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山奈酚对高糖诱导的人肾上皮细胞增殖与凋亡的影响: 2024年; 目的探究山奈酚对高糖诱导人肾上皮细胞(Hkb20)增殖及凋亡的影响。方法分组培养人肾上皮细胞分为正常糖浓度组(对照组)、高糖组、氯沙坦组(阳性对照)和不同浓度山奈酚组(10μmol/L、30μmol/L、50μmol/L山奈酚与高糖共同作用)。采用CCK-8法和AV/PI法应用流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况,qRT-PCR检测TGF-β1和Smad3 mRNA水平的表达,Western blot法检测细胞因子TGF-β1和Smad3蛋白含量。结果高糖能诱导人肾上皮细胞增殖降低,使细胞凋亡率升高,增加TGF-β1和Smad3 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05)。不同浓度山奈酚处理后,山奈酚能显著增强细胞增殖和降低细胞凋亡率。同时TGF-β1和Smad3 mRNA和蛋白的表达水平下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论山奈酚可逆转高糖诱导的人肾上皮细胞增殖降低和凋亡增加。这说明山奈酚可能是通过TGF-β1/Smad3信号通路抑制高糖环境下人肾上皮细胞的增殖降低和凋亡增加,从而最终导致肾脏纤维化。; 喻信林宋莹张宇晴颜伟周黄燕邹学森; 关键词：山奈酚高糖纤维化

石英粉尘致人肾上皮细胞炎性反应研究: 2023年; 从炎性因子水平探讨石英粉尘导致肾脏炎性反应机制。方法本研究通过将石英粉尘悬液与人肾上皮细胞共培养,并用ELISA方法测定细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α的水平,探讨石英粉尘导致人肾上皮细胞炎性反应的时间-效应关系和剂量-效应关系。结果细胞实验表明,石英粉尘作用于人肾上皮细胞可导致细胞上清中IL-1β、IL-6及TNF-α水平升高,表现为随着染尘时间的延长,上述3种细胞因子的水平逐渐升高;同时,随着染尘剂量的增加,上述3种细胞因子的水平逐渐升高。结论石英粉尘可以导致人肾上皮细胞发生炎性反应,有可能是石英粉尘导致工人肾脏损害的机制之一。; 郭嘉丽田淑军; 关键词：石英粉尘肾脏炎性细胞实验

姜黄素通过SIRT1/FOXO1通路缓解玉米赤霉烯酮诱导的猪肾上皮细胞氧化损伤被引量：2: 2023年; 【目的】探究姜黄素(Cur)对玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导猪肾上皮细胞(PK-15)氧化损伤的保护作用,并基于SIRT1/FOXO1信号通路阐明其作用机制,为姜黄素的兽医临床应用提供依据。【方法】试验分为5组:对照组、ZEA组(36.55μg·mL^(-1)ZEA)、Cur 6.25组(36.55μg·mL^(-1)ZEA+6.25μmol·L^(-1)Cur)、Cur 12.5组(36.55μg·mL^(-1)ZEA+12.5μmol·L^(-1)Cur)、Cur 25组(36.55μg·mL^(-1)ZEA+25μmol·L^(-1)Cur);通过MTT法测定ZEA的半数抑制浓度和Cur对PK-15细胞的最大安全浓度;使用倒置显微镜观察PK-15细胞的形态变化;采用试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及丙二醛(MDA)的水平;qRT-PCR检测细胞SIRT1、FOXO1、CAT、Mn-SOD的mRNA水平;Western Blot检测SIRT1、FOXO1和Acetyl-FOXO1蛋白的表达量。【结果】ZEA的IC50为36.55μg·mL^(-1),Cur的最大安全浓度为25μmol·L^(-1);与对照组相比,ZEA极显著降低PK-15细胞活力(P<0.01),极显著提高ROS和MDA水平(P<0.01),极显著降低SOD、CAT活性(P<0.01);与ZEA组对比,不同浓度的Cur(6.25、12.5、25μmol·L^(-1))显著提高PK-15细胞的存活率(P<0.05),改善细胞形态;极显著(P<0.01)降低ZEA诱导的ROS和MDA水平;极显著升高细胞内SOD和CAT活性(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,ZEA降低SIRT1 mRNA表达量,极显著升高FOXO1 mRNA表达量(P<0.01),升高Mn-SOD mRNA表达量,极显著降低CAT mRNA表达量(P<0.01)。与ZEA组对比,各Cur组不同程度的升高SIRT1和CAT的mRNA表达量,极显著的降低FOXO1的mRNA表达量(P<0.01);极显著升高Mn-SOD的mRNA表达量(P<0.01)。Western Blot结果表明,与对照组对比,ZEA显著降低SIRT1蛋白表达(P<0.05),极显著升高Acetyl-FOXO1蛋白表达(P<0.01);与ZEA组对比,各Cur组均极显著升高SIRT1蛋白表达(P<0.01),极显著降低Acetyl-FOXO1蛋白表达(P<0.01)。【结论】Cur可以上调SIRT1的表达,降低FOXO1的乙酰化水平,诱导抗氧化酶Mn-SOD和CAT的表达,从而清除ROS,降低MDA水�; 崔红杰卢春亭潘丽琴胡会钟佩云朱洁莹张凯照黄小红; 关键词：姜黄素玉米赤霉烯酮

