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瘤背石磺Egr-1基因的克隆、分析及低频声音刺激对其表达的影响被引量:1
2021年
早期生长反应因子1(Egr-1)基因又名为Zif268、NGFI-A、Krox-24、Tis8、ZENK,分布于脊椎动物的神经细胞中,参与识别功能相关的神经活动。本研究通过c DNA末端快速扩增法(RACE)获得瘤背石磺(Onchidium reevesii)Egr-1基因全长序列,进行蛋白质特征分析、氨基酸序列预测以及Egr-1基因的组织差异表达,并检测了不同低频声音(0~200 Hz)刺激0~24 h后Egr-1基因表达量的变化。结果显示:瘤背石磺Egr-1基因c DNA序列全长2556 bp,含134 bp的5’端非编码区、709 bp的3’端非编码区和1713 bp的开放阅读框,编码570个氨基酸。瘤背石磺Egr-1蛋白分子质量为61.31 kD,理论等电点为6.14,平均疏水指数-0.491,不含信号肽;二级结构和三级结构预测显示有琢螺旋和茁折叠。瘤背石磺Egr-1基因在其腹足、背部皮肤、神经节、肝胰腺、两性腺中均有表达,在神经节和两性腺中高表达,背部皮肤和肝胰腺中组织表达量最低(P<0.05)。相比对照组,受到低频声音刺激0.5 h,后瘤背石磺神经节中Egr-1基因的表达量显著升高,且不同频率声音间表达量差异显著(P<0.05),推测Egr-1基因参与了瘤背石磺识别低频声音功能相关的神经活动,所得结果为进一步研究瘤背石磺识别处理声音信息的分子机制提供重要的基础数据。
吴容宇梁威梁威杨铁柱杨铁柱
关键词:瘤背石磺EGR-1基因克隆
复方茵丹汤对HepG2细胞NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因沉默后MRP2和RXRα表达的影响
2020年
目的:观察HepG2细胞中核因子κB(NF-κB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、早期生长反应因子(Egr-1)基因沉默后复方茵丹汤对多药耐药相关蛋白2(MRP2)和人维甲酸X受体α(RXRα)表达的影响。方法:运用RT-PCR和Western blot检测复方茵丹汤对HepG2细胞中NF-κB、ICAM-1、Egr-1沉默与否,对NF-κB、ICAM-1、Egr-1、MRP2和RXRα基因和蛋白水平的影响。结果:与空白对照组比较,复方茵丹汤组和UDCA组NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白水平明显降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα基因和蛋白水平明显升高(P<0.01,P<0.05),复方茵丹汤对HepG2细胞NF-κB、ICAM-1、Egr-1、MRP2和RXRα表达的诱导作用明显强于UDCA组(P<0.01,P<0.05)。对各组进行NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因沉默后,与正常培养的HepG2细胞比较,转染siRNANF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1的细胞,其NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα的基因和蛋白水平显著升高(P<0.01)。与siRNA-NF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1转染组比较,siRNA-NF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1转染+复方茵丹汤组的NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα的基因和蛋白水平显著升高(P<0.01)。结论:复方茵丹汤在体外可通过下调NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白的表达来上调MRP2和RXRα基因和蛋白的水平。
李晓玲孙凤霞朱达徐萌罗明理王傲然
关键词:HEPG2细胞核因子ΚB细胞间黏附分子-1多药耐药相关蛋白2
EGR-1{1}在制备治疗脓毒症药物中的用途及相关药物
本发明提供EGR1{1}在制备治疗脓毒症药物中的用途及相关药物,本发明中的药物组合物可减轻内毒素血症的炎症反应,降低内毒素血症的死亡率,以及保护肝肺等脏器功能,来治疗脓毒症。
崔理立陈风邵义明张文莹赵田卢芙蓉
文献传递
中国人群中Egr-1基因多态性与胶质瘤的相关性研究被引量:3
2017年
