国家高技术研究发展计划(2003AA205080)
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 相关作者：王跃嗣姜昱竹李建远孟凡刚范光丽更多>>
- 相关机构：滨州医学院山东大学烟台毓璜顶医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划烟台市科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 造血和神经相关标志物在人胎盘的表达
- 2006年
- 为探讨人胎盘组织在造血中的作用以及研究造血和神经标志物在胎盘中的表达和在胚胎发育中的相关性,用免疫组织化学法对人胎盘组织和体外培养的胎盘组织中的贴壁细胞进行染色,观察其造血因子和神经标志物的表达。结果发现人7月龄胎盘组织血管内血细胞表达多种造血细胞因子,如SCF、VEGF、BMP-4和FGF-1和KDR,血管内皮细胞上也有表达;胎盘组织同时表达造血干细胞标记CD34、CD133和神经细胞标记物Nestin和MAP2等。而足月龄胎盘CD34、CD133、KDR和造血相关因子SCF、VEGF、BMP-4、FGF-1等弱表达,不表达Nes-tin和MAP2。两组胎盘切片都不表达GFAP和MBP。胎盘贴壁细胞(hPDACs)碱性磷酸酶、波形蛋白、CD133、Nestin和MAP2染色呈阳性,CD34、GFAP和MBP阴性表达。人胎盘组织和胎盘贴壁细胞表达多种造血相关因子和神经细胞标志物,提示胎盘具有造血功能,造血形成和神经发生之间可能存在基因表达叠加现象。
- 王跃嗣孟凡刚姜昱竹李建远范光丽
- 关键词：胎盘造血作用神经分化
- 胚胎干细胞的定向心肌分化及其调控机制被引量：1
- 2005年
- 胚胎干细胞是具有分化为各种类型组织细胞潜能的全能干细胞,可在体外大量扩增,细胞因子、激素、诱导剂和细胞内转录因子等可诱导和调控胚胎干细胞进行心肌细胞定向分化,这将使干细胞移植治疗心肌损伤性疾病成为可能。探讨胚胎干细胞向心肌细胞的定向分化及其调控机制,进而可在体内外调控干细胞向心肌细胞的定向分化,这将为临床应用干细胞分化新生心肌细胞以治疗心肌损伤性疾病提供理想的细胞来源和可靠的理论依据。
- 孙丽莉李建远冷希岗
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞分化
- 不同细胞因子对脐血CD_(34)^+细胞扩增的影响被引量：5
- 2008年
- 目的探讨不同细胞因子促进脐血CD34+细胞扩增的效应,为下一步的临床应用奠定基础。方法采用EasySep免疫磁珠阳性选择系统分离脐血中CD34+细胞,在无血清、无基质细胞培养体系中添加不同细胞因子培养2周,分组:A组,SCF+FL+TPOB组,SCF+FL+TPO+IL-3C组,SCF+FL+TPO+G-CSF。结果CD34+细胞数目于培养后7d达到峰值,3组间差异无显著性;B组扩增至14d时细胞总数达(384.40±17.48)倍,显著高于另外2组。扩增7d后的脐血细胞经体外培养可形成造血集落。结论体外扩增脐血CD34+细胞理想的细胞因子组合为SCF+TPO+FL,以7d为宜。
- 姜昱竹王跃嗣胡涛李建远王海燕孙汶生
- 关键词：细胞因子脐血CD34扩增
- 血管内皮生长因子及其受体在胚胎卵黄囊不同发育时期的表达
- 2005年
- 为研究胚胎不同时期VEGF、KDR和CD34在人卵黄囊中的表达情况,了解胚胎造血的发育过程和机理。采用免疫组织化学SP法卵黄囊冰冻切片进行染色,光镜观察。结果发现在第3￣4周的人卵黄囊低表达VEGF和KDR,不表达CD34。4￣6周组强表达VEGF、KDR和CD34。在血岛内阳性细胞大而圆,成簇或分散聚集,有些细胞沿血岛边缘形成血管样结构。6周以后,卵黄囊弱表达VEGF、KDR和CD34。上述结果提示卵黄囊可表达造血和血管生成相关因子,随胚胎发育呈阶段性表达。卵黄囊中出现造血干细胞和血管内皮细胞的分化。
