国家科技支撑计划(2013BAK11B02)
- 作品数：19 被引量：44H指数：3
- 相关作者：韩凌霞徐平张艺宝李淼张晓娜更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所南京农业大学中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 两种玻璃化胚胎冷冻方法对不同品系小鼠胚胎冷冻效果比较被引量：2
- 2013年
- 目的探讨EFS和DAP两种玻璃化冷冻方法对不同品系小鼠胚胎冷冻的效果。方法 6个品系小鼠(KM、ICR、BALB/c、C57BL/6J、OB/OB、LAP/rtTA0F59)的2-cell胚胎分别用EFS和DAP两种玻璃化冷冻方法进行冷冻和复苏,比较两种冷冻方法的胚胎复苏率和着床率。结果 6个品系小鼠冷冻胚胎EFS方法的平均复苏率为69.97%(47.9%～83.6%),DAP方法的平均复苏率47.23%(26.3%～76.7%),EFS方法明显优于DAP方法。其中KM、ICR和BALB/c小鼠EFS方法的冷冻复苏率显著高于DAP方法(P<0.01);冻融胚胎移植后EFS方法的平均着床率27.23%(1.75%～45.0%),DAP方法的平均着床率31.43%(7.0%～46.3%)。除KM、ICR小鼠外,其他4个品系小鼠的着床率DAP方法高于EFS方法。结论 KM和ICR远交群小鼠胚胎适合用EFS方法冷冻保存;C57BL/6J、OB/OB、LAP/rtTA0F59三个品系小鼠DAP方法优于EFS方法,但差异不大;BALB/c小鼠两种玻璃化冷冻方法的冻融胚胎着床率均较低,需进一步研究。
- 王俊风李淼张艺宝郁丽丽魏勤刘丽均施美莲徐平
- 关键词：胚胎玻璃化冷冻复苏率着床率小鼠
- 三种不同冷冻保护剂对小鼠附睾冷冻效果的比较被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨三种不同冷冻保护剂对C57BL/6J小鼠附睾冷冻的效果。方法性成熟并交配过的6～8周龄C57BL/6J雄鼠附睾，分别用3种不同冷冻保护剂二甲基亚砜（DMSO）、丙二醇（PROH）、R18S3进行玻璃化冷冻、复苏和精子采集，观察比较三个实验组的复苏精子形态、存活率以及生殖能力。结果三组冷冻复苏分离后的精子形态完整，具有镰刀头状结构；荧光染色后PROH组精子存活率为（88.17±3.43）％，明显高于DMSO组：（61.17±10.65）％和R18S3组（16.83±6.49）％（ P＜0.05）；经辅助体外受精后均具有受精能力。获得的胚胎移植后可得到正常子代小鼠（DMSO∶PROH∶R18S3＝13∶8∶17）。结论3种冷冻保护剂均适用于C57BL/6J小鼠附睾冷冻，但PROH冷冻效果较好。
- 李淼郁丽丽张艺宝强苏静刘丽均徐平
- 关键词：冷冻保护剂冷冻效果
- 关于禽类实验动物感染实验中的安乐术的分析与思考被引量：3
- 2015年
- 实验动物病原学感染实验在兽医科学和生物制品研究等方面发挥越来越大的作用。我们对从2009年1月1日至2014年4月正式发表在美国国家生物技术信息中心(NCBI)的以禽类进行感染试验的科研报告进行了文献汇总,重点关注动物福利,尤其是安乐死方面。通过对247项研究报告的调查,虽然几乎所有报告都声称通过其所在单位的动物实验和管理福利委员会的审核,但同类感染实验中采用的临终终点的判定和安乐术不尽相同,麻醉途径和剂量也缺乏标准。文章对目前国际上报道的安乐术的特点也做了比较。
- 韩凌霞王兴童陈洪岩
- B19和B21单倍型鸡NK细胞受体B-NK19和B-NK21的多克隆抗体制备及鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的利用大肠杆菌系统表达对多种禽病存在敏感性差异的B19和B21单倍型鸡NK细胞抑制性受体B-NK基因,并制备其多克隆抗体。方法分别提取B19和B21鸡外周血淋巴细胞总RNA,采用反转录PCR法扩增B-NK基因(分别命名为B-NK19和B-NK21),克隆至pET-30a原核表达载体中,经酶切和PCR鉴定构建重组质粒。转入到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析外源蛋白的表达。将含有与组氨酸(His)标签融合表达的外源蛋白胶条切下,多点皮下免疫新西兰兔,分别制备B-NK19和B-NK21特异性多克隆抗体。利用Western blot法鉴定其组织相容性复合体(MHC)单倍型特异性。结果成功构建了原核表达重组质粒pET-B-NK19和pET-B-NK21,利用IPTG在37℃诱导4 h后目的蛋白获得表达,免疫5次后收获兔多克隆抗体,Western blot表明B-NK19和B-NK21蛋白存在免疫学交叉反应和部分特异性。结论对多种禽病具有敏感性差异的MHC单倍体型B19和B21鸡的NK细胞抑制性受体B-NK蛋白存在抗原反应交叉性,其多克隆抗体具有部分特异性。
