张菊
作品数： 111被引量：325H指数：9
  • 所属机构:第四军医大学药学系药物基因组学教研室
  • 所在地区:陕西省 西安市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:国家自然科学基金

相关作者

阎小君
作品数：137被引量：548H指数：12
供职机构：第四军医大学药学系全军基因诊断技术应用研究所
研究主题：聚合酶链反应 幽门螺杆菌 人乳头瘤病毒 荧光偏振 宫颈癌
高艳娥
作品数：70被引量：236H指数：8
供职机构：西安交通大学医学院第二附属医院
研究主题：宫颈癌 荧光偏振 宫颈癌组织 人乳头瘤病毒 尖锐湿疣
赵锦荣
作品数：59被引量：222H指数：8
供职机构：第四军医大学
研究主题：聚合酶链反应 荧光偏振 DNA 基因表达 乙型肝炎病毒
闫小君
作品数：91被引量：360H指数：12
供职机构：第四军医大学药学系药物基因组学教研室
研究主题：聚合酶链反应 基因表达 PCR 差异表达基因 荧光偏振
郭晏海
作品数：73被引量：235H指数：9
供职机构：第四军医大学药学系
研究主题：聚合酶链反应 DNA 乙型肝炎病毒 HBV_DNA 乙型肝炎
作品列表
应用荧光偏振技术检测HBV DNA被引量：3
2004年
目的　建立一种简便、灵敏、特异的DNA检测方法。方法　用荧光偏振技术检测 10 2例乙型肝炎患者血清中的HBVDNA ,并与多聚酶链反应 酶联免疫吸附试验 (PCR ELISA)方法作比较。结果　该方法可以检测出 1× 10 1拷贝的HBVDNA模板 ,CV为 6 .4 4 % ,对 10 2例乙型肝炎患者的血清进行检测 ,HBsAg( + )、HBeAg( + )、抗HBc( + )血清HBVDNA阳性率为 10 0 % ( 4 0 / 4 0 ) ;HBsAg( + )、抗HBe( + )、抗HBc( + )血清HBVDNA阳性率为 81.8% ( 2 7/ 33) ;HBsAg( + )、抗HBc( + )血清HBVDNA阳性率为 72 .4 % ( 2 1/ 2 9) ,其余为阴性。 30例非乙型肝炎患者血清中HBVDNA的检测结果均为阴性。结论　该方法简单、灵敏、特异 。
郭晏海吕贯庭白玉杰赵锦荣张菊韩峰产闫小君
关键词：乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸血清学检查
宫颈癌组织表皮生长因子受体对TKI敏感性相关的基因突变研究被引量：5
2012年
目的研究宫颈癌组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因中是否存在与EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)药物敏感性相关的18、19及21外显子突变,为本地区宫颈癌的靶向治疗提供依据。方法收集70例宫颈癌患者的新鲜癌组织标本,提取DNA,以特异性引物PCR扩增EGFR基因外显子18、19及21,进行DNA测序并分析序列相似性。结果 70例宫颈癌组织提取质量良好的DNA中,均未检测到EGFR基因18、19及21外显子突变。结论宫颈癌组织EGFR基因外显子18、19及21突变罕见。
薛琴琴张菊俞青苗金雯杨梅刘宁侠高艳娥
关键词：宫颈癌表皮生长因子受体多聚酶链式反应DNA测序
肺癌中EGFR外显子突变丰度的荧光偏振检测
2015年
目的:建立一种基于荧光偏振技术快速、特异的检测体系,并将该体系用于检测肺癌标本中EGFR基因19、21外显子的突变丰度,以便更加全面、准确地预测靶向药物疗效以及指导临床靶向药物选择。方法:应用Primer premier 5.0软件在EGFR基因19、21号外显子突变区域上下游处设计19、21外显子各自的通用PCR引物,并设计覆盖各自突变区域的两对荧光标记探针(突变型和野生型)。以包含野生型(19、21)和突变型(19、21)的质粒分别为4种阳性标准品,空载体为阴性标准品,分别作为模板进行PCR扩增反应,将扩增结果应用荧光偏振仪进行检测,以建立突变丰度测量体系。最后,对51例肺腺癌标本进行检测,并计算出各自的突变丰度。结果:荧光偏振检测EGFR基因19、21外显子突变结果与直接测序法结果无统计学差异,且最低检测浓度为40拷贝/μl,最低检测含量可达10%。本法可提供更全面的瘤内基因变异丰度分析,有利于指导临床用药。结论:荧光偏振检测EGFR基因19、21外显子突变结果不仅灵敏度与特异性高,还能提供全面的瘤内异质性分析指标,可为临床肺癌个体化治疗效果提供预测依据。
