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潘敏慧
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- 所属机构:西南大学
- 所在地区:重庆市
- 研究方向:农业科学
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
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- 2009年
- 本文从家蚕病蚕中分离到一种家蚕类浓核病毒(BmDNV-Like),对它的组织病理学研究表明:该病毒首先寄生家蚕中肠柱状细胞,继而引起其细胞核的膨大和破裂;组织原位杂交结果表明该病毒既能在家蚕中肠柱状细胞中增殖,也能在中肠的杯形细胞中增殖,甚至在感染后期能在家蚕幼虫的大部分组织细胞中感染和增殖。
- 潘敏慧肖仕全李娜鲁成向仲怀
- 关键词：浓核病毒家蚕组织病理学特征
- 柞蚕核多角体病毒lef-12基因序列及转录分析(英文)
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- 为加强柞蚕核多角体病毒(Anthraea pernyinucleopolyhedrovirus,ApNPV)的分子基础研究,对ApNPVlef-12基因进行序列及转录分析。ApNPVlef-12基因长516个核苷酸,编码171个氨基酸,预测分子质量19.0 kD。Ap-NPVlef-12基因5′端非编码区含有杆状病毒晚期基因启动子模序(ATAAG),但终止密码子(TAG)下游没有典型的多聚腺苷酸信号(AATAAA)。PSI-BLAST表明18种鳞翅目NPV编码ApNPV LEF-12同源蛋白;ApNPV LEF-12蛋白与类群ⅠNPVLEF-12的氨基酸一致性高于其与类群ⅡNPVLEF-12的氨基酸一致性。ApNPVLEF-12蛋白及与其关系较近的同源蛋白的有效密码子数较低。转录分析表明,ApNPVlef-12基因属晚期表达基因。
- 石生林潘敏慧王强鲁成
- 关键词：柞蚕核多角体病毒转录分析
- 家蚕原代细胞有丝分裂观察被引量：3
- 2004年
- 在28℃,pH值6.4-6.8的条件下,用Grace培养基辅以20%的标准胎牛血清培养半消化法接种的家蚕晚期胚。原代培养细胞能够长期存活,观察到了家蚕原代培养过程中分化细胞的有丝分裂过程,发现了原代细胞分裂过程中赤道板的异常和染色体分离的异常现象;培养6个月和10个月的原代细胞分裂百分比分别为0.02±0.01和0.35±0.10,原代细胞异常的有丝分裂细胞百分比逐渐减少,分别为8.0±1.6和3.2±1.0。
- 丁裕斌潘敏慧肖仕全陈敏洪锡钧鲁成
- 关键词：家蚕原代细胞有丝分裂体外培养
- 家蚕热休克蛋白HSP90相互作用蛋白的筛选与鉴定
- 2022年
- 【目的】HSP90 是热休克蛋白家族的成员之一,在昆虫的抗逆性和变态发育中发挥重要作用,已有研究表明 HSP90能够促进家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)的增殖,但作用机制尚不清楚。本研究通过鉴定 BmHSP90 的相互作用蛋白,为其促进 BmNPV 增殖的作用机制解析提供参考。【方法】构建连接在 pIZ/V5-His 的BmHSP90;真核过表达载体,在家蚕 BmN-SWU1 细胞中转染 48 h 后,感染 BmNPV 继续培养 48 h 后收集蛋白,保留总蛋白后将这些蛋白均分两管,进行免疫共沉淀,分别用抗 HA 抗体和 IgG 抗体钓取相互作用蛋白,对蛋白胶进行硝酸银染色后,获取差异条带并做质谱分析,将质谱结果与信息分析结合进行候选互作蛋白筛选,并克隆鉴定互作蛋白。通过免疫荧光验证 HSP90 与互作蛋白的共定位情况,并进一步采用免疫共沉淀试验确定其是否存在相互作用关系。【结果】硝酸银染色结果显示,试验组与对照组在 90、70 和 60 kD 附近处存在差异条带,并验证了 90 kD 处的差异条带为诱饵蛋白;将另外两条差异带进行质谱分析,共鉴定到 7 个候选相互作用蛋白,通过分析选择其中两个候选蛋白作后续研究,分别为Tubulin-specific chaperone E(Tbce)和 Golgin subfamily A member 5(Golga5)。BmTbce 的最大开放阅读框长度为 1 728bp,编码 576 个氨基酸,BmGolga5 的最大开放阅读框长度为 1 854 bp,编码 618 个氨基酸;同源比对和系统进化树显示 BmTbce的微管结合结构域(cytoskeleton-associated protein-glycine-rich,CAP-Gly)位于 N 端且在不同物种之间保守性较高,BmGolga5 的跨膜区(transmembrane domain,TMD)位于 C 端,也较为保守;荧光共定位显示 BmHSP90 与 BmTbce 和 BmGolga5在细胞质中发生共定位,并进一步通过免疫共沉淀证明 BmHSP90;和 BmTbce;、BmHSP90;和 BmGolga5;具有相互作用关系。【结论】经过筛选与鉴定,在 BmNPV 感染家蚕细胞的过程中,与家�
