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泰山磐石散对自然 流产 模型 大鼠子宫蜕膜组织中T-bet/GATA-3的影响 被引量：1 2024年 自然 流产 模型 大鼠子宫蜕膜组织中T盒子转录因子(T-bet)/GATA结合蛋白3(GATA-3)表达量的影响。方法 将15只SPF级雌性妊娠SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型 组和治疗组,每组5只。空白组于妊娠的第1~11天灌服生理盐水,第6~8天皮下注射生理盐水;模型 组于妊娠的第1~11天灌服生理盐水,第6~8天皮下注射0.4 mg/(kg·d)溴隐亭溶液;治疗组于妊娠的第1~11天灌服10 g/(kg·d)泰山磐石散药液,第6~8天皮下注射0.4 mg/(kg·d)溴隐亭溶液。实验期间分别记录3组大鼠妊娠第1天和第11天的体质量,计算3组大鼠体质量增长情况。实验结束次日取材,观察并记录胚胎总数和胚胎吸收数,并计算胚胎吸收率。HE染色观察子宫蜕膜组织形态学的改变;免疫组化法检测3组大鼠子宫蜕膜组织中T-bet和GATA-3蛋白表达水平;Western blot检测3组大鼠子宫蜕膜组织中T-bet和GATA-3的蛋白表达量。结果与空白组比较,模型 组大鼠体质量增加缓慢,胚胎吸收率明显升高,子宫蜕膜组织中T-bet的蛋白表达水平明显升高,GATA-3的蛋白表达水平明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型 组比较,治疗组大鼠体质量明显增加,胚胎吸收率明显降低,子宫蜕膜组织中T-bet的蛋白表达水平明显降低,GATA-3的蛋白表达水平明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 泰山磐石散可能是通过下调Th1/Th2特异性转录因子T-bet/GATA-3的表达,从而改善胚胎流产 情况。关键词：自然流产 蜕膜组织 泰山磐石散 T-BET GATA-3 “病-证-治”结合自然 流产 模型 研究进展及在单细胞多模态组学的应用趋势 被引量：2 2023年 自然 流产 发病率逐年递增,其病因繁杂,治疗手段有限,对社会稳定性危害严重。“病-证-治”结合研究模式能显著指导中医安胎临床疗效的提高,但一直缺乏关键且公认的诊治评价标记物,待进一步探索建立科学统一的评价标准体系。拟通过收集现有“病-证-治”结合自然 流产 动物模型 ,移植完善模型 赋值评价指标,评判自然 流产 动物模型 与中、西医临床病证特点的吻合程度,比较不同自然 流产 动物模型 之构建方式、选择对象及评价指标等的优劣;此外,探索中医药实验研究前沿趋势,针对自然 流产 中医动物模型 分子生物学标志物研究现状及相关瓶颈,提出单细胞多模态组学研究思路突破自然 流产 “病-证-治”的相关评价缺陷,从单个细胞水平分析母胎界面组织中各种细胞类型、细胞亚群、时空轨迹及基因表达的差异性等因素。为病-证模型 、藏象生物学、新型靶向药物的深入研究提供精准指导及模型 动物平台支撑,对建立具有稳定性和重复性的病证结合自然 流产 动物模型 与评价指标体系提供依据,有利于中医妇科生殖领域动物模型 研究的长远发展。关键词：自然流产 病证结合 瑞香素对反复自然 流产 模型 小鼠蜕膜组织中SOCS1和SOCS3蛋白表达的影响 2023年 自然 流产 (recurrent spontaneous abortion,RSA)模型 小鼠蜕膜组织中细胞因子信号传导抑制因子(Suppressor of cytokine signaling , SOCS)中SOCS1和SOCS3蛋白表达的影响。实验方法是按照2:1的比例,将雌性 CBA/J分别与雄性 BALB/c及 DBA/2小鼠进行交配,建立一种正常妊娠模型 和典型RSA动物模型 。