杨阳姜英浩陈亚楠强少盈郑智坤张菊刘文超
关键词：肺癌表皮生长因子受体
全自动(定量PCR)基因扩增诊断仪配套定量试剂的研制被引量：12
2001年
目的　研制一种能用于仪器操作的灵敏、快速、特异的定量试剂 .方法　使用一个生物素标记的上游引物 ,对HBVDNA及其竞争模板DNA进行不对称PCR扩增 ,使扩增出的单链带有生物素 ,并可结合在固定有链亲合素的微孔板的表面 .用标有辣根过氧化物酶的待测模板探针和竞争模板探针分别与两个微孔中固定的相应单链PCR产物杂交 ,而后加底物显色 ,测定吸光度进行分级定量分析 .结果　该定量方法可以检测 10拷贝数的模板 ,而且对简便处理的标本适应性强 ;以分级定量的形式定量时 ,具有良好的重复性 .结论　该试剂适用于仪器操作 。
郭晏海阎小君孟宪润崔大祥侯瑜韩锋产冯永强张菊赵锦荣
关键词：定量PCR探针杂交
L1抗原冲击的树突细胞治疗尖锐湿疣的初步研究被引量：2
2002年
目的 :观察体外表达的HPV6 ,11L1抗原冲击的自身树突细胞免疫治疗 ,对人乳头状瘤病毒感染致反复复发生殖器尖锐湿疣的免疫及病理学作用及疗效。方法 :2 0 9例反复复发 3次以上 ,顽固型尖锐湿疣患者 ,按知情同意原则 ,分别予常规或L1抗原冲击的树突细胞免疫治疗。全体患者随访 6个月 ,疗程前后取疣体 ,分别行PCR ,HE及免疫组化染色观察。结果 :L1抗原冲击的自身树突细胞免疫治疗后 ,患者细胞免疫功能较常规疗法有显著改善 ,病灶处组织中大量免疫细胞浸润 ,空泡细胞减少 ,病毒感染清除或减轻。结论 :L1抗原冲击的树突细胞免疫对于改善反复复发、顽固型人乳头状瘤病毒感染的生殖器尖锐湿疣患者的细胞免疫功能 ,及病变局部免疫状态有显著作用。
张菊阎小君尹国武何玉宪段杰苏成芝
关键词：树突细胞尖锐湿疣乳头状瘤病毒
人乳头瘤病毒16型L1 N-端主要抗原基因的原核表达
2005年
目的　获得序列正确的人乳头瘤病毒 (HPV) 16型L1N -端主要抗原基因 ,构建其原核表达载体 ,并进行诱导表达。方法　采用PCR法从宫颈癌组织中获得HPV16型L1N 端主要基因重组表达质粒 ,转化E .coliDH5α ,4 2℃诱导表达 ,Westernblot分析表达产物。结果　获得了序列正确的人乳头瘤病毒HPV16型L1N -端主要基因 ,相对分子质量约为 5 10 0 0。表达蛋白能与乳头瘤病毒抗体及乳头瘤病毒感染患者的血清发生抗原抗体反应。结论　已成功构建HPV16型L1N -端主要基因表达载体 ,并获得有效表达。
陈蕤穆士杰张菊阎小君
关键词：HPV16抗原基因人乳头瘤病毒16型DH5Α原核表达载体基因表达载体
宫颈癌患者HPV16型E6蛋白的表达纯化及血清抗体检测被引量：8
2006年
背景与目的:人乳头瘤病毒16型(humanpapillomavirustype16,HPV16)是宫颈癌组织中最常见的高危HPV,其相应蛋白的血清抗体与宫颈癌的发生发展相关。本研究构建HPV16E6重组表达载体并表达纯化获得HPV16E6重组蛋白,用于检测不同人群血清相应抗体,初步探讨本地区HPV16E6血清抗体反应与宫颈癌的相关性。方法:将HPV16E6基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E6表达重组体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用异丙基硫代-$-D-半乳糖苷(isopropylthio-$-D-galactoside,IPTG)诱导表达。表达的包涵体变性后经Ni柱纯化,复性并经活性鉴定后,用以包被ELISA板,检测正常女性、慢性宫颈炎患者和宫颈癌患者血清抗体。