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H{1}N1亚型禽流感病毒HA蛋白在水稻胚乳中的表达及其纯化
2024年
为制备H{1}N1亚型禽流感病毒HA蛋白并评估其免疫原性,利用水稻表达系统表达H{1}N1亚型禽流感病毒重组HA蛋白。首先构建了重组植物表达载体pCAMBIA1300-HA,该载体具有GT13特有启动子、信号肽SP和终止子,有利于外源基因在水稻中表达。之后将重组质粒pCAMBIA1300-HA通过电转化法导入根癌农杆菌EHA10{1}中,筛选出阳性菌落并侵染水稻愈伤组织。经过暗培养、潮霉素筛选、分化、生根、成苗,采用CTAB法提取水稻叶片DNA,PCR鉴定结果显示,HA基因已插入到水稻基因组中,重组HA基因大小为4660 bp。将阳性植株移植到大田中,4个月后收获水稻种子,提取水稻胚乳蛋白,Wester{17} blot鉴定结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达。重组HA蛋白通过Q阴离子层析、疏水层析和凝胶过滤层析三步分离纯化,其纯度达到90%以上。最后将纯化后的重组HA蛋白与ISA {1}0V佐剂混合并乳化制成疫苗,免疫小鼠,小鼠血清具有较高的特异性抗体水平,表明重组HA蛋白免疫原性较好。综上,成功构建了H{1}N1亚型禽流感病毒HA重组蛋白的水稻表达系统,并分离纯化获得了高纯度和免疫原性良好的重组HA蛋白。
屈小天王雅楠许倩茹李雪洋张申立张二芹张改平
关键词:H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白蛋白质纯化
2024年美国奶牛H{1}N1亚型高致病性禽流感疫情分析
2024年
2024年3月以来,美国报告了多例奶牛H{1}N1亚型高致病性禽流感病例,引发全球广泛关注。本文对本次疫情进行了系统梳理,分析了疫情流行情况和分布规律,提出了风险防范建议。现有数据表明,引发奶牛感染的H{1}N1亚型高致病性禽流感病毒属于2.3.4.4b分支,与美国同期在家禽和野禽中流行的毒株高度同源。初步分析表明,感染奶牛的病毒可能来源于野生候鸟。疫情发生后,美国采取了限制移动、调运检测等综合防控措施。本次疫情可能对美国奶牛产业造成一定程度的负面影响,但从目前来看对我国影响较小。建议持续进行国外疫情监视,国内加强野禽风险监测,强化家禽强制免疫,积极宣传引导,做好应急储备等,降低本次疫情对我国的影响。
蒋文明刘朔彭程刘华雷
关键词:H5N1高致病性禽流感奶牛
一种抗H{1}N1亚型禽流感的病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用
本发明公开了一种抗H{1}N1亚型禽流感的病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用。该病毒样颗粒由H{1}N1亚型禽流感病毒HA蛋白和H7N9亚型禽流感病毒M1蛋白组装而成;其中,所述的H{1}N1亚型禽流感病毒HA蛋白的氨基酸序列如SEQ...
樊惠英孔德鑫
H{1}N1亚型AIV MHC B1限制性T细胞表位肽及其应用
本发明公开了H{1}N1亚型AIV MHC B1限制性T细胞表位肽及其应用,所述表位肽如SEQ ID NO.112任一项所示。本发明以B1单倍型SPF鸭为研究对象,以H{1}N1AIV为模式病毒,建立H{1}N1AIV感染诱导B1...
