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肝癌细胞下调IGF-1活性因子对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤影响分析被引量：5: 2018年; 目的分析肝癌细胞下调胰岛素生长因子(IGF-1)活性因子对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤的影响。方法选取3、5、9月龄Ras癌基因诱导雄性小鼠各10只,同时选取非转基因3、5、9月龄雄性小鼠各10只,提取9月龄Ras癌基因诱导雄性小鼠肿瘤组织、肿瘤周围组织样品为实验组,同时提取9月龄非转基因小鼠肝组织样品作为对照组,提取两组样品总RNA和蛋白质,选用蛋白质印迹法对其细胞外信号调节激酶(ERK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白表达进行检测;选用荧光定量PCR法对IGF-1、GHR、IGFBP3的mRNA表达水平进行检测;选用酶联免疫法对小鼠血清IGF-1水平进行检测;对3、5、9月龄Ras癌基因诱导雄性小鼠及非转基因小鼠外周血中B淋巴细胞、活性B淋巴细胞比例进行检测。结果 Ras癌基因小鼠诱导肿瘤组织ERK、PI3K、AKT平均蛋白表达水平与肿瘤周围组织比较,差异有统计学意义(P<0.05);Ras癌基因诱导小鼠肿瘤组织、肿瘤周围组织ERK、PI3K、AKT蛋白平均表达水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Ras癌基因诱导小鼠肿瘤组织IGF-1、GHR、IGFBP3的mRNA平均表达水平(0.27±0.05)、(0.23±0.02)、(19.48±2.54)与肿瘤周围组织(1.25±0.07)、(0.89±0.17)、(3.25±0.56)比较,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤周围组织IGF-1、GHR、IGFBP3的mRNA平均表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);3月龄Ras癌基因诱导小鼠血清IGF-1水平(61.72±9.24)μg/mL与非转基因小鼠(58.89±8.16)μg/mL比较差异无统计学意义(P>0.05);月龄5、9个月Ras癌基因诱导小鼠血清IGF-1水平(51.28±5.27)、(40.28±6.28)μg/mL均低于非转基因小鼠(55.32±7.91)、(49.52±6.94)μg/mL,差异有统计学意义(P<0.05);3、5、9月龄Ras癌基因诱导小鼠B淋巴细胞比例均低于非转基因小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);3、5月龄Ras癌基因诱导小鼠活性B淋巴细胞比例与非转基因小鼠比较差异无统; 刘洪琪李宪忠; 关键词：肝肿瘤 B淋巴细胞胰岛素生长因子 RAS癌基因

Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤蛋白质组学性别差异的研究: 目的检测雌雄Ras转基因小鼠肝肿瘤组织蛋白质组表达差异,探讨肝肿瘤发生的性别差异机制。方法采用双向荧光差异凝胶电泳(Two Dimension Difference Gel Electrophoresis,2D-DIGE...; 戎卓娜李慧玲郑旭董鹏辉李娟樊婷婷赵毅王福金王爱国王靖宇; 关键词：性别差异蛋白质组学生物信息学; 文献传递

IGF1及B淋巴细胞与Ras癌基因诱导肝肿瘤发生的相关性研究: 目的:　　探究肝癌细胞下调IGF-1活性的分子机制，并且阐述IGF-1与B淋巴细胞在Ras癌基因诱导肝肿瘤发生过程中的扮演的角色及二者的关系。　　方法:　　1、提取9月龄H-ras12V转基因雄鼠肝肿瘤组织(T)、肿瘤周...; 聂鑫; 关键词：肝肿瘤淋巴细胞; 文献传递

