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钙依赖蛋白激酶参与柑橘免疫调控的机制研究: 柑橘黄龙病（Huanglongbing,HLB）是一种全球范围内极具破坏性的柑橘病害,其主要致病菌为韧皮部杆菌属亚洲种（Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas）。钙离子是细胞内的第二...; 张靖晗; 关键词：柑橘黄龙病钙依赖蛋白激酶钙信号黄龙病菌植物免疫

钙依赖蛋白激酶CPK17在花粉管生长中的功能分析: 2024年; 钙依赖蛋白激酶(CPK)是一类响应钙信号的蛋白激酶,参与调节植物繁殖中钙信号和细胞骨架精密控制的花粉管极性生长。为揭示拟南芥CPK在花粉管极性生长中的功能,利用生物信息学方法分析CPK家族成员的表达模式和进化关系,构建持续激活(CA)和显性抑制(DN)型CPK17突变体。基于基因枪技术,观察CA-CPK17和DN-CPK17过表达花粉管的表型变化,比较高钙和低钙胁迫对CPK17和CA-CPK17过表达花粉管生长的影响,分析CPK17与同源蛋白CPK34的共同表达情况。另外预测CPK17的互作蛋白网络,并对部分互作蛋白进行验证。结果显示,拟南芥中有7个花粉特异表达的CPKs,其中CPK17和CPK34具有高度的相似性(93%),并在成熟花粉中高表达,在其他组织中低表达或不表达。过量表达CPK17对花粉管生长没有显著影响,而CA-CPK17则导致花粉管去极化生长和顶端肿胀,DN-CPK17无明显效果。过量表达CPK34也引起类似的花粉管生长缺陷,而同时过表达CPK17和CPK34则使缺陷加重。钙胁迫试验显示,CPK17过表达花粉管对低钙条件不敏感,而对高钙条件敏感。而缺乏调控域的CA-CPK17过表达花粉管对高钙和低钙条件均不敏感。预测的CPK17互作蛋白主要是ROP负调节因子,但酵母双杂交试验未能证实存在互作关系。这些结果表明,CPK17的C端调控域在钙信号的响应中起重要作用。CPK17和CPK34在花粉管生长中具有协同作用,可能通过调控钙离子的内流,进而影响胞内的钙离子梯度。; 周利明任中慧刘格房玮; 关键词：花粉管基因枪钙依赖蛋白激酶

一种烟草钙依赖蛋白激酶基因的应用: 本发明属于遗传工程技术领域，具体涉及一种烟草钙依赖蛋白激酶基因的应用。所述烟草钙依赖蛋白激酶基因用于调控烟草烟碱含量的转基因烟草植株中；所述烟草钙依赖蛋白激酶基因包括烟草钙依赖蛋白激酶基因NtCDPK9‑1和烟草钙依赖蛋...; 王丙武隋学艺高玉龙宋中邦赵璐孔光辉焦芳婵张洪博吴兴富李永平

黄花苜蓿钙依赖蛋白激酶MfCDPK14蛋白及其应用: 本发明公开了黄花苜蓿钙依赖蛋白激酶MfCDPK14蛋白及其应用，该黄花苜蓿钙依赖蛋白激酶MfCDPK14蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明从黄花苜蓿中克隆了钙依赖蛋白激酶基因MfCDPK14的cDNA序...; 郭振飞赵鹏程李巧琪孔维一施海帆王召明苑峰刘亚玲

钙依赖蛋白激酶基因GhCCAMK在植物抗黄萎病中的应用: 本发明公开了钙依赖蛋白激酶基因GhCCAMK在植物抗黄萎病中的应用。属于基因工程技术领域。本发明利用GhCCAMK基因构建VIGS植物表达载体转化陆地棉TM‑1，获得的转基因棉花，在接种棉花黄萎病菌V991后表现出对黄萎...; 赵准黄全生胡文冉邵武奎郝晓燕高升旗

雨生红球藻钙依赖蛋白激酶(CDPK)家族鉴定与表达分析被引量：1: 2024年; 【目的】钙依赖蛋白激酶(CDPK或CPK)广泛参与植物生长发育和环境胁迫响应。为探究CDPK基因在雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)生长发育及虾青素积累中的功能,对HpCDPK基因家族进行鉴定和表达分析。【方法】利用生物信息学方法鉴定雨生红球藻HpCDPK基因家族成员,分析其编码蛋白的理化特性、系统进化、保守基序和功能结构域,以及缺氮等胁迫条件下HpCDPK成员基因的表达谱。【结果】结果表明,共鉴定7个HpCDPK基因家族成员,所有HpCDPK蛋白都含有典型EF-hand基序和蛋白激酶结构域。系统发育分析表明,这些HpCDPK与来自莱茵衣藻的CrCDPK聚为一类,与高等植物拟南芥的AtCDPK分开,暗示在进化过程中发生了种属特异性的基因复制事件。转录组数据分析表明,HpCDPK基因表达受到多种胁迫诱导,其中HpCDPK7基因转录水平在缺氮条件下上调最为明显。此外,HpCDPK与类胡萝卜素合成相关基因的表达相关性分析结果显示,HpCDPK与多个类胡萝卜素合成相关基因表达密切关联,特别是HpCDPK2与虾青素合成关键基因(BKT和BCH)的表达显著正相关(P<0.05)。【结论】本研究鉴定了7个HpCDPK基因,HpCDPK7基因在缺氮条件下的表达上调最为明显,HpCDPK2可能在类胡萝卜素及虾青素合成积累中发挥重要调控作用。研究结果为后续深入解析HpCDPK介导雨生红球藻胁迫响应和类胡萝卜素合成积累的功能及分子机制提供参考依据。; 李亚男张豪杰梁梦静罗涛李旺宁张春辉季春丽李润植薛金爱崔红利; 关键词：雨生红球藻非生物逆境