- 杨超张晓娜许峰铭文辉强廉传江陈洪岩韩凌霞
- 关键词：多克隆抗体
- 斑马鱼常见病原菌及其质量控制的研究进展
- 2014年
- 近年来,随着现代生命科技的不断深入研究,斑马鱼因其独特的生物学特性已成为一种重要的脊椎动物模式生物,是国际上应用最为广泛的实验鱼类。但是目前在我国,对实验用鱼仍缺乏标准化的质量控制及监督管理制度。阐述了斑马鱼的主要细菌性疾病及常见病原菌的质量控制,以期为实验用鱼的标准化制定及应用提供一定的参考。
- 杨迟林金杏胡建华
- 关键词：斑马鱼病原菌
- 实验用Beagle犬的繁殖性能分析被引量：2
- 2015年
- 通过分析某犬类实验动物种子中心2011-2014年200-300只Beagle犬的繁殖记录,并对发情母犬进行手术取卵,以推测排卵数。结果表明,Beagle犬全年均可繁殖,且犬只分娩高峰集中在春夏两季,冬季最少,大部分种母犬胎产子数在5-7只之间;手术取卵结果平均每只母犬可获取4.95枚卵子。
- 胡敏华周治东王晓民龙海斌倪庆纯刘运忠
- 关键词：BEAGLE犬繁殖
- 同品系小鼠卵巢移植方法的建立被引量：3
- 2013年
- 目的建立KM、ICR、C57BL/6J、BALB/C四个品系新鲜卵巢异体同位移植的方法。方法上述四个品系出生10 d、20 d、4周的仔鼠作为供体,取出整个卵巢,将卵巢原位移植到同品系4周龄受体雌鼠,术后置于屏障系统内精心饲养,5～8周后,与同品系成年雄鼠交配,观察移植受体是否有正常的繁殖功能。结果同品系不同时间段的新鲜卵巢,移植到同品系受体中,移植卵巢在受体体内可以恢复正常功能,受体可以正常交配,产生正常的仔鼠。结论同品系不同日龄的异体同位卵巢移植方法可行。
- 郁丽丽刘丽均王俊风魏勤李淼张艺宝施美莲廖侃徐平
- 关键词：小鼠卵巢移植同位移植
- 移植部位对小鼠睾丸移植效果的影响被引量：1
- 2014年
- 目的比较不同的移植部位对睾丸移植效果的影响,以探索建立疾病模型小鼠安全保存的新方法。方法按移植部位的不同分为3组:背部皮下组,睾丸白膜内组和肾包膜下组。移植后处死受体鼠回收移植物。测试和分析受体精囊的重量,移植物存活率,回收物增重的倍数和生殖细胞的分化情况。结果不同实验组移植睾丸的生殖细胞分化差异显著。睾丸白膜内组的分化情况最好与假移植对照组相似;背部皮下移植组睾丸的分化率为29.2%;肾包膜下组未见分化。结论睾丸白膜内移植最利于精子的发生;背部皮下移植是睾丸移植的次优选择;肾包膜下睾丸移植不适合用于小鼠雄性生殖器官的安全保存。
- 张艺宝李淼郁丽丽强苏静刘丽均徐平芮荣
- 关键词：小鼠睾丸移植
- 鸭不同MHC单倍型对禽流感重组疫苗免疫效果的影响被引量：6
- 2014年
- 目的不同品系的鸭对禽流感(AI)疫苗诱导的效价有差异,分析这种差异是否与主要组织相容性复合体(MHC)有关。方法用表达H5亚型禽流感HA基因重组鸭瘟活载体疫苗免疫抗原提呈相关转运体TAP基因等位基因型不同的4种SPF鸭,比较其血清HI动态变化。结果免疫后连续观察的9周中,B3群SPF鸭HI抗体效价始终显著高于另外3个群。结论鸭的不同MHC单倍型可能与AI疫苗的不同免疫效力相关。
- 赵丽丽杨超张晓娜廉传江文辉强柳金雄陈洪岩陈化兰韩凌霞
- 关键词：禽流感疫苗主要组织相容性复合体HI效价
- 三种冷冻保护剂对新生小鼠睾丸组织冷冻效果的比较被引量：1
- 2013年
- 目的探讨三种不同冷冻保护剂对新生C57BL/6J小鼠睾丸冷冻的效果。方法 5日龄C57BL/6J雄鼠睾丸组织,分别用3种不同冷冻保护剂(二甲基亚砜、丙二醇、EFS20/40)进行玻璃化冷冻。复苏冷冻后的睾丸组织,每组一部分进行组织学分析,另一部分进行组织移植,移植后检测关键基因表达水平以及卵胞质内单精注射,并设相应对照组。结果 3个实验组睾丸组织形态改变与对照组相比均具有显著性差异(P<0.01),其中EFS组分值最低即改变最小;原位移植8周后组织块生长发育,存活率分别为DMSO组16.7%、PROH组13.3%、EFS组23.3%,存在成熟精子;睾丸组织特异性基因pgk-2和TESK1正常表达;卵胞质内单精注射表明移植后睾丸内精子均具有受精能力,胚胎移植后可得到正常子代小鼠(DMSO∶PROH∶EFS=5∶2∶8)。结论 3种冷冻保护剂均能良好保存睾丸组织结构和功能。其中,EFS方法保存的睾丸组织形态改变最小、功能完善更适于睾丸组织的冷冻。
- 李淼郁丽丽张艺宝强苏静刘丽均徐平
- 关键词：小鼠睾丸冷冻保护剂冷冻效果