目的分析我国人群中Egr-1基因在胶质瘤患者中多态性的表达。方法选取231例胶质瘤患者为病例组,121例非肿瘤患者为对照组,应用Taqman技术检测两组患者Egr-1基因多态性,应用SPSS 15.0统计软件对Taqman技术成功检测分型结果进行统计学处理,分析该位点多态性。结果统计学分析结果显示:病例组中T/T+C/C基因型频率、T等位基因频率分别为29.9%、47.6%,均小于对照组的37.2%、52.1%,但差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论 Egr-1基因多态性与胶质瘤的发病风险之间无明显关联。
吕中华谭春雷王洪滨张学新张磊常亮苏君张锐金华
关键词:EGR-1基因多态性胶质瘤
含Egr-1基因启动子的报告质粒的构建及Purα对Egr-1基因表达的调控被引量:2
2017年
目的探讨人转录活化因子阿尔法又称富含嘌呤成份(或元件)结合蛋白(human transcriptional activator alpha,also named as purine-rich element binding protein alpha,Purα)对早期生长反应蛋白-1(Egr-1)基因表达的调控作用。方法利用PCR技术从U87MG细胞基因组DNA中扩增Egr-1基因启动子近5’端约700bp的DNA片段,将扩增的DNA片段克隆到萤火虫荧光素酶报告基因载体p GL3-Basic的相应酶切位点,构建成含有Egr-1启动子的萤火虫荧光素酶报告基因载体(p GL3-Basic-Egr-1)并通过酶切和测序进行鉴定。通过萤火虫荧光素酶实验对p GL3-Basic-Egr-1启动子的活性进行测定并检测Purα蛋白对p GL3-Basic-Egr-1启动子活性的作用。通过q PCR和Western blot实验检测Purα蛋白在转录和翻译水平对Egr-1基因表达的调控作用。结果通过序列测定和酶切分析证实所构建的含Egr-1基因启动子的报告载体与实验设计完全一致,萤火虫荧光素酶分析实验证实所构建的p GL3-Basic-Egr-1启动子序列正确并具有活性,Purα蛋白可以抑制p GL3-Basic-Egr-1启动子的活性,过表达Purα可以在转录和翻译水平下调Egr-1基因的表达。结论 Purα蛋白具有下调Egr-1基因表达的作用。
袁程敏柴娟李平张冰莹郭姗姗何文欣石晓光孙涛崔建奇
关键词:基因表达调控阿尔茨海默病
清肝降脂方对脂肪变性LO2细胞HO-1、Egr-1基因及蛋白表达的影响被引量:1
2017年
目的:通过建立游离脂肪酸体外诱导的LO2细胞非酒精脂肪肝模型,探讨不同剂量的清肝降脂方对肝脏脂肪变LO2细胞HO-1、Egr-1基因及蛋白表达水平的影响。方法:建立游离脂肪酸诱导脂肪变性LO2肝细胞体外模型。人肝LO2细胞采用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养,待细胞均匀分布,随机分为6组:正常对照组、模型组、清肝降脂方高剂量组、中剂量组、低剂量组、水林佳对照组,每组6瓶。除正常对照组外,其余5组细胞均以0.5 mmol/L的游离脂肪酸诱导LO2非酒精脂肪肝细胞模型,诱导24 h后,各组随机抽取1瓶进行油红O染色,观察LO2细胞的脂肪化程度。确定模型诱导成功后,正常对照组和模型组分别加入10%正常大鼠血清,低、中、高剂量清肝降脂方药物血清组及水林佳药物血清组添加10%含相对应药物的大鼠血清,培养24h后,收集细胞;采用RT-PCR及Western blot法检测血红素氧化酶-1(HO-1)、早期生长反应因子-1(Egr-1)的基因及蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组LO2细胞HO-1、Egr-1 mRNA和蛋白表达有所增加;与模型对照组比较,自拟清肝降脂方三剂量组和对照药物组HO-1 mRNA及蛋白表达有所增高,Egr-1mRNA和蛋白表达明显降低;与对照药物组比较,清肝降脂方高剂量组HO-1 mRNA表达有所增高,Egr-1 mRNA表达有所降低。结论:Egr-1高表达可能会导致肝损伤机制之一;HO-1高表达可能是保护肝损伤机制之一;两者可能都是通过调节TNF-α表达来调节NAFLD细胞的损伤进展。清肝降脂方可明显改善LO2细胞Egr-1、HO-1 mRNA及蛋白的表达,可能为其治疗机制、临床诊断和判断进展参考指标。
何佳卢秉久
关键词:HO-1
Egr-1基因反义干扰表达载体的构建与鉴定
2017年
为构建可在人肝癌细胞中稳定表达Egr-1基因短发夹RNA(shRNA)的表达载体,设计合成Egr-1基因shRNA片段,连接到经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切的pGreenPuro^(TM)shRNA真核表达载体中,连接产物转化大肠杆菌后挑取阳性菌落扩大培养,经菌液PCR法初步鉴定为pGreenPuro-Egr-1shRNA重组子的重组子DNA,用测序法进一步鉴定,结果显示成功构建了Egr-1基因shRNA的反义干扰表达载体pGreenPuro-Egr-1shRNA.