按照RSA模型 对照组、正常妊娠对照组、E003高剂量治疗组、低剂量组的方式将本次实验分为4组;Western Blot检测上述四组小鼠蜕膜组织中SOCS1和SOCS3蛋白水平。结果E003处理组(高/低剂量组)能够使 RSA蜕膜组织中的SOCS1和SOCS3蛋白水平都得到显著下降,并且与 RSA的动物模型 组进行了比较,其统计差异为(P<0.01),与E003高剂量组与低剂量组进行比较,其统计差异为(P<0.05)。结论 E003可降低RSA模型 小鼠蜕膜中SOCS1和SOCS3蛋白表达,并呈较好的剂量相关性,为临床治疗RSA新思路提供实验依据。关键词：瑞香素 反复自然流产 蜕膜组织 SOCS 清益调免方通过调控细胞因子纠正自然 流产 模型 小鼠母胎界面Th17/Treg失衡 被引量：2 2023年 模型 组(Model group,M)、清益调免方治疗组(QYTMtreated group,Q),每组8只。N组雌鼠和BALB/c雄鼠合笼,M组和Q组雌鼠与DBA/2雄鼠合笼,Q组给予清益调免方溶剂,N组和M组给予等体积的蒸馏水。妊娠第14.5天处死孕鼠取材,计算胚胎丢失率;苏木精-伊红(HE)染色观察蜕膜组织的形态变化;流式细胞术检测孕鼠脾脏中CD4+CD25+Foxp3+(Treg)细胞、CD4+IL-17A+(Th17)细胞占CD4+T细胞的比例;酶联免疫吸附测定胎盘中白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素17A(IL-17A)、白介素6(IL-6)水平变化;实时荧光定量PCR检测胎盘组织中维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA的表达。结果M组的胚胎丢失率显著高于N组(33.67%≌20.84%)(P<0.05),Q组的胚胎丢失率显著低于M组(21.90%≌33.67%)(P<0.01)。HE染色结果显示,清益调免方可以改善血管瘀滞状态,减少组织损伤,从而促进蜕膜正常发育。与M组相比,Q组孕鼠脾脏中Th17/CD4+T细胞比例降低,Treg/CD4+T细胞比例升高;在胎盘中Foxp3、IL-10、TGF-β1表达增高,RORγt、IL-6、IL-17A表达减少。结论清益调免方能通过调控流产 模型 小鼠母胎免疫界面的关键细胞因子IL-6和TGF-β1的表达,直接和间接地作用于Treg细胞和Th17细胞的分化和功能,纠正Treg/Th17细胞平衡失调,从而促进妊娠的正常进行。关键词：自然流产 辅助性T细胞17 调节性T细胞 减味寿胎丸对自然 流产 模型 小鼠子宫蜕膜组织中FOXO3及PR蛋白表达的影响 被引量：21 2021年 自然 流产 的可能作用机制。方法实验分为正常妊娠组、流产 模型 组、地屈孕酮组、减味寿胎丸组,每组6只雌鼠。正常妊娠组交配小鼠品种为CBA/J雌性×BALB/C雄性,其余各组交配小鼠品种为CBA/J雌性×DBA/2雄性构建的小鼠自然 流产 模型 。将小鼠雌、雄按1∶1比例进行配种,次日早上查看雌鼠阴栓,看到阴栓或涂片见精子的雌鼠定为妊娠0天。妊娠0~9天,正常妊娠组和流产 模型 组小鼠予纯水0.01ml/g灌胃,减味寿胎丸组小鼠予减味寿胎丸2.72g/(kg·d)灌胃,地屈孕酮组小鼠给予地屈孕酮片12.3mg/(kg·d)灌胃。9天后取材,观察小鼠的体质量变化、胚胎淤血及吸收胎个数,测量胚胎直径;HE染色观察子宫蜕膜的形态变化;免疫组化染色法观察蜕膜组织叉头框转录因子3(FOXO3)阳性表达情况;Western blot法检测子宫蜕膜组织FOXO3、孕激素受体(PR)蛋白表达。结果各组小鼠体重及胚胎直径比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。流产 模型 组流产 率(60.98%)明显高于正常妊娠组(8.89%,P<0.017),减味寿胎丸组、地屈孕酮组流产 率分别为23.40%、22.92%,均明显低于流产 模型 组(P<0.017)。