国家自然科学基金(30370611)
- 作品数：12 被引量：88H指数：5
- 相关作者：白春学王桂芳董春玲陈智鸿肖奎更多>>
- 相关机构：复旦大学吉林大学吉林大学第一医院更多>>
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- 水通道蛋白1基因敲除小鼠的饲养繁殖与基因型鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的繁殖和基因型鉴定水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP-1)基因敲除小鼠。方法将所引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,一旦获得雄性纯合子,将其与雌性杂合子交配,依照孟德尔遗传定律就有可能获得较多的基因敲除纯合子小鼠。结果AQP-1基因敲除杂合子小鼠的饲养和繁殖及鉴定均获得成功,并得到较多的基因敲除纯合子小鼠。结论正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从亲代杂合子小鼠中获得AQP-1基因敲除纯合子小鼠的有效途径。
- 肖奎王桂芳董春玲陈智鸿胡成平白春学
- 关键词：水通道蛋白1基因敲除小鼠
- 水通道蛋白的新的生理功能被引量：3
- 2008年
- 水是生命的必需成分，目前发现，水分子通过细胞膜有两种方式，一种是通过脂质双分子层的弥散作用，另一种是通过细胞膜蛋白质的选择性转运作用，这种转运作用由水通道蛋白（AQP）介导。AQP是一组细胞膜转运蛋白，在人体中已发现共有13种AQP，分别为AQP0～AQP12。随着AQP的分布、功能以及与疾病的关系的研究不断深入，其在生理和病理情况下的作用正逐步被大家认识。现简要综述近年关于AQP的研究进展。
- 玉桂芳白春学
- 关键词：水通道蛋白生理功能AQP水分子
- 水通道蛋白3基因敲除小鼠的饲养繁殖及鉴定
- 2007年
- 目的:繁殖和鉴定水通道蛋白3(AQP-3)基因敲除小鼠。方法:将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型,提取每种基因型小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,将其雄性纯合子与雌性杂合子交配,依照孟德尔遗传定律就有可能获得较多的基因敲除纯合子小鼠。结果:AQP-3杂合子小鼠的繁殖和饲养均获得成功,亦获得了较多的基因敲除纯合子小鼠。结论:正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从杂合子中获得AQP-3基因敲除纯合子小鼠的有效途径。
- 董春玲王桂芳肖奎李波马忠森白春学
- 关键词：水通道蛋白3基因敲除小鼠
- 哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5和黏蛋白5AC的表达变化及其相关性研究被引量：13
- 2007年
- 目的探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC基因和蛋白的表达变化及其两者的相关性。方法制作小鼠哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液细胞分类及肺组织湿干重比值,应用Real-time PCR法测定哮喘组(OVA组)和对照组肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定AQP5在肺组织中的分布,免疫印记法、ELISA法测定AQP5和MUC5AC蛋白在肺组织中的表达。结果小鼠哮喘组肺组织中AQP5表达较对照组明显减低(P<0.01),而MUC5AC表达显著升高(P<0.01),两者呈负相关(r=0.901,P<0.01)。结论哮喘时肺组织中AQP5表达的减低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌。
- 董春玲鲁继荣王桂芳肖奎陈智鸿孙加源白春学
- 关键词：支气管哮喘水通道蛋白黏蛋白5AC
- 哮喘小鼠肺组织水通道蛋白5的表达及地塞米松对其的调节被引量：7
- 2008年
- 目的:探讨支气管哮喘(哮喘)小鼠肺组织中水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的变化及地塞米松对其的调节作用。方法:雌性C57BL/6小鼠48只,随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组,每组16只。测定各组小鼠肺组织病理变化及湿/干质量比值,应用实时定量PCR法测定其肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定各组AQP5蛋白在肺组织中的分布,免疫印迹法测定AQP5蛋白在肺组织中的表达。ELISA法测定各组支气管肺泡灌洗液中MUC5AC的含量。结果:哮喘组小鼠肺组织中AQP5表达较对照组明显降低[mRNA减少(42.5±3.6)%,蛋白质减少(64.3±8.2)%]。而MUC5AC表达显著升高[mRNA升高(93.3±8.1)%;蛋白质水平升高(98.3±7.2)%]。地塞米松分别负调节其表达(与模型组比较P<0.05)。结论:哮喘小鼠肺组织中AQP5表达明显降低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,地塞米松对其显著负调节从而改善气道黏液高分泌、炎性浸润和肺水渗出的病理生理过程。
- 董春玲鲁继荣王桂芳李波肖奎陈智鸿白春学
- 关键词：哮喘水通道蛋白5黏蛋白类地塞米松
- 水通道蛋白1、3、4、5在内毒素性急性肺损伤小鼠肺组织中的表达被引量：49