- 王跃嗣姜昱竹李建远王海燕范光丽
- 关键词：血管内皮生长因子受体胚胎发育卵黄囊发育时期免疫组织化学法
- 骨形态发生蛋白4在人胚胎卵黄囊造血过程中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的检测骨形态发生蛋白4（BMP-4）在卵黄囊造血期间的表达及其变化，探讨影响造血细胞早期形成、增殖和分化的调控机制。方法用药物流产受精3-8周胚胎57例，免疫组织化学SP法检测BMP-4、血管内皮生长因子受体2（KDR）、CD133、CD34在卵黄囊中的表达，RT-PCR分析转录因子Ihh、SCL、GATA-1、GATA-2和PU.1的表达。结果在16 d的卵黄囊血岛周边间质细胞BMP-4表达阳性，KDR低表达，CD34、CD133未见表达；21d时，BMP-4、CD34和CD133免疫反应产物均增加，染色增强；30d时，BMP-4、CD34、CD133和KDR表达最强，CD34阳性细胞沿血岛边缘形成血管样结构。45d时，BMP-4、CD34、CD133和KDR阳性细胞增多，中等程度染色；7周后，BMP-4、CD133、KDR、CD34阳性细胞明显减少，染色变弱。RT-PCR结果显示，不同时间的卵黄囊持续表达Ihh、SCL、GATA-1和GATA-2，而PU.1在16d时未见表达，此后有阳性表达。结论卵黄囊造血细胞的发育受BMP-4和转录因子的诱导和调节，卵黄囊造血不仅产生成血管血液干细胞，并能形成造血干细胞，说明卵黄囊不仅具有原始造血能力，而且可能具有长期造血能力。
- 王跃嗣李建远靳韶华
- 关键词：卵黄囊骨形成蛋白4反转录-聚合酶链反应人胚
- 扩增后脐血CD_(34)^+细胞对SCID小鼠重建造血中的影响
- 2009年
- 目的探讨脐血CD34+细胞体外扩增后的体内重建造血功能,为临床脐血移植提供实验依据。方法分离新鲜脐血中的CD34+细胞,培养7d后收集扩增的细胞,自尾静脉注射入经265cGy辐照的6周龄SCID小鼠体内,饲养6周后检测其骨髓中的人源细胞。结果脐血CD34+细胞经体外培养7d,CD34+细胞扩增(9.74±1.52)倍;移植6周后流式细胞仪检测实验组SCID小鼠骨髓中的CD45+细胞百分含量为5.37%～11.31%;RT-PCR分析可同时检测到387bp人β-actin和203bp小鼠β-actin,而对照组只能检测到小鼠β-actin。结论脐血CD34+细胞经体外扩增后可以重建经辐照SCID小鼠的造血功能。
- 姜昱竹李建远王跃嗣王海燕孙汶生
- 关键词：脐血CD34SCID小鼠重建造血
- 人胎盘贴壁细胞定向诱导神经样细胞
- 2009年
- 目的探讨胎盘组织培养贴壁细胞的分离培养以及定向诱导神经细胞分化的生物潜能,从而研究胎盘贴壁细胞与神经发育的相互关系。方法用胰酶消化分离培养人胎盘组织中的贴壁细胞,并应用抗体Nestin、MAP2、MBP、CD133、CD34等进行免疫细胞化学染色,用2-巯基乙醇和反式维甲酸进行体外向神经细胞诱导分化。结果分离培养出胎盘组织贴壁细胞,是一异质性细胞群体。培养的贴壁细胞表达CD133,不表达CD34,同时表达Nestin和MAP2。经定向神经诱导后的人胎盘贴壁细胞出现神经样细胞的形态,强表达Nestin和MAP2,弱表达MBP和GFAP。结论人胎盘贴壁细胞经体外定向诱导可分化为神经样细胞,其具有间充质干细胞(MSC)性质,胎盘组织是MSC的一个重要来源。
- 王跃嗣孟凡刚王延伟李建远
- 关键词：神经细胞间充质干细胞分化