HE染色结果显示,正常妊娠组子宫蜕膜柱状上皮完整覆盖宫腔表面,子宫蜕膜腺体丰富;流产 模型 组宫腔内见大量血细胞,脱落子宫蜕膜组织,蜕膜层变薄;减味寿胎丸组和地屈孕酮组较流产 模型 组腺体减少不明显,蜕膜结构较规则。流产 模型 组小鼠子宫蜕膜组织FOXO3、PR蛋白表达均较正常妊娠组降低(P<0.05);减味寿胎丸组和地屈孕酮组小鼠子宫蜕膜组织FOXO3、PR蛋白表达均较流产 模型 组明显升高(P<0.05),而减味寿胎丸组和地屈孕酮组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论减味寿胎丸可以降低小鼠流产 率,其机制可能与上调子宫蜕膜组织中FOXO3和PR蛋白表达有关。关键词：自然流产 子宫蜕膜 孕激素受体 重组脂联素对自然 流产 模型 小鼠子宫蜕膜组织中FOXO3蛋白表达的影响 被引量：2 2021年 自然 流产 模型 小鼠子宫蜕膜组织中FOXO3蛋白表达的影响。方法将24只自然 流产 模型 小鼠按照随机数字表法分为3组—模型 组、脂联素1组、脂联素2组,每组8只。3组分别给予小鼠腹腔注射重组脂联素,剂量分别为0、0.1、1 mg/kg,1次/d,连续应用14 d。治疗第7天与治疗第14天,观察胚胎情况,计数吸收胚胎数和存活胚胎数;检测脂联素、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)等表达水平;检测脾脏CD4+CD25+T细胞比率;检测子宫蜕膜组织中FOXO3蛋白表达变化情况。结果治疗第7天与治疗第14天,脂联素1组、脂联素2组的胚胎吸收率均低于模型 组,差异均有统计学意义(P<0.05),脂联素2组低于脂联素1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗第7天与治疗第14天,脂联素1组、脂联素2组的血清脂联素、TGF-β水平高于模型 组,血清IL-17水平低于模型 组,脂联素2组与脂联素1组对比,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗第7天与治疗第14天,脂联素1组、脂联素2组的脾脏CD4+CD25+T细胞比率高于模型 组(P<0.05),脂联素2组高于脂联素1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗第7天与治疗第14天,脂联素1组、脂联素2组的子宫脱膜组织FOXO3蛋白相对表达水平高于模型 组(P<0.05),脂联素2组高于脂联素1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论重组脂联素在自然 流产 模型 小鼠的应用能促进子宫蜕膜组织中FOXO3蛋白表达,提高脾脏CD4^(+)CD25^(+)T细胞比率,调节小鼠的免疫平衡,从而能降低胚胎吸收率。关键词：小鼠 自然流产 免疫功能 寿胎丸减味方对肾虚自然 流产 模型 小鼠IL-17的影响 被引量：12 2020年 自然 流产 (SA)模型 小鼠血清白介素17(IL-17)和蜕膜组织中IL-17基因(mRNA)及蛋白表达的影响。方法CBA/J小鼠确定妊娠后,用羟基脲建立肾虚-SA模型 ,用寿胎丸减味方水提液高、中、低剂量进行治疗,并设立空白组。比较各组小鼠行为差异,流产 率、血清IL-17和IL-17 mRNA、蛋白的表达差异。结果寿胎减味方丸干预下中药组与模型 组相比,能够显著改善孕鼠的行为、流产 率、血清IL-17水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及蛋白印迹法(Western blot)结果显示:寿胎丸减味方能显著降低小鼠蜕膜组织中IL-17、IL-17 mRNA、蛋白的表达。