广东省自然科学基金(06300673)
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 相关作者：袁进陈家祺周世有周辉胡晓琴更多>>
- 相关机构：中山大学南昌大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 角膜内皮细胞改良培养技术的初步探讨被引量：14
- 2008年
- 目的评价角膜后弹力层撕除联合酶消化法分离角膜内皮细胞的效率，分析细胞体外生长的生物学特性。方法将兔角膜带有内皮细胞的后弹力层完整撕下，用胰蛋白酶-EDTA联合酶消化，纯化的角膜内皮细胞进行体外培养。观察细胞形态，用神经元烯醇化酶抗体进行细胞表型鉴定。苏木精-伊红染色以及茜素红-台盼蓝联合染色分析细胞活性，流式细胞仪检测细胞体外生长过程中Anne xiv—PE的表达情况，透射电镜和扫描电镜进行细胞超微结构形态的观察。结果带角膜内皮细胞的后弹力层撕除联合酶消化法可快速获得大量纯化的角膜内皮细胞，快速贴壁生长并增生，体外培养3～4d即融合成单层细胞，且表达神经元烯醇化酶抗体阳性，苏木精-伊红染色及活性染色提示细胞功能良好，Anne xiv—PE抗体表达水平微弱。结论角膜后弹力层撕除联合酶消化法可提高角膜内皮细胞的获取和培养效率，为工程化角膜内皮移植膜的构建提供稳定的种子细胞来源。
- 胡晓琴袁进陈家祺周辉周世有王智崇
- 关键词：角膜内皮细胞细胞培养
- 角膜碱烧伤白细胞介素-1ra基因治疗的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨阳离子聚合物包装IL-1ra重组质粒、角膜原位转染治疗角膜碱烧伤的疗效。设计实验性研究。研究对象角膜碱烧伤大鼠动物模型。方法制作Wistar大鼠角膜碱烧伤模型,随机分为2组,Ⅰ组为阴性对照(12只),结膜下注射生理盐水。Ⅱ组为IL-1ra基因治疗组(18只),以PcDNA3.1质粒作为IL-1ra基因表达载体,阳离子聚合物为转染介质,角膜基质显微注射20μg IL-1ra质粒。碱烧伤后不同时间点(3、7、21天)处死实验动物取下角膜,HE染色分析角膜组织病理变化,比较两组角膜透明性和新生血管生长情况,对角膜内浸润的炎性细胞进行计数。主要指标角膜透明性和新生血管情况,角膜组织病理变化及炎性细胞计数。结果碱烧伤造模后,对照组角膜浸润水肿明显,且随时间延长而加重,角膜基质内大量炎性细胞浸润和粗大新生血管形成。IL-1ra基因治疗组的角膜基质轻、中度水肿,角膜中性粒细胞、淋巴细胞等炎性细胞计数在不同时间点均少于对照组,角膜新生血管管径均较细。结论角膜基因原位转染可使IL-1ra在局部有效表达,抑制碱烧伤引起的角膜免疫炎症反应,为眼碱烧伤的治疗提供了新的选择。
- 袁进周世有王铮顾建军邵应峰黄挺陈家祺
- 关键词：角膜碱烧伤基因治疗
