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- R·阿特金斯苏冠铭G·拉克史敏阿拉亚南
- HDR成像中的盲局部整形
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- 一种多曝光图像融合的HDR视频生成方法及系统
- 本发明公开了一种多曝光图像融合的HDR视频生成方法及系统。首先通过双相机采集模块实现多曝光图像捕获,然后通过处理单元对采集到的多曝光图像数据进行帧同步及数据预处理。之后基于多曝光图像融合的HDR视频生成网络生成HDR视频...
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- 利用多域运动校正的高动态范围(HDR)图像生成
- 公开了用于捕获具有在不同景深的主题的图像的系统、装置、过程和计算机可读介质。一种处理图像数据的方法,包括:获得使用图像传感器捕获的第一图像,第一图像与第一曝光相关联;获得使用图像传感器捕获的第二图像,第二图像与比第一曝光...
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- 一种结合景深堆叠与HDR拼接技术的文物图像采集系统
- 本发明提供一种结合景深堆叠技术与高动态范围(HDR)拼接技术的文物图像采集系统,属图像采集技术领域。系统结合景深堆叠与HDR拼接技术,先设定焦平面位置和多种曝光时间,每个焦平面采集不同的曝光图像。再采用基于特征点的图像配...
- 谢宇宁袁建涛吴晓鑫殷锐肖铎高峰
- 离线-在线双模协同策略的辅助双结构光系统HDR化方法
- 本发明公开一种离线‑在线双模协同策略的辅助双结构光系统HDR化方法。该方法包括:离线模式下,定义高动态范围恢复模型下的强度非线性映射函数INMF;离线模式下,标定相机非线性响应函数CNRF,获得估计的相机非线性响应函数;...
- 曹伟宋展叶于平
- 一种基于HDR-CRISPR/Cas9技术快速构建重组鸭肠炎病毒的方法的建立
- 2025年
- [目的]本研究通过优化试验条件,建立基于HDR-CRISPR/Cas9基因编辑技术快速、准确地将外源基因定向插入鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus, DEV)基因组的方法,为以DEV为载体的重组疫苗的研制奠定基础。[方法]分离并扩繁DEV疫苗株,测定其病毒滴度。根据DEV疫苗株UL26、UL27基因间非编码区序列,设计合成向导RNA(gRNA),经双链退火获得目的片段,通过基因克隆技术将其插入PX459-V2.0载体获得gRNA-Cas9质粒。同时,通过常规基因克隆技术将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因插入PVAX-1载体,构建含有真核表达盒P_(CMV)-EGFP-BGH pA的重组表达质粒。以DEV疫苗株基因组为模板,扩增gRNA上、下游同源臂序列,通过融合PCR将同源臂序列与真核表达盒P_(CMV)-EGFP-BGH pA进行连接并克隆至PUC19载体获得供体质粒PUC19-UP-EGFP-DOWN。采用先转染质粒后感染亲本DEV的策略构建重组病毒rDEV-EGFP,通过控制单一变量法优化重组病毒构建的试验条件,根据不同条件下绿色荧光蚀斑数量确定最佳条件。利用有限稀释法筛选并纯化表达绿色荧光的蚀斑,获得重组病毒rDEV-EGFP,并对其进行遗传稳定性及体外复制能力的评估。[结果]PCR扩增及测序结果显示,成功构建靶向DEV基因组UL27与UL26基因间非编码区序列的gRNA-Cas9质粒及包含EGFP真核表达盒的供体质粒。鸡胚成纤维细胞(chick embryo fibroblast, CEF)中转染gRNA-Cas9及供体质粒后感染DEV,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蚀斑,表明成功利用HDR-CRISPR/Cas9基因编辑技术将EGFP报告基因敲入DEV基因组。优化后的最佳试验条件为:DEV感染复数(MOI)为0.2、gRNA-Cas9质粒与供体DNA转染比例为1∶2、供体DNA的转染形式为DNA片段、转染与感染时间间隔为6 h、重组病毒收取时间为DEV感染后48 h,优化后EGFP报告基因的敲入效率显著提高(P<0.05)。重组病毒rDEV-EGFP在CEF中连续传代15次,EGFP真核表达盒仍稳定整合�
- 贾文凤蒋香香陶慧丽王安平吴植朱善元
- 关键词:鸭肠炎病毒
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