刘锐锐李聪慧虞游陈建明
关键词:EGR-1基因SHRNA
宫颈癌超声造影的诊断价值及与Egr-1基因表达的相关性被引量:6
2017年
目的探讨宫颈癌患者的超声造影特征及其与Egr-1基因表达的相关性。方法分析40例病理确诊为宫颈癌患者的经腹超声造影特征,观察肿瘤的形态结构、血流信号分布及多普勒血流特征,对术后的肿瘤组织应用QRTPCR检测Egr-1基因的表达,分析超声造影表现与Egr-1基因表达之间的相关性。结果肿瘤组织的峰值强度(PI)为(75.71±2.13)显著高于正常组织(58.11.92),差异具有统计学意义(P<0.001)。肿瘤组织的病灶达峰时间(TTP)为(32.43±1.76)s显著短于正常组织(40.41±2.24)s,差异具有统计学意义(P=0.003);Egr-1基因在宫颈癌组织标本中的表达明显低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.001);Egr-1基因的表达与宫颈有无肿物,肿块的大小(≤4 cm)、淋巴结转移及病理分级相关(P均<0.05);宫颈癌造影增强强度与Egr-1表达相关,与肿瘤大小、淋巴结转移及病理分级无明显相关关系(P>0.05);非均匀性增强在Egr-1低表达患者中的比率明显高于Egr-1高表达者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌超声造影特征可显示其与Egr-1基因表达的相关性,有助于无创性评估宫颈癌的预后评估。
徐静王萍罗新刘民甫
关键词:宫颈癌EGR-1基因超声造影
Egr-1基因沉默对A549细胞放射敏感性的影响
2017年
目的:探讨Egr-1基因沉默对人肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响。方法:选用A549细胞株作为研究对象,将其分成A、B、C三组,即空白对照组(只加入RPMI-1640培养)、阴性对照组(加入LV3-NC-sh RNA)、实验组(加入{1}1-homo-2294-sh RNA),采用慢病毒介导的sh RNA干扰技术使实验组细胞Egr-1基因沉默表达。利用荧光显微镜、自动化荧光定量细胞成像分析系统分析sh RNA转染,利用FQ-PCR分析Egr-1表达,再利用细胞克隆形成实验检测细胞放射敏感性参数的差异。结果:慢病毒介导的sh RNA成功转染阴性对照组、实验组细胞;空白对照组与阴性对照组Egr-1表达无差异(P>0.05),实验组与空白对照组、阴性对照组比较Egr-1均受到明显抑制(P<0.05);克隆形成实验中细胞放射敏感性参数D0、SF2实验组细胞与空白对照组、阴性对照组比较均存在明显差异(P<0.05)。结论:Egr-1基因沉默使A549细胞放射敏感性降低,Egr-1表达可能与肿瘤细胞对放射的敏感性有关。
董广璐马艳伟徐军金茜李洪佳
关键词:EGR-1细胞凋亡A549细胞
姜黄素通过诱导Egr-1基因表达抑制HepG-2细胞的增殖被引量:2
2015年
利用姜黄素处理肝癌Hep G-2细胞研究其对细胞增殖的影响以及可能的分子机制。姜黄素处理后,半定量RT-PCR分析Hep G-2细胞内肿瘤相关基因的表达水平,对筛选得到的姜黄素诱导表达上调的Egr-1基因作进一步验证。随后,设计Egr-1 sh RNA并构建p Green Puro-Egr-1重组质粒,通过转染细胞,构建稳定干扰细胞系。然后,在干扰细胞系的基础上分析Egr-1表达沉默在姜黄素对Hep G-2细胞增殖影响中的作用。结果发现,不同浓度姜黄素处理24 h或48 h后,Hep G-2细胞增殖明显下降并呈剂量效应关系,20μmol/L姜黄素处理不同时间后,其增殖也明显下降并呈时间效应关系;Egr-1基因在姜黄素处理后表达明显升高;Egr-1表达沉默显著减弱了姜黄素抑制Hep G-2细胞增殖的能力。上述结果提示,姜黄素抑制Hep G-2细胞增殖可能是通过诱导Egr-1基因表达介导的,表明其在肝癌的治疗中具有一定的应用前景。
虞游蒋汉伟卢佳伟陈建明
关键词:姜黄素HEPG-2细胞EGR-1RNA干扰

相关作者

董广璐
作品数:17被引量:60H指数:5
供职机构:哈尔滨医科大学附属第二医院
研究主题:细胞凋亡 EGR-1基因 卡培他滨 细胞周期 EGR-1
许建华
作品数:29被引量:78H指数:6
供职机构:南京医科大学
研究主题:调强放疗 鼻咽肿瘤 放射疗法 鼻咽癌 局部晚期鼻咽癌
吴贤英
作品数:71被引量:313H指数:10
供职机构:汕头大学医学院病理学教研室
研究主题:食管肿瘤 免疫组织化学 食管癌 鼻咽癌 免疫组化
吴名耀
作品数:141被引量:532H指数:10
供职机构:汕头大学医学院病理学教研室
研究主题:食管肿瘤 免疫组织化学 食管癌 食管鳞癌 免疫组化
吴祖泽
作品数:471被引量:2,220H指数:25
供职机构:天津大学化工学院
研究主题:肝细胞生长因子 基因治疗 人胎肝 造血干细胞 白血病