健脾益气利水汤通过OCT-MATE转运体缓解顺铂所致小鼠肾上皮细胞毒性作用被引量：2: 2022年; 目的在体外水平探讨健脾益气利水汤对小鼠肾上皮细胞及肿瘤细胞的细胞毒性缓解作用,并从OCT-MATE转运系统探索其调控机制。方法通过MTT法检测不同给药组健脾益气利水汤对顺铂诱导的原代肾上皮细胞和肿瘤细胞的细胞毒性作用的影响,再通过ICP-MS检测不同给药组对顺铂诱导的原代肾上皮细胞和HEK293肾癌细胞内Pt含量的影响,最后通过RT-PCR和Western Blot检测不同浓度健脾益气利水汤对顺铂诱导的原代肾上皮细胞内OCT-1/2、MATE-2基因及蛋白表达变化。结果健脾益气利水汤能有效降低12.9μmol/L顺铂所致对体外小鼠肾上皮细胞的细胞毒性作用,其中预防组和同时组与模型组比较有显著性差异(P<0.05);同时发现健脾益气利水汤24h内对6.25~50μmol/L顺铂诱导的食管癌细胞EC109;大肠癌细胞HP-29;鼻咽癌细胞HK-1;肾癌细胞HEK293;肺癌细胞A549;胃癌细胞MKN-45的细胞毒性作用均无显著性差异(P>0.05)。ICP-MS检测发现,预防给药组和同时给药组能显著降低原代肾上皮细胞内Pt的含量(P<0.05),而在HEK293细胞内,各给药组细胞内Pt含量与模型组之间均无显著差异(P>0.05)。RT-PCR和Western Blot检测均发现,健脾益气利水汤显著降低顺铂诱导的小鼠肾上皮细胞内OCT-2表达水平(P<0.05),而OCT-1和MATE-2无明显差异(P>0.05)。结论健脾益气利水汤通过抑制OCT-2表达从而抑制顺铂进入肾上皮细胞,具有预防降低顺铂肾细胞毒性作用,同时对顺铂进入肿瘤细胞发挥抗肿瘤活性无显著影响。; 周丽翁纯雪邱煌沛高奥林晓辉贺龙刚; 关键词：顺铂肾毒性

人胚肾上皮细胞293T-Clone3单克隆细胞株及其应用: 本发明涉及生物技术领域，具体为一种人胚肾上皮细胞293T‑Clone3单克隆细胞株及其应用。本发明的单克隆细胞株细胞株保藏号为：CCTCC NO：C2019262，具有高的转染效率，转染效率高于商品化的AAV293，转染...; 王志民连雪琪钟晶晶赵晓燕褚涌超卢双双秦斌张成林王尧河; 文献传递

肾上皮细胞损伤与肾结石Randall斑块形成被引量：1: 2022年; 肾结石具有较高的发病率和复发率,是泌尿外科常见的疾病之一。目前Randall斑块学说是一种被普遍接受的肾结石形成机制,Randall斑块相关研究对肾结石的防治有重要意义,肾上皮细胞损伤促进Randall斑块形成。本文从肾上皮细胞成骨样改变、活性氧与氧化应激,巨噬细胞的吞噬,非编码RNA改变的研究进展进行综述。; 杨雄靳潇潇何文强; 关键词：炎性反应