廖明朱素芳代曼曼赵莉宋薇
应用适配体捕获建立H{1}N1亚型禽流感病毒拉曼光谱快速检测技术
2023年
基于表面增强拉曼散射(surface en{1}anced Raman scattering,SERS)和适配体捕获相结合技术,建立1H5N1亚型禽流感病毒快速检测方法。本实验室筛选得到2条针对H5N1亚型禽流感病毒具有良好的特异性和灵敏度的适配体,与磁珠偶联建立针对H5N1亚型禽流感病毒捕获试剂,通过对捕获体系进行原位还原生成纳米银颗粒增强拉曼信号,建立了原位、快速、无损的H5N1亚型禽流感病毒拉曼光谱快速检测技术。结果表明:H5N1亚型禽流感病毒在1058 cm^(-1)处有特异性拉曼峰谱,该方法具有良好的特异性、灵敏性和稳定性。该方法的最低检测限达到原病毒液稀释的1010倍。利用本方法可在10 min内快速检测出待测样本中是否有H5N1亚型禽流感病毒的存在,能够在大体积、低浓度样品中快速检测出目标病原,满足H5N1亚型禽流感病毒临场快检的需求。
李想崔焕忠李乾学
关键词:H5N1亚型禽流感病毒适配体
青海湖一株野鸟源H{1}N1亚型禽流感病毒核酸检测及其基因组序列特性分析
2023年
2022年8月,青海省刚察县野鸭出现异常死亡。采集死亡野鸭的组织提取核酸,经禽流感病毒(AIV)M基因引物初步鉴定定样品中含有AIV,随后H{1}/H7/H9分型引物鉴定。进一步二代测序后获得了AIV的8片段基因序列。序列比对分析表明,除了NS基因,其余基因与以往报道或H{1}亚型AIV标准毒株的内部基因同源性较高,HA基因裂解位点具有高致病性(HPAI)AIV的特征,故将感染野鸭的毒株命名为A/Wigeo{10}/Qi{10}g{12}ai/2022(H{1}N1)。从HA基因的遗传进化分析中发现,A/Wigeo{10}/Qi{10}g{12}ai/2022(H{1}N1)与最近几年在野鸟中流行的H{1}N1H{1}N8同在2.3.4.4b分支,而与200{1}—201{1}年在青海湖地区流行的毒株遗传距离较远,表明青海湖野鸟源H{1}亚型AIV遗传多样性丰富,需要持续对该地区野鸟中携带的AIV进行监测。
田野崔明仙颜焰简莹娜王光华王戈平李秀萍胡勇廖敏马利青
关键词:野鸟H5N1
H{1}N1亚型禽流感病毒适配体筛选与验证
禽流感(Avian influenza viruses,AIV)是一种全球范围内的流行性疾病,而H5N1亚型禽流感病毒更是作为其中主要流行毒株大肆蔓延。自H5N1亚型禽流感病毒爆发以来,不仅仅是给禽类养殖业带来巨大的损失...
李想
关键词:H5N1亚型禽流感病毒SELEX磁珠适配体
一种H{1}N1亚型禽流感病毒RPA的检测引物组、试剂盒及应用
本发明涉及一种H{1}N1亚型禽流感病毒RPA的检测引物组,包括具有SEQ ID NO.1‑6所示核苷酸序列的引物,以及,含有SEQ ID NO.7所示核苷酸序列的探针;其中,SEQ ID NO.7所示核苷酸序列中,在{1}’端...
张明洲付贤树王倩马骉孙凯
一种抗H{1}N1亚型禽流感的病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用
本发明公开了一种抗H{1}N1亚型禽流感的病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用。该病毒样颗粒由H{1}N1亚型禽流感病毒HA蛋白和H7N9亚型禽流感病毒M1蛋白组装而成;其中,所述的H{1}N1亚型禽流感病毒HA蛋白的氨基酸序列如SEQ...
樊惠英孔德鑫
H{1}N1亚型AIV MHC B1限制性T细胞表位肽及其应用
本发明公开了H{1}N1亚型AIV MHC B1限制性T细胞表位肽及其应用,所述表位肽如SEQ ID NO.112任一项所示。本发明以B1单倍型SPF鸭为研究对象,以H{1}N1AIV为模式病毒,建立H{1}N1AIV感染诱导B1...
廖明朱素芳代曼曼赵莉宋薇

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陈化兰
作品数:571被引量:1,579H指数:19
供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题:禽流感病毒 禽流感 猪流感病毒 流感病毒 DNA疫苗
刘明
作品数:199被引量:616H指数:13
供职机构:吉林农业大学
研究主题:禽流感病毒 H5N1亚型 昆虫细胞 H5N1亚型禽流感病毒 血凝素基因
李雁冰
作品数:155被引量:588H指数:13
供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题:禽流感病毒 禽流感 H5N1亚型 流感病毒 灭活疫苗
刘秀梵
作品数:858被引量:3,916H指数:29
供职机构:扬州大学兽医学院
研究主题:新城疫病毒 禽流感病毒 单克隆抗体 重组鸡痘病毒 免疫效力
田国彬
作品数:186被引量:457H指数:11
供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题:禽流感病毒 禽流感 H5N1亚型 灭活疫苗 流感病毒