甲状腺激素对Ras癌基因诱导的肝肿瘤抑制作用研究被引量：7: 2015年; 目的甲状腺激素(thyroid hormones,THs)对肿瘤发生发展的作用机制尚存争议。本研究探讨THs对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤发生发展的影响作用。方法采集3、5、7、9个月龄的非转基因和H-ras12V转基因雄鼠(48只)的肝组织和血清样本,统计肝/体质量比,并用酶联免疫法检测血清中总T3、T4水平和游离T3、T4水平;RT-qPCR法和蛋白质印迹法检测9个月龄的非转基因和转基因雄鼠肝组织中THs结合蛋白(thyroid binding globulin,TBG)的mRNA水平和Cyclin D1的蛋白水平。将36只SPF级3个月龄转基因雄鼠按随机数表法分为对照组、甲亢组(饲喂甲状腺片)、甲减组(饲喂丙硫氧嘧啶片),每组12只,处理4个月,7个月龄时采样,检测小鼠血清中总T3和T4水平,统计肝/体质量比、肝肿瘤大小及数量。结果 3、5、7、9个月龄的转基因雄鼠肝/体质量比随月龄的增大逐渐增高,并显著高于同月龄非转基因雄鼠,P<0.01。与9个月龄的非转基因雄鼠相比,同月龄转基因雄鼠血清中总T3和T4水平显著升高(P<0.01),但游离T3和T4水平没有显著变化。与9个月龄的非转基因雄鼠肝组织及转基因雄鼠的肝癌旁组织相比,肝癌组织中TBG的mRNA表达水平和Cyclin D1蛋白水平都显著升高,P<0.01。与对照组相比,甲亢组的T3和T4水平显著升高(P<0.05),甲减组的显著降低,P<0.05。与甲减组相比,甲亢组的肝/体质量比和肝肿瘤总数都显著下降,P<0.05。与甲减组相比,甲亢组直径≥2mm的肝肿瘤数量显著下降(P<0.05),但<2mm的肝肿瘤数量差异无统计学意义。结论 THs对Ras癌基因诱导的肝肿瘤发展具有显著抑制作用,但对肝肿瘤发生没有显著影响。; 张敏聂鑫董建一李慧玲王福金王爱国王靖宇; 关键词：RAS癌基因甲状腺激素肝肿瘤转基因小鼠

低水平活性氧对Ras癌基因诱导肝肿瘤发生的影响被引量：6: 2015年; 目的探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在Ras癌基因诱导体内肝肿瘤发生中的作用。方法采用H-ras12V转基因肝癌小鼠模型,原位灌流法分离3个月龄雄鼠肝细胞和DCF-DA染色,流式细胞术检测肝细胞中的ROS水平;免疫荧光测定试剂盒检测7个月龄雄鼠肝组织ROS水平。对3和7个月龄雄鼠肝组织及肝肿瘤组织进行总蛋白提取,蛋白质印迹法检测ERK、p-ERK、p53、p21和Caspase-3的表达水平。结果流式细胞检测结果表明,3个月龄转基因雄鼠肝细胞中的ROS水平为7.81±0.53,比非转基因雄鼠肝细胞的1.00±0.16显著升高,t=21.31,P<0.001。免疫荧光检测表明,7个月龄转基因雄鼠肿瘤周围(P)组织中的ROS水平为18.25±4.41,比非转基因雄鼠肝(Wt)组织的2.42±0.61显著升高,t=6.16,P=0.004;比转基因雄鼠肿瘤(T)组织的3.18±1.75也显著升高,t=5.50,P=0.005。蛋白质印迹法检测表明,3个月龄转基因雄鼠肝组织中的p-ERK水平为5.36±0.32,比非转基因雄鼠肝组织的0.08±0.04显著升高,t=16.55,P=0.003。7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中p-ERK蛋白水平为22.09±6.57,比非转基因雄鼠肝组织的0.08±0.02显著升高,t=5.80,P=0.004;比转基因雄鼠肿瘤周围组织的8.60±3.23也显著升高,t=3.19,P=0.033;7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中p53蛋白水平为4.86±2.18,比非转基因雄鼠肝组织的39.23±13.43显著降低,t=-3.31,P=0.046;比转基因雄鼠肿瘤周围组织的31.09±7.60也显著降低,t=-3.32,P=0.029。7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中p21蛋白水平为4.38±3.28,比非转基因雄鼠肝组织的33.47±8.04显著降低,t=-5.95,P=0.010;比转基因雄鼠肿瘤周围组织的24.02±10.18也显著降低,t=-3.18,P=0.034。7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中的Caspase-3活化片段所占比例(17×103/35×103)为0.09±0.05,比非转基因雄鼠肝组织的0.22±0.04显著降低,t=-3.84,P=0.018;转基因雄鼠肿瘤周围组织的活化片段为0.10±0.05,比非转基因雄鼠肝组织的也显著降低,; 姚亮李慧玲董建一崔海鹏王福金王爱国王靖宇; 关键词：肝肿瘤活性氧转基因小鼠

