瑞卿王凤山石峰巩丽萍迟连利杜宏明王玉团; 文献传递

一种矛头蝮蛇类凝血酶特征多肽及其检测蛇毒类凝血酶的种属来源、含量的方法与应用: 本发明涉及蛇毒检测技术领域，具体公开一种矛头蝮蛇类凝血酶特征多肽及其检测蛇毒类凝血酶的种属来源、含量的方法与应用。所述特征多肽的氨基酸序列为EAYNGLPAK，该特征多肽能够用来检测样品中蛇毒类凝血酶的种属来源和含量，检...; 石峰王维剑咸瑞卿杭宝健巩丽萍王聪聪张迅杰战岚李鸿海; 文献传递

一种矛头蝮蛇类凝血酶特征多肽及其检测蛇毒类凝血酶的种属来源、含量的方法与应用: 本发明涉及蛇毒检测技术领域，具体公开一种矛头蝮蛇类凝血酶特征多肽及其检测蛇毒类凝血酶的种属来源、含量的方法与应用。所述特征多肽的氨基酸序列为EAYNGLPAK，该特征多肽能够用来检测样品中蛇毒类凝血酶的种属来源和含量，检...; 石峰王维剑咸瑞卿杭宝健巩丽萍王聪聪张迅杰战岚李鸿海; 文献传递

蛇毒类凝血酶分子结构理化性质对药效及药动力学影响: 2021年; 蛇毒类凝血酶具有卓越的止血功效。已上市的蛇毒类凝血酶作用机制大致相同,但其蛇毒来源不同,虽具有同样作用,但不同产品含有不同的有效组成成分,其结构、理化性质、作用机理等均存在差异,因此他们不是同一种药物。本文综述了我国临床上用于止血的4种蛇毒类凝血酶药物分子结构和理化性质对其药效及药动学特性的影响。; 李雪龙李秀娜李秀琳; 关键词：蛇毒类凝血酶分子结构理化性质药效学药动学

蛇毒类凝血酶制剂与肝毒性药物对血浆纤维蛋白原水平的影响分析被引量：3: 2021年; 目的探讨临床上两种常用蛇毒类凝血酶制剂与两种肝毒性药物在用药前后对纤维蛋白原(FIB)水平的影响。方法选择2018年10月31日至2020年10月31日空军军医大学附属西京医院收治的200例FIB水平降低(<1.5 g/L)的住院患者为研究对象。将使用蛇毒类凝血酶制剂(白眉蛇毒血凝酶、巴曲酶)的70例患者设为有产物组,使用肝毒性药物[丙戊酸(VAP)、培门冬酶(PEG-ASP)]的130例患者设为无产物组。分别于患者使用药物治疗前后检测常规凝血6项指标的水平变化。结果有产物组中的泌尿外科患者其FIB、D二聚体(D-Dimer)、纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物(FDP)水平在未手术未使用白眉蛇毒血凝酶治疗前与手术后、用药治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。耳鼻喉科患者的FIB与FDP水平在使用巴曲酶治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。无产物组中的神经科患者在使用VAP治疗前后的FIB水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);血液科患者在使用PEG-ASP治疗前后的FIB水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FIB水平在使用该4种药物前后的显著差异变化可以为临床提供用药指导参考,避免导致严重低纤维蛋白血症引起的出血风险。; 颜楠刁艳君韩峰刘家云; 关键词：巴曲酶丙戊酸培门冬酶纤维蛋白原

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