欧阳康
作品数： 129被引量：217H指数：7
  • 所属机构:广西大学动物科学技术学院
  • 所在地区:广西 南宁市
  • 研究方向:农业科学
  • 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金

相关作者

黄伟坚
作品数：309被引量：1,013H指数：15
供职机构：广西大学动物科学技术学院
研究主题：猪圆环病毒2型 星状病毒 原核表达 病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒
陈樱
作品数：176被引量：326H指数：9
供职机构：广西大学动物科学技术学院
研究主题：病例报告 病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪流行性腹泻病毒 原核表达
韦祖樟
作品数：186被引量：374H指数：9
供职机构：广西大学动物科学技术学院
研究主题：猪繁殖与呼吸综合征病毒 病毒 PRRSV 原核表达 猪流行性腹泻病毒
覃一峰
作品数：29被引量：47H指数：4
供职机构：广西大学动物科学技术学院
研究主题：蓝耳病 感染病例 病原检测 猪瘟病毒 育肥猪
吴健敏
作品数：217被引量：769H指数：13
供职机构：广西兽医研究所
研究主题：猪内源性反转录病毒 猪瘟病毒 试剂盒 猪瘟 广西巴马小型猪
作品列表
广西地区腹泻仔猪呼肠孤病毒的感染及序列分析被引量：1
2024年
为了解广西地区腹泻仔猪中哺乳动物呼肠孤病毒(MRV)的感染情况及主要流行毒株,应用套式RT-PCR对广西部分地区2020-2022年173份腹泻猪样品进行检测,并选取部分阳性样品进行S 1基因扩增与分析,进一步了解广西地区MRV主要流行毒株的基因特征。结果显示,2020-2022年173份样品MR总阳性率为18%(32/173),各年阳性率分别为29.6%、9.9%和33%。获得1株S 1基因全长序列,序列比对结果发现该序列与其他MRV S 1基因序列的核苷酸同源性为43.4%~97.9%,氨基酸同源性为26.1%~97.8%;遗传进化分析显示,获得的毒株序列为MRV3型,与其他猪源MRV3型毒株ZJ2013、IND/MZ/3013789/reo在同一分支上,同属于谱系Ⅳ。结果表明广西地区猪群存在一定程度的MRV感染,为进一步防控广西腹泻猪群中MRV的流行提供科学依据。
隆美金陆颖李茂宁易春华廖梦娟余科辰覃一峰陈樱陈樱黄伟坚韦祖樟
猪肠病毒G型实时定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：2
2020年
为建立一种能够准确、快速地鉴别猪肠病毒G型的诊断方法,本研究参考猪肠病毒G型的3D基因序列设计1对特异性引物,扩增片段预计大小约为104 bp,将3D基因片段克隆到pMD18-T载体上的阳性重组质粒作为标准品,建立猪肠病毒G型的实时定量PCR检测方法,并应用到临床样品的检测。研究结果显示,该方法设计的引物具有高度的特异性;标准曲线的Cq值与质粒标准品模板在2.92×10^8copies/μL^2.92×10^2copies/μL范围内,呈良好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-4.023;组内与组间重复性试验显示变异系数很小,在0.26%~1.57%之间。该方法的最低检测限量可达2.92×10 copies/μL。使用本方法对2017-2019年广西部分地区的猪场临床腹泻粪便样品进行检测,猪肠病毒G型阳性检出率为18.42%,说明广西部分地区的猪场存在猪肠病毒G型的感染。本研究成功建立了猪肠病毒G型实时定量PCR检测方法,可用于猪肠病毒G型感染的临床检测。
杨春杰米雪刘雪婷蹇慧刘芳陈樱韦祖樟黄伟坚欧阳康
关键词：实时定量PCR
塞内卡病毒广西分离株的初步分离与鉴定被引量：3
2022年
为了确诊一例疑似SVA感染的临床病例,本试验将从广西地区某猪场母猪和肥育猪鼻及蹄部采集的出现典型水泡性病变的猪水泡液进行无菌处理后接种PK-15细胞,连续传代培养,通过细胞病变、RT-PCR扩增、基因序列测定、TCID_(50)和间接免疫荧光等方法对分离得到的病毒进行鉴定。结果显示:该病毒株在PK-15细胞上生长良好,可见明显细胞病变;接种PK-15细胞进行TCID_(50)测定,病毒滴度达到10^(-6.75)/mL;间接免疫荧光试验结果显示,接种第4代细胞培养物的BHK-21细胞出现特异的绿色荧光;扩增和测定了VP1基因序列后进行同源性及遗传进化分析,发现该毒株与Senecavirus病毒属中的病毒成员同源性最高,与之前2017年报道的广东分离株SVA-CH-GDYS02-2017和SVA-CH-GDLZ01-2017位于较近的进化分支内。以上结果表明,已成功从样品中分离到了SVA,且该毒株可以在PK-15和BHK-21细胞上进行增殖。本研究成功分离到一株SVA,为后续塞内卡病毒的诊断和疫苗研制提供试验材料。
牛晨霞王豪农作荣全东群曾悦任同伟王玉旭王景隆刘畅陈樱欧阳康黄伟坚韦祖樟
不同代次广西巴马小型猪内源性反转录病毒3′UTR克隆及结构和调控元件分析
目的猪内源性反转录病毒(Porcine Endogenous Retrovirus,PERV)在体外能够感染人的多种细胞引起了人们对异种移植病原安全性的广泛关注,PERV的3’端非编码区(3’UTR)具有许多与病毒复制相...
