天津市卫生局科技基金(09KZ104)
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
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- 不同浓度人脐带间充质干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究被引量：6
- 2010年
- [目的]比较不同浓度人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)移植修复大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的疗效。[方法]利用NYU Impactor model-Ⅱ打击器制作大鼠T10 SCI模型,分组为:80只Wistar大鼠随机分为DMEM实验对照组(A组)、1×104HUCMSCs移植组(B组)、1×105HUCMSCs移植组(C组)和1×106HUCMSCs移植组(D组),每组20只。对各组实验动物SCI后肢体功能恢复情况进行行为学评分(BBB评分),并以HE染色和免疫组化染色及生物素葡聚糖胺(BDA)顺行示踪皮质脊髓束(corticospinal tract,CST)染色观察SCI处轴突再生情况。[结果]与实验对照组相比,HUCMSCs移植能促进SCI后轴突再生,改善大鼠后肢功能恢复。D组优于其他组,各组间BBB评分差异有统计学意义(P<0.05);NF-200免疫荧光染色累积光密度各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]HUCMSCs在体内可向神经元及神经胶质细胞分化,促进SCI后轴突再生和肢体功能恢复。
- 赵鹏冯世庆王颖魏志坚焦新旭
- 关键词：脊髓损伤细胞移植人脐带间充质干细胞
- HIV-1反式转录激活因子介导的脂质体在脊髓损伤大鼠体内分布的靶向性被引量：2
- 2010年
- 目的：探讨HIV-1反式转录激活因子（trans-activator transcription,TAT）介导的脂质体作为药物载体在脊髓损伤大鼠体内分布的靶向性。方法：构建HIV-1 TAT介导的纳米脂质体,外接异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）作为标记。取8周龄雌性Wistar大鼠60只,随机分为2组,每组30只,每组分为未损伤、伤后24h及伤后1周3个时间点,每个时间点各10只。每组20只采用Impactor ModelⅡ打击建立T10脊髓损伤模型。Ⅰ组每个时间点尾静脉注射外接TAT的脂质体（9μg/ml,500μl）,Ⅱ组尾静脉注射不接TAT的脂质体（9μg/ml,500μl）。注射后1h取出T7~L1节段脊髓组织,冰冻组织切片暗视野下观察脂质体在脊髓组织中的分布情况。结果：Ⅰ组未损伤、伤后24h及伤后1周均在脊髓内部观察到FITC标记的脂质体,但未损伤脊髓中脂质体未进入神经元,伤后24h及伤后1周脂质体在损伤中心神经元中聚集,伤后24h距离损伤中心近端1.5cm处和远端1.5cm处神经元中脂质体的FITC荧光平均光密度（AOD）明显小于损伤中心（P〈0.05）。Ⅱ组在未损伤脊髓及伤后1周脊髓损伤中心区未观察到脂质体,伤后24h在脊髓损伤中心区观察到脂质体在神经元中聚集。两组伤后24h脊髓损伤中心AOD比较无统计学差异（P〉0.05）。结论：外接TAT的脂质体可以穿过大鼠正常的血脊髓屏障进入脊髓内部,并且具有进入受损脊髓组织神经元的靶向特异性。
- 魏志坚冯世庆张大鹏王颖赵鹏焦新旭常津王汉杰
- 关键词：脊髓损伤脂质体血脊髓屏障靶向
- 人雪旺细胞促进人脐带间充质干细胞向神经方向分化的研究被引量：5
- 2012年
- 目的观察人雪旺细胞（hSCs）对人脐带间充质干细胞（hUC—MSCs）在脊髓损伤（SCI）体内存活、分化的影响，通过分子生物学技术检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、髓磷脂碱性蛋白（MBP）与高分子量神经丝蛋白（NF—H）的表达，描述其变化的时间特征。方法分离、培养及纯化hUC。MSCs和hSCs。取8周龄雌性Wistar大鼠60只，以ImpactorModel-Ⅱ型打击器制作脊髓胸10（TIO）损伤模型。大鼠随机均分为4组：DMEM对照组（A）、hSCs移植组（B）、hUC—MSCs移植组（C）、hUC—MSCs与hSCs联合移植组（D），各组分别于移植后1、2、3、4周取材。结果D组可见MBP与核因子（NF）-H染色阳性细胞，其他各组为阴性。A组3种神经标志物在蛋白与mRNA水平的表达量随时间延长均逐渐增高，且GFAP在移植后2周明显增高，MBP与NF-H在移植后3周明显增高[2周与1周GFAP条带灰度比值为1．