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巩明霞
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- 所属机构:中国动物卫生与流行病学中心
- 所在地区:山东省 青岛市
- 研究方向:农业科学
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- 为快速特异检测羊痘病毒属病毒(CaPVs),比较了牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、山羊痘病毒(GTPV)和绵羊痘病毒(SSPV)的全基因组序列,选择保守区域设计特异性引物和探针,建立了一种CaPVs通用的Cycleave PCR检测方法。特异性结果显示,该方法在40 min内即可检出CaPVs,与口蹄疫病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒均无交叉反应;灵敏性结果显示,最低检出限为4.98 copies/μL;重复性结果显示,批内和批间重复变异系数均小于2%。对131份临床样本进行检测发现,该方法与世界动物卫生组织(WOAH)推荐的常规PCR方法相比,敏感性为100%,特异性为91.55%,总符合率为95.42%。以上结果表明,本研究建立的Cycleave PCR检测方法特异、敏感、重复性好,且操作简便,适用于CaPVs的高通量、快速检测。
- 南文龙巩明霞陆游李金明王永杰哈达吴发兴李林王英丽陈义平吴晓东
- 三类常用消毒剂对非洲猪瘟病毒灭活效果的评价被引量：4
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- 为评价戊二醛类、酚类、含氯类常用消毒剂对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果,参考OIE参考实验室相关操作流程,基于畜禽栏舍、运载工具、器具消毒的目的,根据说明书标明的浓度范围选择低、中、高3个工作浓度,在选定工作浓度下将消毒剂与ASFV分别在4℃和20℃条件下作用30 min,10倍连续稀释后接种猪肺泡巨噬细胞,同时加入猪红细胞,培养观察红细胞吸附现象。结果显示,这三类消毒剂对ASFV均具有灭活作用,但效果因消毒剂种类和工作浓度不同有所差异。相同工作浓度的同一消毒剂产品,在4℃和20℃这两种条件下的灭活效果基本一致。戊二醛类和酚类消毒剂,在说明书推荐的工作浓度下均可有效灭活ASFV;含氯类消毒剂需在其说明书标明浓度范围的较高工作浓度时才可有效灭活ASFV。本研究评价了三类常用消毒剂对ASFV的灭活效果,可为生猪养殖、运输调运、屠宰加工、检验检疫等工作中消毒剂的选择和使用提供参考。
- 南文龙巩明霞邹艳丽刘珊陆游吴晓东陈义平
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- 非洲猪瘟疫苗安全性评价部分关键指标研究现状与思考
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- 非洲猪瘟疫苗研发是业界公认的世界级难题。近年来,随着现代生物技术的不断发展,非洲猪瘟疫苗尤其是弱毒活疫苗的实验室研究,再次掀起新一轮热潮并取得积极进展。但是针对候选疫苗的安全性评价指标,尤其是在接种试验、怀孕母畜安全性试验、疫苗水平传播试验和毒种毒力返强试验等方面,尚没有统一的参考标准,这在一定程度上给当前的非洲猪瘟疫苗客观评价工作带来不便。本文对国内外发表文献中涉及的非洲猪瘟疫苗安全性评价部分关键指标,如疫苗接种后临床表现、水平传播能力、毒力返强能力、对怀孕母猪安全性等的研究情况进行了梳理总结,客观概述了相关研究进展以及取得的成果与存在的问题,以期为国内相关研究人员提供参考。
- 徐天刚郑辉郑辉于小静左媛媛王筱真巩明霞魏荣李金明魏荣
- 关键词：非洲猪瘟疫苗安全性评价
- 四类常用消毒剂对非洲猪瘟病毒灭活效果的评价被引量：6
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- 为评价含碘、季铵盐、过硫酸氢钾、二氧化氯这四类常用消毒剂对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果,参考OIE参考实验室相关操作流程,基于畜禽栏舍、运载工具、器具消毒及皮肤黏膜消毒目的,根据说明书标明的浓度范围选择不同工作浓度,与ASFV分别在4℃和20℃条件下作用30分钟,10倍连续稀释后接种猪肺泡巨噬细胞,同时加入猪红细胞,培养观察红细胞吸附现象。结果显示,本试验四类消毒剂对ASFV均有灭活作用,但灭活效果因消毒剂的种类和工作浓度不同有所差异。相同工作浓度的同一消毒剂产品,在4℃和20℃这两种条件下的灭活效果基本一致。季铵盐类和二氧化氯类消毒剂,在说明书推荐的工作浓度下,均有效灭活ASFV;多数含碘类、过硫酸氢钾类消毒剂,需在其说明书标明浓度范围的较高工作浓度时,才可有效杀灭ASFV。本研究为非洲猪瘟防控工作中消毒剂的选择和使用提供参考。
- 南文龙巩明霞邹艳丽刘珊陆游吴晓东陈义平
- 关键词：非洲猪瘟消毒剂灭活病毒
- 中国山羊痘弱毒疫苗AV41株基因组分子标记的比较分析被引量：2
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- 为鉴别我国山羊痘病毒(GTPV)弱毒疫苗AV41株与牛结节性皮肤病病毒(LSDV)野毒株,运用生物信息学方法将AV41株基因组全序列与GenBank中已发表的LSDV、GTPV和绵羊痘病毒(SPPV)基因组进行比较,筛选AV41株基因组分子标记。采用我国不同厂家来源的AV41株疫苗测序验证分子标记相关序列,并与我国LSDV野毒株相应位置序列比较。结果显示,通过基因组比较分析共筛选获得分子标记19个,经测序确认其中7个为AV41株基因组独特分子标记,包括DNA ligase基因2433A2434、Kelch-like protein基因1831A1832、GTPV_gp020基因G203A、GTPV_gp021基因C681T、DNA-binding viron core protein基因C47T、RNA polymerase subunit基因T64C和Myristylated protein基因C746A,而我国LSDV野毒株相应位置序列未见上述变化。本研究揭示了AV41株基因组独特分子标记分布情况,可用于我国牛结节性皮肤病疫情防控中与LSDV野毒株的分子鉴别。
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- 为评价戊二醛、酚、含碘类等常用消毒剂消毒后对非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测结果的影响,基于畜禽栏舍、运载工具、器具消毒及皮肤黏膜消毒目的,按消毒剂说明书推荐选择不同工作浓度,分别与不同滴度的非洲猪瘟病毒培养物于20℃条件下作用30 min后,采用荧光定量PCR方法检测作用后产物。结果显示,与对应的阳性对照组相比,含氯类(二氯异氰尿酸钠)、过硫酸氢钾类、二氧化氯类消毒剂,消毒后对荧光定量PCR检测结果影响最显著,检测Ct值显著上升或检测不到;戊二醛类、含碘类(主要成分聚维酮碘)消毒剂,核酸降解能力相对较弱,检测Ct值稍有上升;酚类、季铵盐类、含碘类(主要成分碘、磷酸、硫酸)类消毒剂,检测Ct值基本无变化。本研究评价了7类常用消毒剂消毒对非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测结果的影响,可为防控实践中科学、客观评价分析消毒效果提供技术参考。
- 南文龙巩明霞陆游李林王清华吴晓东陈义平
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- 一种牛种布氏菌快速检测方法
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