甲状腺激素抑制Ras癌基因诱导的肝肿瘤发展: 目的:探讨甲状腺激素对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤发生发展的影响作用. 方法:采集3、5、7、9月龄非转基因小鼠和H-ras12V转基因小鼠的肝组织和血清样本,统计肝/体质量比,酶联免疫法检测血清中T3、T4水平...; 张敏董建一李慧玲聂鑫王福金王爱国王靖宇; 关键词：肝肿瘤甲状腺激素; 文献传递

ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤发生及脂质代谢紊乱被引量：2: 2013年; 目的探究ras癌基因在肝细胞中特异性表达对肝肿瘤发生及脂质代谢的影响。方法采集6～8月龄H-ras 12V转基因雄鼠的肝组织和血清,分别进行肝组织病理学检测和血清ALT、总胆固醇及甘油三酯水平的检测。结果 7月龄雄性转基因小鼠100%发生了肝肿瘤。病理学和血清学检测表明,与野生型小鼠相比,转基因小鼠的肝脏,特别是肝肿瘤,发生了显著的脂肪变性;转基因小鼠的ALT、总胆固醇水平显著升高,甘油三脂水平显著下降。结论 ras癌基因在肝细胞中的特异性表达诱导了肝肿瘤发生、肝细胞损伤和脂肪变性,并显著影响机体的脂质代谢。; 武艳霞董建一李慧玲汤莉王爱国王靖宇; 关键词：RAS癌基因肝癌脂质代谢

Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤发生及脂质代谢紊乱: 目的:探究ras癌基因在肝细胞中特异性表达对肝肿瘤发生及脂质代谢的影响.方法:采集6-8月龄H-ras12V转基因雄鼠的肝组织和血清,分别进行肝组织病理学检测和血清ALT、总胆固醇及甘油三酯水平的检测.结果:7月龄雄性转...; 董建一武艳霞李慧玲汤莉王爱国王靖宇; 关键词：肝肿瘤病理机制 RAS癌基因; 文献传递

两种等位基因特异性扩增方法在结肠癌K-ras癌基因点突变检测中的应用比较(英文): 2012年; 针对传统电泳检测方法存在操作复杂、费时等缺点,提出一种用于检测K-ras癌基因点突变的实时荧光等位基因特异性扩增(Allele specific amplification,ASA)方法。该法采用突变型引物对结肠癌基因组中的K-ras基因进行等位基因特异性扩增,只有突变型样品能被顺利扩增出双链DNA产物,该产物能与双链DNA染料SYBR GreenⅠ结合,产生荧光信号从而被检测到。通过对荧光域值和溶解曲线分析来区分不同的基因突变类型。该法可以检测到野生型DNA中含量为1/1 000的突变型DNA,整个检测时间小于1 h。我们用该法检测31例结肠癌样品中K-ras基因密码子12发生的点突变,其中有15例检出为阳性。此外,还采用等位基因特异性扩增结合电泳分析对样品进行了检测,并对两种方法进行了比较。结果显示:实时荧光等位基因特异性扩增方法具有操作简便、快速、检测成本低等优点,为临床诊断基因突变引起的疾病提供了一种可行的手段。; 朱德斌张岚; 关键词：SYBR 结肠癌点突变

广西非小细胞肺癌组织K-ras癌基因mRNA表达的研究: 2011年; 目的探讨广西非小细胞肺癌(NSCLC)组织K-ras癌基因mRNA表达及其与肺癌各临床病理特征的关系。方法应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测86例广西的NSCLC患者癌组织(肺癌组)和31例癌旁组织(肺组织组)中K-ras癌基因mRNA表达。结果肺癌组K-ras癌基因mRNA表达率为80.2%(69/86),显著高于肺组织组的51.6%(16/31),差异有统计学意义(P<0.01);K-ras癌基因mRNA表达与年龄、性别、民族、吸烟史、病理类型、肿瘤细胞分化程度、TNM分期及淋巴结状态等均无统计学相关(P>0.05)。结论 K-ras癌基因的过度表达参与了NSCLC的发生,但与广西NSCLC的发展及预后无关。; 钟炜祥陈铭伍冼磊; 关键词：K-RAS 癌基因反转录-聚合酶链反应

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