同时采用荧光偏振方法分型检测宫颈癌组织HPVDNA。结果:pRSET-16E6表达重组体的工程菌经IPTG诱导后可表达Mr24×103的HPV16E6组氨酸融合蛋白,表达量占菌体蛋白的22.3%。表达形式为包涵体,重组蛋白纯度达95%以上,其活性经ELISA法证实。80例正常女性、46例慢性宫颈炎和32例宫颈癌患者血清抗体阳性率分别为5.0%、6.5%和31.2%,宫颈癌患者HPV16E6血清抗体阳性率显著高于正常人(P<0.002)及慢性宫颈炎患者(P<0.01),而正常人与慢性宫颈炎患者间的差异无显著性。32例宫颈癌患者癌组织中,HPVDNA阳性率90.6%,HPV16DNA阳性率46.9%。HPV16DNA阳性组血清HPV16E6抗体阳性率(46.7%)高于阴性组(17.6%),但两组间的差异无显著性(P>0.05)。结论:在pRSET-A/BL21中表达获得的HPV16E6融合蛋白,可用于宫颈癌相关HPV的血清学研究;宫颈癌患者HPV16E6血清抗体阳性率明显高于正常人和慢性宫颈炎患者。
高艳娥郭金珠张菊宋天保阎小君
关键词：人乳头瘤病毒16型E6蛋白血清抗体宫颈肿瘤
HBV DNA C区BCP双突变PCR-FP检测方法的建立及其临床应用
2003年
目的 :建立简便的 HBV DNA序列中 BCP双突变的检测方法。方法 :采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测。首先对 HBVC区基因进行 PCR扩增 ,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交 ,使探针的 3’端可以在 DNA聚合酶的催化下 ,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的 d NTP,然后检测该3’端带有荧光素的探针 ,根据检测到的荧光素种类和偏振光的强度可以判定待测点是何种核苷酸。结果 :该方法可以检测出 HBV基因序列中 BCP双突变核苷酸类型 ,可以检测 1个拷贝的模板 ,并且可以从 BCP野生型株 DNA序列中检出 5 % BCP双突变 DNA序列 ,对 76例 HBV DNA阳性患者进行检测 ,结果 HBV BCP基因双突变率为 5 3.9( 4 1 /76)。结论 :该技术可以对血清中 HBV DNA C区 BCP双突变。
郭晏海吕贯庭白玉洁赵锦荣张菊闫小君
关键词：乙型肝炎HBVDNA
TDI-FP法检测宫颈癌组织中HPV16E7基因647位点突变被引量：1
2006年
目的人乳头瘤病毒(HPV)16型E6E7基因的变异可能和HPV的致癌能力直接相关,E7647位点的突变可能增强了致癌能力.本课题通过应用TDI-FP法检测宫颈癌HPV16阳性标本中E7647位点突变情况,可以对确定高危人群、恶性病变的预警筛查、辅助诊断、疗效判定及预后提供临床价值,并可以为宫颈癌及其癌前病变的基因治疗、疫苗治疗和预防提供分子水平方面的重要依据.方法TDI-FP技术是一种在聚合酶链反应的基础上具备液相探针杂交和碱基掺入三重特异反应的检测新方法,具有极高的特异性和敏感性.本课题实验在TDI-FP方法的基础上检测宫颈癌患者HPV16E7基因647位点突变情况,以进一步明确这些位点突变与宫颈癌变的相关性.结果应用TDI-FP法检测宫颈癌组织中HPV16型E7647位突变率为32.35%,HPV16型E7647位突变与对照组相比具有统计学差异(χ2=12.437,P<0.001).结论本实验初步提示宫颈癌患者中HPV16型E7647位突变可能是HPV致癌的一个高危因素.
樊江波曲群吴静张菊高艳娥张格林
关键词：基因分型宫颈肿瘤荧光偏振
高危人乳头瘤病毒基因变异与宫颈癌的关系
2004年
近年来 ,高危人乳头瘤病毒 (HPV)基因变异和宫颈癌进展的关系日益受到重视。已经发现了一些可能对诊断和治疗有参考意义的基因变异。本文对高危HPV的重要变异与表达调控、细胞转化及永生化。
陈中灿张菊白玉杰阎小君
关键词：人乳头瘤病毒基因变异宫颈癌
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