结论寿胎丸减味方降低肾虚-SA小鼠流产 率的机制,可能与降低蜕膜组织IL-17 mRNA、蛋白的表达,以及影响孕鼠血清IL-17的这一免疫调节机制有关。关键词：肾虚 自然流产 蜕膜 IL-17 CBA/J小鼠虚热型反复自然 流产 模型 的建立 被引量：8 2020年 自然 流产 模型 。方法:将雌性CBA/J与雄性DBA/2J小鼠以2∶1合笼交配,制备反复自然 流产 模型 。然后灌服附子、干姜、肉桂复方11 d,建立虚热型反复自然 流产 病症结合模型 。观察每只小鼠的精神状态、皮毛颜色、舌象、大便性状并测定小鼠的肛温、食量、饮水量,与虚热证有关的生物化学指标、妊娠小鼠阴道出血情况、宫内胚胎发育、流产 情况。结果:(1)虚热型反复自然 流产 组小鼠均于造模后出现精神萎靡、反应迟钝、毛色干枯、易怒、大便干结、饮水量明显增加等情况。(2)虚热型反复自然 流产 组小鼠T3、T4水平均高于正常组、反复自然 流产 组,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)虚热型反复自然 流产 组肛温较正常组、反复自然 流产 组明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。均符合虚热证模型 指标。(4)与正常组比较,反复自然 流产 组,虚热型反复自然 流产 组流产 率明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:该模型 可成为虚热型反复自然 流产 病症防治研究药效的实用模型 。关键词：虚热证 反复自然流产 动物模型 小鼠 重组脂联素对自然 流产 模型 小鼠妊娠结局及Th17/Treg平衡的影响 被引量：5 2020年 自然 流产 (SA)模型 小鼠妊娠结局、辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法选择SPF级CBA/J雌性小鼠与DAB/2、BALB/c雄性小鼠建立正常妊娠模型 (CBA/J雌鼠与BALB/c雄鼠交配)与SA模型 (CBA/J雌鼠与DBA/2雄鼠交配),SA模型 小鼠分为模型 组与重组脂联素组。重组脂联素组自妊娠第5天开始腹腔注射重组脂联素10μg(kg·d),连续9d;模型 组同步注射等量生理盐水;正常妊娠组不作任何处理。妊娠2周后处死各组小鼠,计算胚胎吸收率。苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠滋养细胞形态改变。酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组小鼠血清脂联素、Th17相关细胞因子白细胞介素-17(IL-17)及Treg相关细胞因子白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子(TGF)-β1水平。取小鼠脾脏组织,流式细胞术检测Th17/Treg细胞平衡的变化。实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)测定Th17细胞转录因子RORγt及Treg细胞转录因子FOXP3mRNA水平。结果与正常妊娠组比较,模型 组小鼠胚胎吸收率上升(P<0.05);与模型 组比较,重组脂联素组胚胎吸收率降低(P<0.05);正常妊娠组、重组脂联素组胚胎吸收率比较差异无统计学意义(P>0.05);与正常妊娠组比较,模型 组、重组脂联素组血脂联素、IL-10、TGF-β1水平降低,IL-17水平及IL-17/TGF-β1值上升(P<0.05),脾脏淋巴细胞Th17细胞比率、Th17/Treg值、RORγtmRNA上升,Treg细胞比率、FOXP3mRNA降低(P<0.05);与模型 组比较,重组脂联素组血清脂联素、IL-10、TGF-β水平上升,IL-17水平及IL-17/TGF-β1值降低(P<0.05),脾脏淋巴细胞Th17细胞比率、Th17/Treg值、RORγtmRNA降低,Treg细胞比率、FOXP3mRNA上升(P<0.05)。