国家科技重大专项(2009ZX08012-002B)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：吕蓉潘良文张舒亚李想李俊毅更多>>
- 相关机构：上海出入境检验检疫局华东理工大学上海市农业技术推广服务中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项上海出入境检验检疫局科研基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 可用于转基因产品检测中的核酸体外等温扩增技术分析被引量：4
- 2010年
- 随着生物技术的快速发展,越来越多的核酸体外扩增技术应用于分子生物学研究领域。根据是否依赖于温度循环,核酸体外扩增技术可分为非等温和等温扩增两大类。核酸体外等温扩增技术由于其有快速、灵敏、不需要特殊仪器等优点,逐渐显示出其广泛应用的潜力。重点介绍了现有的几种核酸体外等温扩增技术的原理、特点及应用,并特别关注这些方法在转基因产品检测中的应用。
- 张建中官小燕张海波杨立桃
- 关键词：环介导等温扩增滚环扩增
- 进口油菜籽中不同转基因品系的检测与分析被引量：6
- 2011年
- 对我国27批进口油菜籽进行了转基因成分检测和转基因油菜品系组成情况分析。利用已知转基因油菜RT73、T45、Oxy235、Topas19/2、MS1、RF1、RF2、MS8和RF3的特异性检测体系,对初检为阳性的转基因油菜籽样品进行扩增,扩增基因包括bar、PAT、GOX和NPTII。结果共检出25批转基因油菜籽,检出率为92.6%。所有批次均检出品系RT73和MS8×RF3,表明二者为目前我国进口的主要转基因油菜籽。约40%的批次检出MS1×RF1和MS1×RF2,有少量批次检出T45、Oxy235和Topas19/2,每批次均为多品系混合样品。研究表明,列入农业转基因生物安全生产证书(我国农业部颁发)名单的7个转基因油菜品系均有进口,其中以RT73和MS8×RF3为主。
- 李想潘良文李俊毅吕蓉张舒亚刘月明高琴
- 水稻谷氨酸脱羧酶基因(OsGAD3)分子进化与表达分析被引量：2
- 2011年
- 利用分子克隆技术从8个水稻品种中克隆到谷氨酸脱羧酶基因OsGAD3,并进行了相关的生物信息学及表达谱分析.结果表明,不同水稻品种OsGAD3的核苷酸序列差异性很小,都在1%以内,在氨基酸序列上都具有保守的结构域,在C末端均具有类似于OsGAD1结合CaM的关键氨基酸位点,但不同于OsGAD2.系统进化树分析表明,不同水稻品种的OsGAD3在进化上可以分为粳稻和籼稻两大类,与水稻常规分类相一致.此外,对不同水稻品种的谷氨酸脱羧酶基因的表达谱分析发现,OsGAD1、OsGAD2、OsGAD3、OsGAD4和OsGAD5在测试的11种水稻叶片中都有表达,但表达特征存在一定的差异性,可能与品种特性相关.
- 许辉廖攀许明黄志伟程祖锌董彦君开国银
- 关键词：Γ-氨基丁酸水稻谷氨酸脱羧酶基因克隆分子进化
- 适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定被引量：3
- 2011年
- 针对目前转基因产品检测标准物质缺乏的难题,构建适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子pEASY-RT73,其包含转基因油菜RT73品系3'端侧翼序列,油菜内标准基因HMG和PEP片段。对其在定性和定量检测中的适用性进行了实验室内部验证,结果表明,标准分子pEASY-RT73高度特异于转基因油菜RT73品系。以标准分子为标准品的普通PCR扩增中,3个目标片段的检测下限(LOD)均为10拷贝。实时荧光PCR检测的LOD均为25拷贝,定量下限(LOQ)均为50拷贝。以标准分子为标准品构建的标准曲线反应效率介于0.96-1.02间,相关系数均大于0.999。分别以PEP和HMG为内标准基因对5个盲样的测试结果显示,测量值与设定值间偏差(Bias)介于-14.13%-14.29%间,SD小于0.20,RSD小于18.0%。因此,标准分子pEASY-RT73可很好地替代植物来源阳性标准品用于转基因油菜RT73及其来源产品品系特异性检测。
- 李俊毅李想褚庆华吕蓉张舒亚潘良文黄新朱水芳
- 关键词：PCR实时荧光PCR
