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文蛤甲状腺激素受体MmTR互作蛋白筛选及其对Aroclor 1254胁迫的转录响应研究
2023年
环境中存在的甲状腺干扰物(thyroid disrupting chemicals,TDCs)可影响生物体内甲状腺激素(thyroid hormone,THs)的合成、分泌、转运、代谢和作用等过程,干扰THs稳态,引起THs水平失衡。甲状腺激素受体(thyroid hormone receptors,TRs)是一种存在于细胞核内的DNA结合转录因子,属于配体依赖型核激素受体超家族。TRs可与甲状腺激素响应元件(thyroid hormone response elements,TREs)结合,调控其转录表达。TDCs可作为生物体内TRs的配基,竞争性地与TRs结合,进而激活甲状腺信号通路,调控机体的整个甲状腺信号通路基因的转录表达。为探究TDCs对海洋无脊椎动物体内甲状腺激素是否具有干扰效应及其机制,本文通过构建文蛤消化盲囊组织酵母双杂交cDNA文库和文蛤甲状腺激素受体TR基因的诱饵载体pGBKT7-MmTR,在文库内进行MmTR的互作蛋白筛选和鉴定。结果表明,文蛤消化盲囊酵母双杂交cDNA文库中,cDNA片段大小在0.5~2 kb之间,库容约>2×10^(6) cfu。重组质粒pGBKT7-MmTR诱饵载体无毒性和自激活活性,可应用于酵母双杂交系统。经文库筛选共得到36个阳性克隆子,测序获得30个阳性克隆片段。随机选取BIRC2_3与MmTR基因进行点对点验证,结果为阳性,推测所有结果真实可靠。经比对分析,MmTR的29个潜在互作蛋白,功能涉及生长与发育过程、蛋白质代谢与免疫调控过程、应激响应过程和转录调控过程。不同浓度Aroclor 1254胁迫下幼体及成体文蛤体内MmTR基因潜在互作蛋白基因的转录响应分析发现,大多数潜在互作蛋白基因会对低浓度(10 ng·L^(-1)和20 ng·L^(-1))的Aroclor 1254短时间(1 d)暴露产生转录上调响应,且在成体阶段相关基因的转录响应更强烈;与成体阶段相比,文蛤幼体阶段暴露于高浓度(2000 ng·L^(-1))的Aroclor 1254中,生长与发育、蛋白质代谢与免疫调控过程相关的MmTR潜在互作蛋白基因RSPH9、N23、ferritin、BHMT、SCC4、PSMB5具�
蔡月凤谭皓文吴钰泽胡杰姬南京申欣
关键词:文蛤酵母双杂交甲状腺激素受体
Aroclor1254对雄性大鼠的生殖毒性效应
2021年
目的探讨Aroclor1254对成年雄性大鼠的生殖毒性效应。方法将90 d的成年雄性SD大鼠(体质量250~300 g)随机分为溶剂对照组和Aroclor1254低、中、高剂量(1、3、5 mg/kg)组,每组8只。采用腹腔注射法连续给药,制备SD大鼠生精障碍模型,溶剂对照组给予等体积玉米油,给药30 d后麻醉处死大鼠,记录各组大鼠体质量、睾丸和附睾质量,计算睾丸和附睾器官系数并检测各组大鼠给药后精子数。采用苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理学变化。结果与溶剂对照组比较,Aroclor1254低、中、高剂量组大鼠的体质量、睾丸和附睾质量、睾丸和附睾器官系数、精子计数均随剂量升高而降低,以高剂量组降低最多〔体质量(g):278.32±5.60比301.05±4.35,睾丸质量(g):1.39±0.08比1.66±0.04,附睾质量(g):0.35±0.07比0.54±0.05,睾丸器官系数:(5.00±0.25)%比(5.51±0.10)%,附睾器官系数:(1.20±0.24)%比(1.80±0.22)%,精子计数(×10^(6)个):11.50±1.06比19.50±2.92,均P<0.05〕。Aroclor1254处理组大鼠生精小管结构破坏、排列紊乱、两生精小管间质细胞减少,且随剂量升高症状加重。结论Aroclor1254暴露可能通过破坏血睾屏障的完整性损伤大鼠生殖功能。
陈潞萍邢晖冮岩赵建文邹鹏贾晓宇
关键词:血睾屏障生精障碍生殖毒性
Aroclor1242暴露对荻组培苗不定根分化的影响被引量:3
2019年
为了揭示多氯联苯Aroclor1242对荻组培苗不定根分化影响的作用机制,以多氯联苯Aroclor1242为污染物,对处于分化和生长过程中的荻组培苗不定根全程持续暴露,研究Aroclor1242对荻组培苗不定根分化的影响,并利用玉米胚芽鞘伸长试验和拟南芥 DR5::GUS 报告基因应答反应定性分析Aroclor1242的类植物生长素生物效应。结果表明:2 mg/L、4 mg/L、6 mg/L和8 mg/L Aroclor1242暴露对荻不定根分化具有显著的促进作用,其不定根初根时间、不定根分化率达到100%时间以及侧根等均显著高于阴性对照,8 mg/L Aroclor1242对荻不定根分化促进作用最大,其初根时间比阴性对照提前9 d,比阳性对照提前2 d,不定根分化率达100%时间比阴性对照提前9 d,比阳性对照提前5 d;10 mg/L和20 mg/L Aroclor1242暴露对荻不定根分化表现出抑制作用。物质的类植物生长素定性分析发现,一定剂量的Aroclor1242对玉米胚芽鞘伸长无显著影响,但可以诱导生长素响应报告基因( DR5::GUS )阳性应答。以上结果表明,低剂量Aroclor1242可显著促进荻不定根分化而高剂量抑制,存在显著的剂量效应关系。Aroclor1242可能不是类植物生长素,但可能会通过影响植物内源生长素水平影响荻不定根分化。该发现为进一步深入研究PCBs不同同系物的毒理学及其植物修复机制提供了新的线索。
王亚校王子岚孙然杜克久
关键词:多氯联苯不定根
气相色谱-质谱法测试水质7种Aroclor系列多氯联苯的方法验证被引量:5
2019年
Aroclor系列多氯联苯为多物质混合物,定量困难。本文研究了Aroclor系列多氯联苯的组成特点,提出了选取各Aroclor系列多氯联苯中5~10个特征峰,将选取的特征峰面积加和与浓度制作标准曲线进行定量的方法,可作为标准方法的补充说明。
王定森林国宝
关键词:气相色谱-质谱法多氯联苯AROCLOR