结论重组脂联素可能通过调节Th17/Treg免疫平衡改善SA模型 小鼠妊娠结局,维持妊娠早期免疫耐受。关键词：小鼠 自然流产 辅助性T细胞17 调节性T细胞 丹参酚酸B灌胃的免疫性自然 流产 模型 小鼠流产 情况、胎盘和脾脏组织淋巴细胞及炎症因子表达观察 被引量：8 2019年 自然 流产 模型 小鼠的流产 情况、胎盘和脾脏组织淋巴细胞及胎盘组织炎症因子的表达情况。方法 取动情期CBA/J (H-2k)雌鼠与CBA/J (H-2k)雄鼠交配获得妊娠CBA/J (H-2k)雌鼠10只为CBA/J (H-2k)×CBA/J (H-2k)正常免疫耐受妊娠组(正常妊娠组);动情期雌鼠CBA/J (H-2k)与DBA/2(H-2d)雄鼠交配制作免疫性自然 流产 小鼠模型 ,最终获得免疫性自然 流产 模型 小鼠妊娠鼠52只,将免疫性自然 流产 模型 小鼠妊娠鼠随机分为模型 组、治疗组各26只。从妊娠第0.5天每日早9点,正常妊娠组、模型 组蒸馏水0.5 mL灌胃,治疗组100 mg/kg的Sal B灌胃,1 d/次至妊娠第12.5天。妊娠第 12.5 天观察三组雌鼠流产 情况。妊娠第12.5天处死三组雌鼠,取脾脏组织流式细胞仪检测T细胞、B细胞、巨噬细胞、NK细胞,取胎盘组织检测CD3 +T细胞、NK细胞、巨噬细胞、B细胞、CD4 +T细胞、CD8 +T细胞,RT-PCR法检测胎盘组织NF-κ B、中TNF -α、Toll样受体2(TLR-2)、TLR-4、TLR-7 mRNA。结果 治疗组、模型 组、正常妊娠组流产 率分别为6.00%±11.16%、21.00%±13.37%、14.00%±9.43%,与正常妊娠组比较,模型 组流产 率升高,与模型 组比较,治疗组流产 率降低( P 均<0.05)。三组脾脏组织T细胞、B细胞、巨噬细胞、NK细胞表达比例间差异均无统计学意义( P 均>0.05)。与模型 组比较,治疗组胎盘组织Nk细胞、CD8 +T细胞比例降低( P 均<0.05)。与正常妊娠组比较,模型 组胎盘组织TLR-2、TLR-4、TLR-7 mRNA相对表达量均升高( P 均<0.05);与模型 组比较,治疗组胎盘组织NF-κB 、TNF -α、TLR-2、TLR-4、TLR-7 mRNA相对表达量均降低( P 均<0.05)。结论 Sal B灌胃的免疫性自然 流产 模型 小鼠流产 率降低。Sal B灌胃的免疫性自然 流产 模型 小鼠胎盘组织Nk细胞、CD8 +T细胞比例降低,NF-κB 、TNF -α、TLR-2、TLR-4、TLR-7 mRNA相对表达量均降低。Sal B可能通过减轻的胎盘炎关键词：丹参酚酸B 流产 母胎免疫耐受
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李大金 作品数：447 被引量：2,440 H指数：24 供职机构：复旦大学附属妇产科医院 研究主题：滋养细胞 母-胎界面 反复自然流产 补肾宁心方 成骨细胞 叶平 作品数：124 被引量：487 H指数：12 供职机构：浙江省立同德医院 研究主题：自然流产 中医体质 复发性流产 流产患者 不孕症 杜美蓉 作品数：61 被引量：173 H指数：8 供职机构：复旦大学附属妇产科医院 研究主题：环孢素A 滋养细胞 母-胎界面 自然流产 自然流产模型 王明雁 作品数：80 被引量：637 H指数：14 供职机构：复旦大学附属妇产科医院 研究主题：反复自然流产 母-胎免疫耐受 过继转输 滋养细胞 自然流产 朱晓勇 作品数：53 被引量：261 H指数：10 供职机构：复旦大学附属妇产科医院 研究主题：协同刺激分子 母-胎免疫耐受 T细胞诱导 自然流产模型 胚胎吸收率
