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潘丽
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- 所属机构:中国农业科学院兰州兽医研究所
- 所在地区:甘肃省 兰州市
- 研究方向:农业科学
- 发文基金:国家高技术研究发展计划
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- 唐华刘新生方玉珍蒋守田潘丽吕建亮张中旺周鹏张永光王永录
- 关键词:合成肽CPG寡聚脱氧核苷酸CD4+T淋巴细胞
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- 2020年
- 利用大肠杆菌表达猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区,建立猪瘟病毒间接ELISA抗体检测方法。依据大肠杆菌密码子偏好性对猪瘟病毒E2基因主要抗原区的稀有密码子进行同义替换,克隆至pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)构建重组表达菌,并将纯化重组蛋白作为抗原建立猪瘟病毒间接ELISA抗体检测的方法。对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot检测,结果显示获得分子量为30 ku的重组蛋白,占细菌总蛋白的41%,与猪瘟抗体特异性反应强;间接ELISA重复性检测显示批内变异系数为3.72%,批间变异系数为4.75%;特异性检测显示,与猪圆环病毒、蓝耳病病毒、伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪流行性腹泻病毒和口蹄疫病毒的抗体阳性血清无交叉反应,并且对566份样品的临床检测结果显示与爱德仕猪瘟阻断ELISA试剂盒的阳性符合率为90.80%,阴性符合率为93.29%,总符合率为91.52%。结果表明密码子优化后E2重组蛋白实现高效表达,建立的猪瘟病毒间接ELISA抗体检测方法成本低、准确率高,可进一步开发应用。
- 陈九潘丽马中元崔燕
- 关键词:猪瘟病毒E2蛋白密码子优化间接ELISA
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- 潘丽张永光张中旺吕建亮王永录方玉珍周鹏刘新生
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- 2010年
- 王刚潘丽张永光
- 关键词:口蹄疫病毒核酸疫苗免疫保护传染病安全性血清型