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经尿道联合灌注SCL和Cx43基因慢病毒对糖尿病膀胱功能的影响: 2022年; 目的探究干细胞白血病基因(SCL)重组慢病毒和缝隙连接蛋白基因(Cx43)重组慢病毒联合作用对豚鼠糖尿病膀胱(DCP)功能的影响。方法90只健康豚鼠适应性喂养1周后,按照200 mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),定期每周监测随机血糖,正常饲养12周后,通过尿流动力学检查筛选出40只符合标准的豚鼠,将其随机分成4组:糖尿病组、SCL组、Cx43组、SCL+Cx43组。糖尿病组经尿道向膀胱内灌注0.2 ml不含基因的空慢病毒,SCL组、Cx43组使用同样方法分别灌注SCL慢病毒和Cx43慢病毒0.2 ml,SCL+Cx43慢病毒组经尿道灌注SCL、Cx43慢病毒各0.2 ml。转染14 d后进行尿流动力学检查,检查后处死豚鼠,并迅速摘取膀胱,进行冰冻膀胱切片及荧光双染。结果与糖尿病组相比,SCL组、Cx43组在尿流动力学检查中差异无统计学意义(P>0.05),SCL+Cx43组尿流动力学检查可见逼尿肌压力、腹压、膀胱压均有改善(P<0.05)。糖尿病组激光共聚焦可见Cajal间质细胞(ICC)的数量减少,梭形结构及细胞突起明显被破坏,出现细胞裂解状态。SCL组、Cx43组可见ICC样细胞的梭形结构和细胞突起有所改善,细胞数量无明显变化。SCL+Cx43组可见ICC样细胞的数量增多,梭形结构及细胞突起有改善,并可形成ICC-二聚体。结论经尿道联合灌注SCL和Cx43基因重组慢病毒可以成功在豚鼠DCP膀胱中转染,可恢复损伤的ICC细胞的数量及结构,并形成ICC二聚体结构,提高糖尿病膀胱逼尿肌压力,改善排尿无力、腹压排尿等特点,为治疗DCP提供了新的方向。; 轩留明马路平欧阳松孙鹏谭明辉张永强王勤章; 关键词：糖尿病膀胱病变 CAJAL样间质细胞 CX43基因

经尿道灌注Cx43基因慢病毒对糖尿病豚鼠膀胱Cx43 mRNA及蛋白表达的影响: 目的:利用豚鼠构建糖尿病膀胱病变(Diabetic Cystopathy,DCP)模型,研究经尿道灌注Cx43基因重组慢病毒药物的方式,观察受损膀胱逼尿肌细胞缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)及m RNA...; 张永强; 关键词：CX43基因重组慢病毒糖尿病膀胱 CX43蛋白

观察在体联合灌注SCL和Cx43基因重组慢病毒对豚鼠糖尿病膀胱逼尿肌的影响: 2022年; 目的:探究干细胞白血病基因(Stem Cell Leukemia,SCL)重组慢病毒和缝隙连接蛋白基因[Gap Junction Protein Alpha 1,GJA1(又名Connexin43,Cx43)]重组慢病毒联合作用对豚鼠糖尿病膀胱(Diabetic Cystipathy,DCP)逼尿肌的影响。方法:40只健康豚鼠适应性喂养1周后,按照200mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ),定期每周监测随机血糖,正常饲养12周后,通过尿流动力学检查筛选出40只符合标准的豚鼠,将其随机分成4组:糖尿病组、SCL慢病毒组、Cx43慢病毒组、SCL+Cx43慢病毒组。糖尿病组经尿道向膀胱内灌注0.2mL不含基因的空慢病毒,SCL组、Cx43组使用同样方法分别灌注SCL慢病毒和Cx43慢病毒0.2mL,SCL+Cx43慢病毒组经尿道灌注SCL、Cx43慢病毒各0.2mL。转染14天后进行尿流动力学检查,检查后处死豚鼠,取出豚鼠膀胱,制作逼尿肌肌条,行逼尿肌肌条收缩实验。结果:SCL组和Cx43组与糖尿病组相比,在尿流动力学检查中逼尿肌压力无明显差异(P>0.05),SCL+Cx43组较糖尿病组尿流动力学检查可见逼尿肌压力有明显改善(P<0.05)。在逼尿肌肌条实验中,糖尿病组较正常组逼尿肌收缩幅度及频率明显下降(P<0.05),SCL组与糖尿病组相比逼尿肌收缩幅度及频率有所改善(P<0.05),Cx43组与糖尿病组相比,收缩幅度及收缩频率未见改善(P<0.05),SCL组和Cx43组之间比较无统计学差异(P>0.05)。SCL+Cx43组与糖尿病组相比,逼尿肌收缩幅度及频率有明显差异(P<0.05),SCL+Cx43组与正常组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:经尿道联合灌注SCL+Cx43基因重组慢病毒可以成功在豚鼠DCP膀胱中转染成功,可提高糖尿病膀胱逼尿肌压力,离体试验证实联合灌注较单一灌注可提高逼尿肌收缩幅度及收缩频率,为临床治疗DCP提供新的思路。; 轩留明马路平欧阳松孙鹏谭明辉张永强王勤章; 关键词：糖尿病膀胱病变 CAJAL样间质细胞 CX43基因