雌激素受体α在Aroclor 1254促进GC-1细胞增殖中的作用被引量:1
2019年
目的研究Aroclor 1254对生精细胞增殖的影响及其可能机制,探讨雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)在此过程中的作用。方法体外培养GC-1细胞,用不同浓度的Aroclor 1254(0、0.05、0.5和5 mg/L)处理。采用MTT法检测细胞存活率;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ERα及其下游蛋白的表达;采用ERα特异性阻断剂MPP抑制ERα表达,进而研究ERα在Aroclor 1254影响GC-1细胞增殖中的作用。结果Aroclor 1254可以明显促进GC-1细胞增殖及cyclin D1的表达;Aroclor 1254染毒可使GC-1细胞中ERα及磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(phospho-extracellular regulated protein kinases 1/2,p-ERK1/2)的表达水平明显升高;MPP阻断ERα表达后,Aroclor 1254对p-ERK1/2表达及细胞增殖的促进作用被部分逆转。结论Aroclor 1254可促进生精细胞增殖,其机制可能是通过上调ERα的表达继而诱导ERK1/2磷酸化,并最终促进生精细胞增殖。
程振平韩毓江俊康陈刚瞿建华
关键词:ERΑ细胞增殖
多氯联苯(Aroclor 1242)胁迫下鲤鱼肝脏组织氧化应激被引量:2
2018年
本文在实验室条件下通过静态水质染毒方式在生理生化和转录水平上探究了我国重要经济鱼种鲤鱼(Cyprinus carpioio)对多氯联苯Aroclor 1242的氧化应激:鲤鱼肝脏组织抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutase,SOD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)]活性、脂质过氧化产物丙二醛(Malonydialdehyde,MDA)含量、相关抗氧化酶编码基因(Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、CAT)、应激蛋白HSP70、转录因子Nrf2和芳烃受体AhR2基因表达。结果表明:Aroclor 1242胁迫下,鲤鱼肝脏组织抗氧化酶活性表现出低浓度促进高浓度抑制的趋势;肝脏组织丙二醛含量显著升高,其中390μg/L暴露组鲤鱼肝脏组织MDA含量在第6d高于对照组92.1%(P<0.01),表明肝脏组织发生脂质过氧化,膜系统受到损伤;鲤鱼肝脏组织中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、CAT、HSP70、Nrf2和AhR2编码基因表达出现不同程度下调。本文从酶学和基因转录水平上揭示了Aroclor1242胁迫下鲤鱼肝脏组织细胞的氧化应激。
王仁君王建国丁宁孙萌高配科
关键词:多氯联苯鲤鱼氧化应激脂质过氧化
Determination of Aroclor 1254 in Water Samples Using Polystyrene-Divinylbenzene Solid-Phase Extraction and Gas Chromatography
2018年
A method was developed for the determination of Aroclor 1254 in water samples using polystyrene-divinylbenzene(PS-DVB)solid-phase extraction(SPE)and gas chromatography(GC).The PS-DVB sorbent demonstrated good recoveries of Aroclor 1254 when sulfuric acid(1:1,v:v)was added to the samples.Sample quantification was performed using gas chroma-tography with a parallel column and dual electron capture detector.Factors in extraction method procedures were optimized,including sample pH,elution solvent,eluting volume and breakthrough volume.With the 1000 ml sample acidified to pH 1.0,a 6.0 ml n-hexane/ethyl acetate(1:1,v:v)elution solvent,and gas chromatographic determination,the recoveries of Aroclor 1254 in spiked water samples ranged from 90.6 to 104%.Across testing days,repeatability ranged from 4.7 to 7.6%.The method detection limit was 0.053μg/L.PS-DVB exhibited a broader pH stability range,satisfactory recoveries,and good repeatability for Aroclor 1254 extraction.The results indicate that these methods can be used to analyze trace amounts of Aroclor 1254,and represent a new analytical approach for determining polychlorinated biphenyls in water samples.
