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作品数： 27被引量：42H指数：4

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鹅源新城疫病毒F和HN基因的表达及功能鉴定: 2006年; 鹅源新城疫病毒的F和HN基因经RT-PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pCR2．1载体,再分别亚克隆到真核表达载体pCI-neo上,构建了F基因的表达载体(pCI-F)和HN基因的表达载体(pCI-HN)。间接免疫荧光(IFA)鉴定结果表明:F和HN基因均能在细胞中得到较好的表达;将pCI-F和pCI-HN共转染CEF和COS细胞,转染的细胞中能形成明显的合胞体。而用pCI-F单独进行转染时,不能产生合胞体,说明F蛋白要发挥其融合作用必须要有HN蛋白的参与,同时也进一步证明F和HN蛋白与病毒的融合特性密切相关。; 胡顺林张艳梅孙庆吴艳涛刘玉良刘秀梵; 关键词：新城疫病毒 F蛋白

简化cDNA末端快速扩增技术测定基因Ⅲ、Ⅵb和Ⅶd型新城疫病毒基因组末端序列及分析被引量：2: 2009年; 【目的】简化cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNAends,RACE)流程,测定基因Ⅲ、Ⅵb和Ⅶd型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基因组两侧末端序列,并对NDV的leader和trailer进行分析。【方法】利用T4 RNA连接酶将特定寡聚核苷酸片段的连接于病毒基因组RNA和cDNA,再利用RT-PCR或PCR方法对病毒基因组的末端进行快速的扩增。【结果】建立一套操作简单、低成本、可重复性高的RACE方法,测定了三种基因型5株NDV3’末端leader和5’末端trailer序列比对分析。【结论】本实验测定的鹅源VII型毒株JS/7/05/Ch基因组的15,184 nt由一个T变为了C,5’端trailer与3’端leader的连续互补序列由8 nt变为12 nt,而其它4株基因Ⅲ型和VI型NDV均未发现该突变。通过RNA的二级结构分析,NDV基因组和反向基因组RNA的3’末端形成一个发卡结构。JS/7/05/Ch等3株NDV U→C(T→C)的突变位于发卡环上,不影响二级结构的形成,发卡环的RNA序列突变为3’-UCUC-5’,与基因组3’端发卡环的3’-UCUUA-5’相似,推测可能影响了基因组RNA的复制速度。; 仇旭升孙庆王伟伟董丽吴双胡顺林吴艳涛刘秀梵; 关键词：新城疫病毒

两株基因Ⅲ型强毒新城疫的全基因组测序及其与Ⅰ系苗的亲缘性分析被引量：16: 2009年; 【目的】研究基因III型新城疫(Newcastle disease,ND)强毒分离株JS/7/05/Ch和JS/9/05/Go与中等毒力疫苗株Mukteswar的亲缘性关系,分析三株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的全基因差异。【方法】采用RT-PCR方法获得两株NDV分离株的全基因组核苷酸序列,与GenBank中公布的Mukteswar序列比对分析。【结果】强毒分离株与中等毒力疫苗株Mukteswar全基因组核苷酸同源性均为99.7%;病毒6个阅读框核苷酸序列与Mukteswar同源性为99.6%～99.9%;预测的8种病毒编码蛋白同源性在98.8%～99.8%。然而,测定MDT,ICPI和IVPI发现JS/7/05/Ch和JS/9/05/Go毒力明显强于Mukteswar,其中JS/7/05/Ch株的IVPI达到了2.18。【结论】综合3株NDV的遗传分析结果和已有的流行病学资料可以推断分离株JS/7/05/Ch和JS/9/05/Go是由疫苗株Mukteswar自然进化而来的返强毒株。因此,必须停止使用中等毒力疫苗以免造成更大的危害。; 仇旭升孙庆姚春峰董丽吴艳涛胡顺林刘秀梵; 关键词：新城疫病毒全基因组

粪样中产气荚膜梭菌的分离及cpe^+菌株的鉴定被引量：1: 2011年; 目的分离粪样中的产气荚膜梭菌基因分型。方法按照国标方法从粪样中分离产气荚膜梭菌,应用PCR进行毒素基因型分型和鉴定。结果从1 411份粪样中分离到557株产气荚膜梭菌,其中553个为A型,其余为C型。1株人源分离株携带cpe基因,该cpe的ORF与标准菌株在核苷酸和氨基酸水平上的同源性分别为99.9%和100%,而且该基因位于染色体上。结论初步摸清了我国粪样中产气荚膜梭菌的动态分布,并在人粪样品中发现了cpe+产气荚膜梭菌,为分子流行病学研究提供了重要理论依据。; 徐晓静孙庆赵李祥; 关键词：产气荚膜梭菌 PCR 基因分型

猪可食性组织中氟尼辛残留量的HPLC测定方法研究: [目的]通过HPLC检测方法研究了氟尼辛肌肉注射后在猪组织中的残留消除规律[方法]猪组织样品经1％ TCA-乙腈溶液提取,正己烷脱脂,PCX阳离子交换柱净化,C18色谱柱进行分离,以0.1％甲酸溶液和0.2％甲酸-乙腈溶...; 孙庆张奥博施祖灏高玉时卜仕金贺文庆冯全利常婷婷; 关键词：HPLC

新城疫病毒HN蛋白抗原变异株的鉴定: 新城疫病毒的基因组共编码6种结构蛋白,其中血凝素神经氨酸酶蛋白(HN)是NDV囊膜上最大的纤突糖蛋白,在免疫反应中扮演着重要的角色。HN蛋白有跨膜区、茎部和球状区三个部分组成,其中球状区分布了所有与单克隆抗体所识别的抗原...; 胡顺林孙庆马怀良吴艳涛刘秀梵; 文献传递

磺胺氯吡嗪钠、二甲氧苄啶溶液在鸡的药动学研究: 36只健康肉鸡,随机分为3组,分别进行磺胺氯吡嗪钠、二甲氧苄啶溶液单剂量静注(60mg/kg.bw)和内服(60mg/kg.bw)以及磺胺氯吡嗪钠可溶性粉单剂量内服(60mg/kg.bw)后的药物动力学研究。利用高效液相...; 郝增坤沈巍卜仕金孙晨明苑瑞瑞常婷婷孙庆张奥博周伟伟李勇军; 关键词：肉鸡药物动力学高效液相色谱法; 文献传递

鸡组织中二甲氧苄啶和甲氧苄啶残留量的HPLC检测方法研究: [目的]抗菌增效剂英能增强磺胺药利多种抗生素的疗效,已被广泛用于畜禽细菌性疾病和球虫病的防治.本研究旨在建立一种鸡组织中二甲氧苄啶、甲氧苄啶残留量的检测方法,以便将来为这类药物的在动物性可食用组织中的残留监控提供技术支持...; 苑瑞瑞常婷婷张奥博孙庆卜仕金; 文献传递

用反向遗传技术致弱基因VIId型鹅源新城疫病毒ZJI株: 将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),pNDV/ZJI与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI...; 胡顺林张艳梅孙庆刘玉良吴艳涛刘秀梵; 关键词：新城疫病毒反向遗传技术; 文献传递

纳川珠利的小鼠骨髓细胞微核试验分析: 【目的】通过检测纳川珠利对体细胞的致突变性,对其遗传危害性做出初步评价,进而预测其致癌的可能性。【方法】50只清洁级昆明小鼠随机分为五组。其中受试药纳川珠利设三个剂量组,经口灌服染毒剂量分别为1/2 LD(384 mg ...; 孙庆陈秀云张奥博常婷婷卜仕金; 文献传递