34，而聚合酶链反应（PCR）所测比值为2．86；3周与1周MBP和NF．H条带灰度比值分别为3．43、4．12，而PCR所测比值分别为6．47、6．78]。与对照组相应时间点比较。移植组MBP、NF．H的表达量较高而GFAP的表达量较低，其中D组的MBP、NF—H的表达量最高（D组与A组MBP3周条带灰度比值为2．11，而NF—H3周条带比值为2．11），差异有统计学意义（P〈0．05），但D组GFAP各时间点的表达量差异（各周所测条带灰度比值依次为1．00：1．12：1．13：1．14）无统计学意义（P〉O．05）。结论hSCs可促进hUC—MSCs向神经元与少突胶质细胞方向分化并增强其对胶质瘢痕的抑制作用。
- 陈有冯世庆吴秋丽周先虎刘举宁广智冯洪永周恒星
- 关键词：脊髓损伤细胞移植神经分化
- 大鼠脊髓损伤后不同时期移植人脐带间充质干细胞的修复效果观察被引量：12
- 2010年
- 目的:观察大鼠脊髓损伤后不同时期局部移植人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchy-mal stem cells,hUCMSCs)修复脊髓损伤的效果,探讨hUCMSCs局部移植治疗脊髓损伤(spianl cord injury,SCI)的最佳移植时机。方法:雌性Wistar大鼠80只,随机均分为A、B、C、D组,以Impactor Model-Ⅱ打击器制备脊髓胸10(T10)损伤模型。A组为单纯损伤组,B组损伤后3d移植hUCMSCs,C组损伤后1w移植hUCM-SCs,D组损伤后3w移植hUCMSCs,分别于造模后24h、移植前1d及移植后8w(A组与D组损伤后相应时间点相同)每周对各组大鼠后肢功能进行行为学评分(BBB评分);移植后8周免疫组化染色观察移植细胞的存活、分化和血管再生情况,10周时用生物素葡聚糖胺(biotin dextran amine,BDA)示踪皮质脊髓束(corticospinaltract,CST)观察轴突的再生情况。结果:SCI后24h各组大鼠BBB评分无显著性差异(P>0.05),D组在移植前和移植后1周与A组相应时间点的BBB评分无显著性差异(P>0.05),移植后2w起各时间点评分均明显高于A组相应时间点,差异有统计学意义(P<0.05);A组在SCI后9w时到达平台期,与实验结束时相比差异无统计学意义(P>0.05)。移植各组移植后BBB评分逐渐上升,后一个时间点与同组前一时间点比较差异有显著性意义(P<0.05),移植后6w开始C组明显高于B、D组(P<0.05)。免疫组化染色A组脊髓中未见Brdu阳性细胞,损伤区血管形态欠完整,未见新生血管;损伤周围星形胶质细胞大量增生,细胞肥大、突起增多、排列不规则,形成胶质瘢痕;未见BDA标记的皮质脊髓束通过损伤区。B、C、D组脊髓中均有Brdu阳性标记的细胞存活,C、D组中细胞数量明显多于B组,但三组中均未见到移植细胞向神经元或神经胶质样细胞分化;B、D组损伤周围的星形胶质细胞较A组减少,但排列仍欠规则;C组损伤周围星形胶质细胞形态趋于正常,排列规则,且有大量星形胶质细胞通过损伤区,血管再生�
- 王颖冯世庆赵鹏焦新旭魏志坚韩明远
- 关键词：脊髓损伤脐带间充质干细胞细胞移植
- 人脐带间充质干细胞联合布洛芬修复大鼠脊髓损伤被引量：3
- 2013年
- 目的观察人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）联合布洛芬移植治疗大鼠脊髓损伤的效果，探讨布洛芬对hUCMSCs存活和分化的影响。方法用Impactor ModelⅡ打击器制作80例大鼠脊髓胸10（T10）损伤模型，随机分为DMEM实验对照组（A组）、布洛芬注射组（B组）、单纯移植hUCMSCs组（C组）、联合治疗组（D组），对损伤后2个月内的实验大鼠进行行为学评分（BBB评分），评估后肢运动功能恢复，结合人细胞核抗体（MAB1281）和神经丝蛋白（NF-200）免疫组织化学染色分析细胞存活和分化。结果行为学评分D组（14．90±2．45）分，明显高于B组（10．56±2．32）分、C组（11．90±1．89）分，差异有统计学意义（P〈0．05）。术后8周观察到D组的hUCMSCs存活数量多于其他治疗组；NF-200染色面积D组（0．28±0．13）高于B组（0．11±0．04）、C组（0．18±0．06），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论布洛芬可以促进hUCMSCs在损伤部位存活并使其易于向神经样细胞分化，两者联合移植可以明显促进损伤后轴突再生和脊髓功能恢复。
- 范宁建冯世庆刘举崔猛周先虎吴秋丽
- 关键词：脊髓损伤人脐带间充质干细胞布洛芬细胞移植