小麦钙依赖蛋白激酶基因TaCDPK17的克隆及其抗逆功能初步分析: 2024年; 为探究钙依赖蛋白激酶(CDPK)在小麦生长和逆境应答中的作用,从普通小麦中克隆了TaCDPK17基因,并对其进行了序列结构、表达模式和抗逆功能初步分析。结果表明,TaCDPK17基因编码区长1701 bp,编码566个氨基酸,具有CDPK家族的典型结构特征,包括1个保守的丝氨酸/苏氨酸激酶结构域和4个EF手型结构域。对TaCDPK17与其他12种植物的CDPK17进行进化树分析表明,TaCDPK17与禾本科作物,特别是节节麦、大麦的CDPK17序列有较高同源性。TaCDPK17基因启动子区域富含与激素调控、光照响应,以及非生物应答胁迫相关的顺式调控元件,其中,脱落酸(ABA)响应元件(ABRE)和茉莉酸甲酯响应元件(CGTCA)数量较多。基于实时荧光定量PCR的表达分析结果显示,TaCDPK17受100μmol/L ABA、100μmol/L茉莉酸甲酯、20%PEG6000和250 mmol/L NaCl诱导后,表达量有不同程度升高。在2μmol/L ABA和100 mmol/L NaCl胁迫处理条件下,过表达TaCDPK17的拟南芥种子萌发率显著高于野生型对照。同时,过表达TaCDPK17缓解了ABA或渗透胁迫处理对幼苗根生长的抑制作用。在气孔关闭过程中,过表达TaCDPK17的转基因植物对ABA更敏感,与野生型植物相比,表现出更强的气孔关闭趋势。这些结果表明,TaCDPK17在小麦逆境胁迫和激素信号应答中发挥着重要作用。; 甘露谢美娟卢振华李明丁博邱丽娜谢晓东王俊斌; 关键词：小麦钙依赖蛋白激酶基因克隆抗逆

蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因克隆与表达分析被引量：1: 2023年; 为探讨蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29)在蓖麻耐盐中的作用,以蓖麻叶片为材料,设计特异性引物,克隆蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29),并对所得序列进行生物信息学分析。结果表明,蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29)序列全长1590 bp;编码528个氨基酸;蛋白分子量为59.74 ku;等电点(pI)值6.21;是典型的非跨膜蛋白;亲水性数值为负值,属于亲水性蛋白;RcCDPK29蛋白α-螺旋占比最高有228个;RcCDPK29与拟南芥CDPK(SMTL ID:3q5i.1)相似度为40.41%,具有较高可信度(>30%)。将木薯、麻枫树、巴西橡胶树、柑橘、石榴、毛果杨与蓖麻RcCDPK29氨基酸序列进行同源性比对。其中,与麻枫树的同源性最高,为82.29%。RcCDPK29蛋白包含1个Ser/Thr蛋白激酶催化结构域和4个与Ca^(2+)结合的EF-hand型结构域。通过qRT-PCR技术,分析RcCDPK29在不同水平盐胁迫下蓖麻不同组织中的表达,结果表明,RcCDPK29基因主要在茎中表达,盐处理12 h表达量最高。随着盐处理时间的延长,RcCDPK29基因根的表达量逐渐下降,分别在2,8,24 h达到最低,与0 h差异显著;叶的表达量在2 h的表达量最低且与0 h相比差异显著。根据RcCDPK29全长设计带有SmaⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物扩增出序列全长,用SmaⅠ和XbaⅠ进行双酶切后与表达载体pCG-3300连接。成功构建了CRcCDPK29的表达载体。因此,RcCDPK29在蓖麻受到盐胁迫时起重要作用。; 王莹王晓宇孙德慧霍红雁刘海臣徐惠张继星; 关键词：蓖麻钙依赖蛋白激酶基因克隆生物信息学分析

玉米钙依赖蛋白激酶全基因组鉴定及抗旱表达分析被引量：1: 2023年; 【目的】分析研究玉米钙依赖蛋白激酶全基因组鉴定及抗旱表达。【方法】使用NCBI Blast、DNAMAN和MotifScan等程序分析玉米钙依赖蛋白激酶CDPK的蛋白结构域和系统发育。采用Real-time RT-PCR方法分析CDPK基因在干旱胁迫处理玉米幼苗中的表达,评价CDPK基因对玉米干旱胁迫反应能力。【结果】鉴定出了在玉米中含有39个CDPK基因。将CDPK基因分为4个组。每个群体中的成员有共同的蛋白质基序和外显子及内含子结构,共同的进化起源。39个玉米CDPK基因根据它们的系统发育关系分组,并锚定在特定的玉米染色体上。多数CDPK基因在玉米干旱胁迫中的表达水平发生改变,CDPK基因参与对干旱胁迫的响应。【结论】从玉米基因组数据库中鉴定出了39个CDPK基因,大多数玉米CDPK基因在不同组织和不同发育阶段表现出不同的表达水平,CDPK基因在玉米发育中发挥不同的作用。多数CDPK基因在干旱胁迫下的表达量均发生变化。; 陈果郝晓燕高升旗胡文冉赵准黄全生; 关键词：钙依赖蛋白激酶干旱胁迫玉米

钙依赖蛋白激酶基因GhCCAMK在植物抗黄萎病中的应用: 本发明公开了钙依赖蛋白激酶基因GhCCAMK在植物抗黄萎病中的应用。属于基因工程技术领域。本发明利用GhCCAMK基因构建VIGS植物表达载体转化陆地棉TM‑1，获得的转基因棉花，在接种棉花黄萎病菌V991后表现出对黄萎...; 赵准黄全生胡文冉邵武奎郝晓燕高升旗

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