经尿道膀胱灌注SCL和Cx43基因慢病毒对DCP功能的影响及机制探索: 目的:探究干细胞白血病（Stem Cell Leukemia,SCL）基因和缝隙连接蛋白-43（Connexin43,Cx43）基因联合作用对豚鼠糖尿病膀胱（Diabetic Cystopathy,DCP）功能的影响和机...; 轩留明; 关键词：糖尿病膀胱病变 CAJAL样间质细胞

红芪多糖对糖尿病胃轻瘫大鼠小肠组织c-kit、Cx43基因和蛋白表达的影响被引量：15: 2020年; 目的观察红芪多糖(HPS)对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠小肠组织酪氨酸激酶受体c-kit、缝隙连接蛋白Cx43基因和蛋白表达的影响,探讨其对DGP大鼠肠动力障碍的作用机制。方法采用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素联合高糖高脂饲料不规则喂养方式复制DGP模型,将72只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组和HPS高、中、低剂量组,每组12只。阳性对照组予莫沙必利药液0.7 g/(kg·d)灌胃,HPS高、中、低剂量组分别予HPS药液0.2、0.1、0.05 g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组分别予等体积纯净水灌胃,每日1次,连续8周。HE染色观察小肠病理学结构改变;RT-PCR和Western blot分别检测小肠组织c-kit、Cx43 mRNA和蛋白的表达。结果HE染色结果显示,模型组大鼠小肠正常结构被破坏,大量炎性细胞浸润;各给药组大鼠情况改善,可见正常肠绒毛、中央乳糜管等结构,炎性细胞浸润减少,其中以HPS高剂量组改善明显。与空白组比较,模型组大鼠小肠组织c-kit、Cx43 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠小肠组织c-kit、Cx43 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),HPS高剂量组作用最显著。结论HPS通过上调c-kit、Cx43 mRNA和蛋白的表达提高小肠动力,改善DGP模型大鼠肠动力障碍。; 魏昭晖万生芳舒畅王秋兰李荣科张磊王晓丽何蕴良马欣欣郭倩; 关键词：糖尿病胃轻瘫红芪多糖 C-KIT CX43

超声靶向微泡破裂介导SERCA2a和Cx43基因转染联合干细胞移植治疗心肌梗死后心衰及心律失常的研究: 目的：　　本研究旨在借助超声靶向微泡破裂（Ultrasound-targeted microbubble destruction，UTMD）技术介导SERCA2a和Cx43基因共转染至心肌梗死Sprague Dawley...; 王伟; 关键词：骨髓间充质干细胞移植心肌收缩力