Fei ShenYan-Juan XuYe WangPei-Yu ZhuXiu-Li DaiJing ChenQian Zou
关键词:POLYSTYRENE-DIVINYLBENZENE
多氯联苯(Aroclor1242)胁迫下鲤鱼肝脏氧化应激:生理生化及转录水平分析
多氯联苯(Polychlorinated biphenyls,PCBs)在环境中无处不在,是一类典型的环境持久性有机污染物(Persistent organic pollutants,POPs)。多氯联苯具有稳定的理化性...
王建国
关键词:多氯联苯鲤鱼氧化应激抗氧化系统
文献传递
环糊精和表面活性剂对多氯联苯污染土壤的洗脱增效修复对比研究被引量:3
2018年
研究了羟丙基-β-环糊精溶液(HPCD)和表面活性剂(SDS)对多氯联苯(Aroclor1242)污染土壤的洗脱增效修复作用。通过中式柱淋洗-洗脱试验,分别采用不同浓度的HPCD和SDS对污染土壤中多氯联苯(Aroclor1242)进行洗脱,重蒸馏水、5g/L SDS以及10g/L SDS对污染土壤中Aroclor1242的洗脱率分别0.51%、2.93%、25.9%;而相同浓度的HPCD对污染土壤中Aroclor1242的洗脱率分别为0.62%、8.42%、18.3%;此外,研究还发现,HPCD在土壤中的滞留相对SDS较少。研究结果表明,利用HPCD的疏水空腔,土壤中的弱极性有机污染物可以得到较好的处理效果,HPCD类环境安全试剂可以减少SDS的土壤滞留对环境带来的二次污染隐患,HPCD可望为污染土壤治理提供一种更具有广泛应用前景的新思路。
刘宏刘迅
关键词:羟丙基-Β-环糊精多氯联苯
Dose and duration dependent cytotoxicity of aroclor 1254 in the testis of mice
2017年
Objective:To evaluate the dose and duration dependent cytotoxicity of aroclor 1254 on mice testis.Methods: The study tests the hypothesis that in vivo exposure of very low dose aroclor 1254, comparable to that of possible human exposure from different environmental sources, will provoke dose and duration dependent histological damage in the mice testis. Male mice were orally administered with the two doses 0.1 and 1 mg/kg b.w /d. of aroclor 1254 for 7, 14, 21 and 28 days.Results:Results showed the degenerative changes in the testis of mice, namely, atrophied seminiferous tubules, expanded space in interstitial and necrosis in the germinal epithelial cells of seminiferous tubules, of the seminiferous tubules and deceleration of spermatogenesis.Conclusions: Therefore, the results of the present study suggested that the sub-acute exposure of very low doses of aroclor 1254, can subsequently mediate the cytoskeleton dysfunction in the testis of mice.
Shweta PathakJalpa RajaRahul Kundu
关键词:PCBSAROCLORHISTOPATHOLOGYTESTISMICE

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马保华
作品数:139被引量:503H指数:13
供职机构:西北农林科技大学动物科技学院
研究主题:胚胎移植 山羊 小鼠 波尔山羊 超数排卵
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作品数:978被引量:6,036H指数:34
供职机构:山东农业大学
研究主题:苦马豆素 抗菌肽 丹参 冰川棘豆 疯草
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作品数:80被引量:176H指数:8
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作品数:91被引量:371H指数:10
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研究主题:山羊 胚胎移植 小鼠 山羊卵母细胞 超数排卵
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作品数:89被引量:319H指数:11
供职机构:中国科学院生态环境研究中心
研究主题:非洲爪蟾 黑斑蛙 内分泌干扰物 蝌蚪 两栖动物