欧阳康邓世杰吴健敏陈凤莲张启模郭亚芬
关键词：猪内源性反转录病毒广西巴马小型猪RACE
文献传递
广西巴马小型猪PERV-A亚型毒株全基因cDNA克隆的构建与分析被引量：1
2015年
参照GenBank已发表的猪内源性逆转录病毒(PERV-A亚型)全基因序列,用软件DNAman分析PERV-A亚型全基因序列单一酶切位点,设计3对特异性引物及1对套式引物,分4段从仅携带PERV-A亚型毒株的广西巴马小型猪外周血淋巴细胞中扩增巴马小型猪PERV(PERV-A-BM)全基因组序列,并将4个覆盖全基因组序列的重叠基因片段,通过pMD 18-T中间载体依次连接并克隆到pBluescript II SK(-)载体上,构建全基因cDNA克隆。同时通过定点突变和化学合成的方法成功恢复PERV-A-BM全基因cDNA克隆中存在的15个保守突变碱基,将突变后的PERV-A-BM全长序列上传GenBank,登录号为HM159246。为便于鉴定将PERV-A-BM全基因cDNA克隆第8408位碱基由A沉默突变为C,引入新的单一酶切位点Aat II,获得cDNA克隆的突变株。酶切鉴定及测序结果表明,PERV-A-BM前病毒基因组全长8 774bp,分为两端的5′、3′非编码区(UTR)及中间的开放阅读框(ORF),编码gag、pol和env基因。与不同亚型标准株gag和pol基因的氨基酸序列具有较高同源性,而env基因的同源性则较低。本研究为下一步拯救出该病毒提供了可直接使用的全长cDNA真核表达质粒。
钟雅婷黄红梅钟华欧阳康马玲廖艳娟白安斌吴健敏
关键词：巴马小型猪
广西地区犬和猫肠道病毒的病原学调查研究
2024年
为了解引起广西地区犬和猫腹泻等肠道病原的分布情况,并探究犬和猫新型肠道病毒感染的临床特征,为临床中及早诊治和防控肠道疾病提供参考依据,本试验采集宠物犬和猫粪便拭子样品394份(犬样品172份,猫样品222份),并通过聚合酶链式反应(PCR)或反转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)筛查犬细小病毒(CPV)、猫瘟病毒(FPV)和查帕马细小病毒(ChPV)等13种主要犬和猫肠道病毒,并分析肠道病毒阳性率与年龄、性别、免疫状况和临床症状之间的相关性。结果显示,犬粪便样品中总阳性样品数为49份,占比28.49%;其中CPV的阳性率最高,达到15.12%,临床症状为典型的肠道症状;其次,犬粪便样品中还检测到犬冠状病毒(CCoV,4.65%)、猫杯状病毒(FCV,4.07%)、嵴病毒(KoV,4.07%)、博卡病毒(BoV,3.49%)、犬瘟热病毒(CDV,2.91%)和布法病毒(BuV,0.58%);其中11份粪便样品混合感染了2种及以上种类的肠道病毒,CPV感染占10份。幼龄犬对CCoV和FCV比较易感;各肠道病毒阳性率与性别无相关性,部分肠道病毒阳性率与免疫状况和临床症状有相关性。猫粪便样品中总阳性样品数为32份,占比14.41%;FPV的阳性率最高,达到8.11%;其次,猫粪便样品中还检测到新型肠道病毒,包括FCV(4.05%)、ChPV(1.35%)、BoV(1.35%)、BuV(0.45%)和猫冠状病毒(FCoV,0.45%);其中混合感染样品仅4份,而FCV感染占3份。FPV和BoV阳性率与猫的年龄和免疫状况存在相关性,各肠道病毒阳性率与猫的性别和临床症状无明显相关性。值得关注的是,犬和猫粪便中均可检测到A型流感病毒(IAV),阳性率分别为2.91%和0.45%。综上表明,CPV和FPV仍是引起犬和猫肠道疾病的主要病原,同时也是混合感染的重要组成;多种新型肠道病毒的阳性率虽然不高,但仍是引起肠道或肠外疾病中不可忽视的病原;IAV的检出再次强调了犬和猫作为“中间宿主”的重要作用。本试验结果不仅为犬和猫肠道传染�
黎波宏黄馨何庆元方友桥满婷婷陈建材周华波韦祖樟欧阳康欧阳康陈樱
关键词：肠道病毒流行病学调查
不同代次广西巴马小型猪内源性反转录病毒3'UTR克隆及结构和调控元件分析
@@猪内源性反转录病毒(Porcine Endogenous Retrovirus，PERV)在体外能够感染人的多种细胞引起了人们对异种移植病原安全性的广泛关注，PERV的3'端非编码区(3'UTR)具有许多与病毒复制相...