- 2008年
- 目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白(AQP)1、3、4、5的表达变化,探讨水通道蛋白1、3、4、5表达与急性肺损伤的关系。方法:40只健康雄性的C57BL/6小鼠随机分为LPS4h组、LPS6h组、LPS8h组、LPS10h组(以LPS诱导ALI模型)和对照组,每组8只。采用实时定量PCR测定小鼠AQP-1、AQP-3、AQP-4和AQP-5 mRNA表达,免疫组化和Western印迹法观察AQP-1、AQP-3、AQP-4和AQP-5蛋白表达,同时进行肺湿/干重比值测定以及肺组织病理染色。结果:LPS4h、6h、8h、10h组肺湿/干重比值(4.39±0.19、4.58±0.17、4.87±0.21、5.28±0.16)明显高于对照组(3.99±0.25,P<0.05)。LPS灌注后4h AQP-1蛋白量减少至对照组的(74.1±5.2)%,AQP-5降至对照组的(70.3±7.1)%;LPS灌注后8h AQP-1蛋白量减少至对照组的(45.2±4.4)%,AQP-5降至对照组的(38.6±8.9)%。AQP-3和AQP-4的表达没有明显变化。结论:AQP-1和AQP-5可能参与ALI液体的异常转运,可能与肺水肿的发病机制有关。AQP-3和AQP-4可能不参与ALI肺水肿的形成过程。
- 李波陈东王桂芳董春玲王向东白春学
- 关键词：急性肺损伤肺水肿水通道蛋白脂多糖
- 离体肺气体容积和肺密度在肺气肿小鼠模型中的变化
- 2008年
- 目的研究以猪胰弹性蛋白酶(PPE)诱导小鼠肺气肿模型的离体肺气体容积(ELGV)和肺组织的密度变化规律,探讨ELGV和肺密度与肺气肿的相关性。方法30只雄性C57BL/6小鼠随机均分为对照组、PPE 3d组和PPE 7d组,气管内滴注PPE,建立肺气肿模型。以密度测量仪测量ELGV和肺组织密度,同时进行肺组织病理学观察及图像半定量分析。结果与对照组相比,PPE 3d组和PPE 7d组肺湿重的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。对照组、PPE 3d组和PPE 7d组的ELGV分别为(0.217±0.011)、(0.271±0.016)和(0.420±0.034)cm^3,PPE 3d和PPE 7d组显著高于对照组(P值均<0.01),PPE 7d组又显著高于PPE 3d组(P<0.01)。对照组、PPE 3d组和PPE 7d组的肺组织密度分别为(0.606±0.016)、(0.541±0.033)和(0.368±0.032)g/cm^3,PPE 3d和PPE 7d组显著低于对照组(P值均<0.01),PPE 7d组又显著低于PPE 3d组(P<0.01)。结论ELGV和肺组织密度与肺气肿的形态学改变密切相关,可以作为监测和评价肺气肿形态学改变的可行性指标。
- 李波陈东王桂芳董春玲王向东白春学
- 关键词：肺密度肺气肿胰弹性蛋白酶
- 一种复制小鼠哮喘模型的新方法被引量：2
- 2008年
- 王桂芳董春玲唐古生张燕沈茜白春学
- 关键词：哮喘模型小鼠病理生理过程过敏性炎症临床疾病医疗资源
- 小发卡状RNA介导的人呼吸道黏膜下腺细胞对水通道蛋白5的抑制及其对MUC5AC表达的影响被引量：2
- 2006年
- 陈智鸿祝蓉白莉白春学
- 关键词：水通道蛋白5黏膜下呼吸道腺细胞外分泌腺
- 地塞米松对哮喘小鼠肺液清除功能障碍的作用被引量：5
- 2008年
- 目的：研究支气管哮喘（以下简称哮喘）小鼠肺液清除功能的变化及地塞米松的作用，并探讨其可能机制。方法：雌性C57／BL6小鼠48只，随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组。以卵蛋白（OVA）联合佐剂腹腔注射（第1、15天）加雾化吸入（第25～29天）方法复制小鼠哮喘模型。分别在末次激发后2h及24h测定各组小鼠肺组织病理变化及湿干重比值（W／D），应用免疫组化法测定各组水通道蛋白5（AQP5）在肺组织中的分布，分别采用实时PCR和蛋白质印迹法测定各组小鼠肺组织中AQP5mRNA和蛋白质的变化。ELISA法测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞数和细胞因子IFN-γ及IL-13的水平。结果：哮喘组小鼠肺组织W／D较对照组明显升高，末次激发后2h和24h分别为4．98±0．46和4．81±0．33，分别升高22．9％和18．7％（P〈0．05），且激发后2h哮喘组小鼠肺组织W／D升高更明显。地塞米松干预组小鼠2h和24h肺组织W／D分别为4．01±0．11和4．21±0．14，与哮喘组小鼠相比显著降低（P〈0．05）；与对照组无显著性差异（P〉0．05）。HE染色可见哮喘组小鼠肺组织支气管周围大量以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主的炎细胞浸润；地塞米松干预组小鼠气道炎症程度减轻，支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞比哮喘组明显减少，IFN-γ和IL-13分别为（89．25±9．71）和（52．37±8．69）pg／mL，与哮喘组EIFN-γ和IL-13分别为（66．71±7．51）和（85．49±9．23）pg／mL]相比明显改善（P〈0．05）。免疫组化分析表明，AQP5主要表达于Ⅰ型肺泡上皮细胞和气道上皮细胞的腔膜面。哮喘小鼠肺组织中AQP5的表达均较对照组明显减少（mRNA减少约42％，蛋白质减少约64％）。地塞米松上调其表达（与模型组比较，P〈0．05）。结论：哮喘小鼠存在肺液清除功能障碍，肺液含量增�
- 董春玲鲁继荣王桂芳李波肖奎陈智鸿白春学
- 关键词：哮喘地塞米松水通道蛋白5