猪肾上皮细胞SLA-1基因的克隆及分子结构特征分析: 2022年; 【目的】利用猪肾上皮细胞15(PK15)建立系统的猪白细胞抗原1(SLA-1)抗原表位筛选系统。【方法】提取PK15细胞总RNA,设计特异性引物,应用RT-PCR方法扩增SLA-1基因(SLA-1*PK15),将该基因克隆到pMD18-T载体上,并进行双酶切及测序鉴定;利用DNAMAN 5.2.2、Mega 5.0、Multalin及同源建模进行系统进化树、二级结构、三级结构分析。【结果】RT-PCR扩增获得约1400 bp条带,质粒提取和酶切鉴定结果表明SLA-1成功插入pMD18-T载体;测序结果证实该基因共1419 bp,其中2-1087 bp为编码区,共编码361个氨基酸,信号肽为21个氨基酸,符合SLA-1基因特征。进化树分析结果显示,SLA-1*PK15与SLA-1*wxd(中国梅山猪)和SLA-1*0401(中国巴马小型猪)进化关系最近,而与SLA-1*lr02(丹麦长白猪)及SLA-1*0509(中国西藏野猪)进化关系较远。胞外区氨基酸比较分析表明,PK15细胞SLA-1基因与其他SLA-1基因胞外区主要变异位点存在于α1区和α2区,α3区的变异位点较少,无特征性氨基酸变异位点。PK15细胞SLA-1蛋白的二级结构主要以α-螺旋和β-折叠为主。同源建模结果显示,SLA-1蛋白具有SLA classⅠ典型的三级结构,α1区和α2区构成抗原多肽结合区。【结论】SLA-1基因稳定存在于PK15细胞,PK15细胞具有作为SLA-1抗原表位筛选系统的潜在应用价值。; 王宝宝金行鲜钰涵冯宏盛高凤山; 关键词：克隆生物信息学分析同源模建

黄芪多糖对脓毒症急性肾损伤大鼠AMPK/SIRT1信号通路介导的肾上皮细胞能量代谢的影响被引量：7: 2021年; 目的:研究黄芪多糖(APS)对脓毒症急性肾损伤(AKI)大鼠肾上皮细胞能量代谢的影响。方法:60只大鼠随机抽取10只设为正常组,其余随机分为AKI组,APS低、高剂量组各10只,地塞米松组11只。建模后6,12,18 h时APS低、高剂量组APS 100,200 mg·kg^(-1)灌胃,地塞米松组地塞米松10 mg·kg^(-1)灌胃,正常组及AKI组等量生理盐水灌胃。建模后24 h测磷法检测肾上皮细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶(Na^(+)-K^(+)-ATP)活性;Western blot法检测肾组织沉默信息调节因子2相关酶类1(SIRT1)。结果:与AKI组比较,APS低、高剂量组,地塞米松组Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性增强(t=3.894,P=0.005;t=6.564,P<0.01;t=6.565,P<0.01);与APS低剂量组比较,APS高剂量组、地塞米松组Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性增强(t=2.544,P=0.034;t=2.635,P=0.030);与AKI组比较,APS低、高剂量组,地塞米松组SIRT1蛋白表达量升高(t=9.923,P<0.01;t=12.042,P<0.01;t=10.960,P<0.01);与APS低剂量组比较,APS高剂量组、地塞米松组SIRT1蛋白表达量升高(t=4.985,P=0.001;t=5.000,P=0.001)。结论:APS可改善脓毒症AKI大鼠肾上皮细胞能量代谢,可能与激活AMPK/SIRT1信号通路有关。; 王旭东赵玉良史为涛赵云刘雅文刘妍王晴李智吴苏明; 关键词：黄芪多糖肾上皮细胞能量代谢

基于piggyBac转座子系统制备稳定表达BE4蛋白的猪肾上皮细胞系的方法: 本发明公开了一种稳定表达BE4蛋白的猪肾上皮细胞系的制备方法，以传代良好的猪肾上皮细胞（PK‑15）为宿主细胞，共转染含BE4融合蛋白序列的piggyBac转座子（PB‑BE4max）载体和转座酶表达载体质粒，经过嘌呤霉...; 赵书红熊友才阮进学韩晓松庄荣志赵广兴李金虎赵长志李长春谢胜松李新云; 文献传递

石英粉尘致人肾上皮细胞上皮-间质转化及纤维化的研究: 2021年; 目的观察石英粉尘致人肾上皮细胞发生上皮-间质转化及纤维化相关指标的mRNA水平。方法选择人胚肾细胞系293T,分别与75、150、300μg/mL 3个浓度的石英粉尘培养24、48、72h后,观察细胞E-cad、α-SMA、ColⅠ、ColⅢ和MMP-9的mRNA水平。结果与150μg/mL浓度相比,300μg/mL的石英粉尘作用于人肾上皮细胞24、48、72h后,均可致细胞E-cad mRNA水平下降及α-SMA mRNA水平上升;各浓度组细胞染毒72h后,ColⅠ、ColⅢ、MMP-9 mRNA水平均上升,同一浓度组随着染毒时间推移,细胞各纤维化指标mRNA水平也均上升。结论通过上皮-间质转化及纤维化相关指标的mRNA水平测定,表明石英粉尘的直接暴露可导致人肾上皮细胞发生上皮-间质转化及纤维化,这可能是石英粉尘导致肾脏病变的主要机制之一。; 郭嘉丽高丽园张皓; 关键词：石英粉尘肾上皮细胞上皮-间质转化纤维化职业病

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