欧阳康邓世杰吴健敏陈凤莲张启模郭亚芬
关键词：猪内源性反转录病毒广西巴马小型猪RACE
文献传递
一种用于起重机吊臂的拼装式桁架元件及装配方法
本发明公开了一种用于起重机吊臂的拼装式桁架元件及其装配方法，包括主弦杆拼装片，所述主弦杆拼装片成对相对平行设置；腹杆拼装片，所述腹杆拼装片成对相对平行设置；倾叠斜撑片，所述倾叠斜撑片具有两对，两对倾叠斜撑片分别位于腹杆拼...
晏班夫蔡湘李少勇欧阳康覃宇
广西猫杯状病毒全基因组序列测定及其遗传进化分析被引量：2
2022年
为了掌握广西猫杯状病毒(FCV)的流行情况及其变异规律。本研究于2018年3月至2019年9月采集疑似FCV鼻拭子59份,其中阳性检出率49.2%(29/59)。将阳性病料接种CRFK细胞,成功分离获得一株FCV毒株,命名为NN01-19。为深入了解其遗传进化规律和分子特征,本研究通过RT-PCR方法扩增获得该毒株的全基因组序列,并对其ORF2基因进行了遗传进化和序列分析。结果表明,NN01-19毒株基因组全长7709 bp,其中ORF2基因全长2010 bp。遗传进化分析发现该毒株与广西早期分离株GX01-13同属基因I群,但核苷酸和氨基酸同源性仅为77.9%和86.5%。其中,超变区(E区)抗原线性表位新增T448A、T450G、G451Q和T454S四个突变位点。重要的是,该区域还发生了V430T的突变,符合VS-FCV致病性氨基酸突变特点。本研究为深入了解FCV的流行特点及其变异规律提供了参考依据,同时也为今后防控FCV提供了重要的理论基础。
丁仰保何剑桥刘林林余良政崔柏杨周华波韦祖樟欧阳康黄伟坚陈樱
关键词：全基因组ORF2基因遗传进化分析
水牛匈爱病毒结构蛋白VP1的截短表达及多克隆抗体的制备
2023年
为了制备水牛匈爱病毒(BufHuV)结构蛋白VP1截短基因的多克隆抗体,将病毒的VP1截短基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET-32a-BufHuV-VP1,重组质粒转化至BL21感受态细胞(DE3)后诱导表达,VP1截短蛋白的分子质量约为31.5 ku,主要以包涵体的形式表达。以纯化好的重组蛋白免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体,通过Western-blot与IFA鉴定其特异性。结果显示,制备的小鼠多克隆抗体能与纯化的VP1重组截短蛋白和感染BufHuV的细胞表达的VP1特异性结合,表明多克隆抗体具有良好的反应原性和特异性。水牛匈爱病毒VP1截短重组蛋白及其多克隆抗体的成功制备为研究BufHuV致病机制、VP1蛋白功能以及血清学检测方法的建立提供了材料基础。
邹延林张广欣罗宇航朱鑫玥刘黄豪莫筱可谢江王小玲陈樱欧阳康韦祖樟覃一峰潘艳黄伟坚
关键词：结构蛋白原核表达多克隆抗体
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