- 龙艳碧吴云飞张倩陈鹏潘敏慧
- 关键词：家蚕家蚕核型多角体病毒HSP90
- 家蚕核型多角体病毒增殖关键基因的鉴定被引量：1
- 2017年
- 选择家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)基因组中可能与病毒增殖相关的8个基因dbp、lef-2、lef-3、lef-7、lef-10、lef-11、p143和vp1054作为候选基因,利用家蚕内源性microRNA骨架构建候选基因的干扰载体,并采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术对上述候选基因进行干扰试验,筛选病毒增殖的关键基因,以期为开辟家蚕抗Bm NPV研究新路径打下基础。对8个候选基因的RNA干扰试验显示:干扰lef-7对Bm NPV的增殖没有明显影响;对lef-2和lef-11表达的干扰效率最高,达到90%以上,其中干扰lef-11后病毒对细胞的感染率仅为9.16%,远远低于对其他基因干扰后的感染率。依据试验结果初步确认8个病毒增殖相关基因中,lef-11对病毒增殖的影响最大。
- 董非凡何倩董战旗胡志刚蒋亚明潘敏慧
- 关键词：家蚕核型多角体病毒增殖关键基因RNA干扰抗病毒
- BmCyclin B和BmCyclin B3是家蚕细胞周期进程所必需的被引量：5
- 2013年
- B型细胞周期蛋白(Cyclin B)是细胞G2期向M期转化的重要调节因子.家蚕基因组数据分析表明,家蚕有2个Cyclin B基因,即BmCyclin B和BmCyclin B3.利用家蚕EST数据,成功克隆了家蚕CyclinB3基因(EU074796),该基因全长1665bp,ORF长1536bp,由6个内含子和7个外显子构成,编码511个氨基酸,含有1个蛋白破坏盒和2个周期蛋白盒,预测分子量57.8kD.家蚕卵巢细胞系BmN-SWU1的BmCyclinB和BmCyclinB3基因RNA干涉结果表明,BmCyclin B和BmCyclin B3是家蚕细胞完成细胞周期进程所必需的,二者干涉后均能导致细胞周期阻滞于G2/M期,抑制细胞的增殖.
- 潘敏慧洪开丽陈向云潘春陈雪梅匡秀秀鲁成
- 关键词：家蚕细胞周期细胞增殖
- 家蚕病原微孢子虫SCM_8的分离及其致病性研究被引量：4
- 2000年
- 从四川省种茧育家蚕分离出的一种小型微孢子虫SCM8,仅感染寄生家蚕的中肠上皮组织 ;孢子卵圆形 ,大小2 .82± 0 .2 0× 2 .1 9± 0 .1 3μm。孢子致病力较弱 ,感染中量 (IC50 )为 1 .2 9× 1 0 5粒 /ml;病程 1 2天以上。病理组织学和胚种传染的研究表明 。
- 潘敏慧万永继祝仁英
- 关键词：家蚕微孢子虫
- 家蚕核型多角体病毒(BmNPV)lef-11基因在病毒感染宿主细胞中的表达特征被引量：1
- 2016年
- 杆状病毒晚期表达因子(late expression factor,LEF)是参与病毒基因组DNA复制和病毒基因转录调控的一个重要家族,该家族成员LEF-11为13 k D的小分子蛋白质。通过比对目前已经测序的63种杆状病毒基因组序列,发现LEF-11的编码基因lef-11在除宿主为双翅目昆虫的Cuni NPV外的所有杆状病毒基因组中都存在,暗示lef-11基因可能在包括家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)在内的杆状病毒复制过程中行使重要功能。通过RT-PCR检测和Western blotting分析lef-11基因及其编码蛋白质在Bm NPV侵染的家蚕卵巢培养细胞Bm N中的转录与表达时相,其转录本从侵染后6h开始持续表达,蛋白质从侵染后12 h开始持续表达。当利用DNA聚合酶特异抑制剂阿非迪霉素(aphidicolin)阻断Bm NPV病毒基因组DNA复制之后检测LEF-11的表达受到抑制,暗示LEF-11的表达起始于病毒DNA复制之后。以上结果表明:BmNPV lef-11基因在杆状病毒中非常保守,是一个晚期表达基因,可能不直接参与病毒的起始复制,而是参与病毒的大规模复制过程。
- 董战旗胡楠陈婷婷董非凡蒋亚明鲁成潘敏慧
- 关键词：家蚕核型多角体病毒DNA复制
- 家蚕Bmcyclin A基因的克隆和表达谱分析
- 周期蛋白A（CyclinA）能分别与两种重要的周期蛋白依赖性激酶cdk2、cdk1作用,推动细胞周期的正常进行。本研究基于家蚕基因组数据克隆了cyclinA基因在家蚕中的同源物BmcyclinA（NCBI登录号:FJ61...
- 张春冬潘敏慧谈娟冯业勋鲁成
- 关键词：家蚕CYCLINA系统进化基因表达
- 文献传递
- 家蚕基因组框架图
- 夏庆友周泽扬鲁成向仲怀代方银程道军李斌赵萍潘国庆潘敏慧沈以红李春峰蓝希钳袁联伟
- 该项目为中国家蚕功能基因组研究。完成第一个家蚕基因框架图，也是第一个鳞翅目昆虫基因组框架图；构建了国内外最大的家蚕EST数据库；发现了1874个丝腺特异基因，发现了与生成生物钢的蜘蛛有107个共有基因；发现了87个神经肽...
- 关键词：
- 关键词：家蚕基因组框架图