Cx43基因修饰对大肠癌细胞的放射增敏作用被引量：1: 2019年; 目的通过重组质粒pBudCE4.1-Cx43转染人大肠癌SW480细胞,探讨Cx43基因修饰对大肠癌SW480放射增敏性的影响。方法用Lipofectamine TM2000转染的方法将重组表达质粒pBudCE4.1-Cx43转染入大肠癌SW480细胞,通过RT-PCR、Western印迹检测Cx43在转染后的mRNA和蛋白的表达情况,转染48 h后,分别测定各个处理组细胞Cx43 mRNA水平及其蛋白表达水平,划痕染料示踪法检测细胞间通讯功能。各组细胞分别接受不同剂量6 MV X射线照射,通过集落形成实验检测细胞放射敏感性,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。每组实验重复3次。通过构建人大肠癌裸鼠移植瘤模型,观察10 Gy照射后肿瘤生长状况,并检测其Bcl-2基因活性。结果 Cx43 mRNA和蛋白表达,转染组与阴性对照组和空白组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞传递的荧光强度,转染组与阴性对照组和空白组相比亦显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),与阴性组和空白对照相比,经过射线放射处理后,转染组细胞的增殖能力显著降低(P<0.05);经过0～8 Gy射线处理后细胞克隆形成的能力明显下降(P<0.05);10 Gy照后,转染组凋亡率为(19.86±1.53)%,明显高于阴性对照组[(6.75±1.20)%]和空白组[(6.90±1.17)%,P<0.05];同时射线处理后移植瘤生长受到显著抑制作用;移植瘤细胞的Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论转染Cx43基因能够提高人大肠癌SW480细胞对X射线的敏感性,概系因降低了细胞Bcl-2的基因表达使然。; 王炳杰胡延伟赵叶芳张仕东; 关键词：大肠癌 CX43

沉默Cx43基因对左归丸促MC3T3-E1细胞分化作用的影响被引量：2: 2018年; 目的：研究沉默Cx43基因对左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞分化作用的影响。方法：采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默Cx43基因,将培养细胞分为正常对照A组、含药血清B组、基因沉默C组。细胞培养第3、5、7、9天进行ALP活性测定、第21天矿化结节茜素红染色,进行组间对比。结果：左归丸含药血清可以促进MC3T3-E1细胞的分化,与A组比较：ALP活性增强,其中第5、7、9天差异显著（P〈0.05）;茜素红染色面积增加（P〈0.01）。C组与B组比较：ALP活性降低,其中第7、9天差异显著（P〈0.05）;茜素红染色面积明显减少（P〈0.05）。结论：沉默细胞Cx43基因导致左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞分化作用明显下降。; 桑红灵周安方刘健陈好远章程鹏萧闵; 关键词：CX43 左归丸 MC3T3-E1

人Cx43基因干扰序列、shRNA-Cx43病毒及低表达Cx43蛋白的细胞系: 本发明公开了一种人Cx43基因干扰序列，如SEQ ID NO1所示。还公开了一种人shRNA‑Cx43病毒，为SEQ ID NO1所示的序列构建到表达质粒中。还公开了一种低表达Cx43蛋白的细胞系，为被shRNA‑Cx4...; 方卫斌张海灵; 文献传递

Cx43基因条件敲除小鼠的繁殖、基因型鉴定和骨髓检测被引量：2: 2017年; 目的探讨连接蛋白43(Cx43)基因条件敲除小鼠(Cx43KO小鼠)的繁殖、基因型鉴定及其导致的骨髓增生异常机制。方法将引进的2对转基因小鼠Cx43loxP/loxP和Lyz-Cre/+进行交配饲养和繁殖,选取子一代雌性Cx43loxP/-_Lyz-Cre/+与雄性Cx43loxP/loxP合笼交配,获得Cx43loxP/loxP_Lyz-Cre/+小鼠(即Cx43KO小鼠)。提取鼠尾组织基因组DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,RT-PCR方法进一步验证Cx43KO小鼠的正确性。结果 Cx43KO小鼠繁殖成功,成功获得Cx43loxP/loxP_Lyz-Cre/+、Cx43loxP/-_Lyz-Cre/+、Cx43loxP/loxP、Cx43loxP/-四种基因型小鼠;其繁殖结果符合孟德尔遗传定律。Cx43KO小鼠骨髓、肝、脾Cx43mRNA的表达均较杂合型小鼠下降(P<0.05)。结论 PCR方法可准确鉴定子鼠的基因型。雌性Cx43loxP/-_Lyz-Cre/+小鼠与雄性Cx43loxP/loxP小鼠交配是获得Cx43KO小鼠的有效途径。; 徐燕霞周东明傅晋翔; 关键词：基因敲除连接蛋白43 基因型鉴定聚合酶链反应

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