- 人胚胎干细胞体外培养和扩增的研究进展被引量：1
- 2005年
- 体外维持人胚胎干细胞未分化的增殖状态受细胞生长环境和内源性调节因子的控制。本文阐述了目前体外培养和扩增人胚胎干细胞细胞的各种系统,分析了影响细胞增殖和不分化的因素及其信号转导机制,指出了为临床细胞替代治疗疾病提供细胞来源的人胚胎干细胞培养系统的发展趋势。
- 张文彩李建远
- 关键词：胚胎干细胞饲养层分化
- 受体蛋白质酪氨酸激酶和血管内皮生长因子在人胚胎卵黄囊和胎肝中的表达
- 2005年
- 目的研究人胚胎发育不同时期卵黄囊和胎肝内受体酪氨酸激酶(KDR)、血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的分布及表达,为胚胎造血分化提供理论依据。方法取15份不同胎龄的胎儿卵黄囊和胎肝,固定、切片,进行免疫组织化学SP法染色,观察KDR、VEGF和CD34的表达及分布。结果在卵黄囊和胎肝中均有KDR+、VEGF+和CD34+细胞。在中期胎肝组,KDR和VEGF的灰度值分别为103.8±6.1和96.4±6.3,表达强于晚期胎肝组(KDR和VEGF的灰度值分别为90.4±6.0和87.4±6.3)(P<0.05),KDR与VEGF的表达具有一定相关性(P<0.05)。结论KDR和CD34在胎肝和卵黄囊中广泛表达,提示在胎肝和卵黄囊中可能有成血管血液干细胞存在,KDR和VEGF相互作用,可能介导成血管血液干细胞的存活、扩增和分化。
- 王海燕王跃嗣范光丽孟凡刚李建远
- 关键词：胎肝KDR卵黄囊人胚胎受体蛋白受体酪氨酸激酶
- 碱性成纤维细胞生长因子在胚胎卵黄囊造血过程中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的探讨人胚胎发育过程巾碱性成纤维细胞生长因子1（FGF1）对造血细胞形成的影响，研究FGF1、血管内皮生长因子受体（KDR）、CD133、CD34和转录因子Ihh、SCL、GATA—1、GATA-2和Pu、1在卵黄囊中的表达，了解FGF1、造血细胞和转录因子在胚胎造血过程中的作用和关系。方法采用药物流产孕3～12周人胚胎，冰冻切片，免疫组织化学SP染色，并应用分析软件进行分析，同时进行造血相关转录因子RT—PCR扩增分析。结果孕3～12周人胚卵黄囊血岛均由外周的血管内皮细胞和中心的造血细胞组成。在16d的卵黄囊中脏壁中胚层围血岛周边表达FGF1阳性产物，而血岛内少有FGF1表达，低表达KDR，不表达CD34、CD133；21d上述抗体均有表达，灰度值减少，染色增强；30d时在血岛和中胚层发现强染色CD34^＋、CD133^＋和KDR^＋细胞，灰度值分别由156±16、173±18和160±14降低为53±7、52±6和69±8；FGF1呈强阳性表达，灰度值由161±13急降至40±5，达到最低值。有些阳性细胞沿血岛边缘形成血管样结构。45d时中等程度表达CD34、CD133、KDR细胞数量增多，细胞聚集成团分布于血岛中；FGF1阳性细胞也多聚集分布在血岛中，中胚层少有分布，灰度值增加。7周后CD133^＋、KDR^＋、CD34^＋细胞明显减少，灰度值增加，染色变浅，卵黄囊弱表达FGF1，灰度值增加为179±22。RT—PCR结果显示，不同时间的卵黄囊均表达Ihh、SCL、GATA—1和GATA-2，PU.1在16d不表达，此后表达。结论卵黄囊造血细胞的发育受FGF1和转录因子的诱导和调节，提示FGF1介导的信号通路对造血中胚层模式的形成、成血管血液干细胞的扩增以及造血干细胞的动态平衡具有重要意义。FGF通路可能通过调节GATA1等转录因子表达水平和活性来调控卵黄囊造血。
- 王跃嗣李建远靳韶华王海燕
- 关键词：卵黄囊转录因子造血干细胞成纤维细胞生长因子胚胎
