河北省卫生厅科研基金(20100413)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：单保恩张璁刘丽华艾军吕红英更多>>
- 相关机构：河北医科大学第四医院河北医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：河北省卫生厅科研基金河北省科技厅科研项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IL-27促进人单个核细胞来源树突状细胞的分化成熟及其作用机制被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨IL-27对人外周血单个核细胞来源的树突状细胞(dendritic cell,DC)形态和功能的影响及其作用机制。方法:从正常健康人外周血中分离出单个核细胞,将其用GM-CSF、IL-4体外培养7 d,并于培养的第5天加入不同刺激因子,并将细胞分为4组:阴性对照组、阳性对照组(20 ng/ml TNF-α)、IL-27(20 ng/ml)组、IL-27+TNF-α组(即双细胞因子组,10ng/ml TNF-α+10 ng/ml IL-27)。用倒置显微镜观察培养7 d的DC形态,用流式细胞术检测DC表面共刺激分子CD1a/CD83和CD80/CD86的水平,RT-PCR检测DC表面趋化因子受体CCR5、CCR7 mRNA的表达,混合淋巴细胞实验检测DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力,Western blotting检测DC信号通路蛋白P-STAT1/STAT3的含量。结果:IL-27组和双细胞因子组诱导7 d时DC呈现典型的成熟形态学特征;DC表面CD1a和CD83双阳性表达[(35.75±4.10)%、(52.49±2.65)%vs(23.29±4.49)%,P<0.05]、CD80和CD86双阳性表达[(39.06±1.61)%、(54.10±0.46)%vs(22.66±3.20)%,P<0.05]、趋化因子受体CCR7 mRNA[3.98±0.09、4.75±0.11 vs 3.09±0.18,P<0.05]和转录因子蛋白P-STAT1/STAT3水平均较阴性对照组明显上调,而CCR5 mRNA[0.99±0.03、0.61±0.02 vs 1.23±0.26,P<0.05]表达含量则明显下降;IL-27组和双细胞因子组DC均可明显刺激T细胞增殖,且随DC与T细胞比例增加而增强,以双细胞因子组的刺激作用更为明显。结论:细胞因子IL-27可以直接或者协同TNF-α诱导人DC分化成熟,并增强DCs的抗原提呈功能,其机制可能与活化P-STAT1/STAT3信号通路有关。
- 张璁田志辉刘丽华赵连梅吕红英艾军单保恩
- 关键词：共刺激分子趋化因子受体
- IL-27基因转染对树突状细胞表型和功能的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨转染IL-27基因体外对人外周血单个核细胞来源树突状细胞表型和功能的影响。方法采集健康成人外周血,密度梯度离心法获得外周血单个核细胞,用GM-CSF、IL-4诱导树突状细胞(Dendritic cell,DC),第5天后将DC分为3组:IL-27基因转染组、TNF-α组和阴性对照组。倒置显微镜观察DC形态;流式细胞术检测DC表面分子CD1a、CD80、CD83和CD86的表达情况;MTT法检测DC刺激T细胞增殖的能力;ELISA法检测细胞培养上清中IL-12和IFN-γ的含量。结果转染IL-27基因后外周血单个核细胞来源DC呈现典型的成熟DC形态学特征。IL-27基因转染组DC表面CD1a、CD80、CD83和CD86表达水平较阴性对照组均明显上调(P<0.05)。IL-27基因转染组DC诱导T细胞增殖的能力较对照组DC明显增高(P<0.05)。IL-27基因转染组DC培养上清中IL-12和IFN-γ的含量均明显高于对照组DC(P<0.01)。结论转染IL-27基因可以上调成熟DC的细胞表型,增强DC的免疫学活性。
- 刘丽华潘晓明桑梅香王欣荣胡晓东张璁单保恩
- 关键词：白细胞介素27树突状细胞细胞培养免疫活性
- IL-27促进人胰腺癌Aspc1细胞凋亡被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨IL-27基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用。方法:重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染IL-27基因的Aspc1细胞(Aspc1/IL-27)。ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表达、细胞增殖和MHC-Ⅰ类分子表达的影响。将Aspc1/IL-27、Aspc1/LXSN(稳定转染空质粒的Aspc1细胞)和Aspc1细胞接种于裸鼠右背部皮下,观察Aspc1细胞移植瘤的生长情况和小鼠的生存期;TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,电镜观察移植瘤细胞的超微结构变化。结果:成功建立稳定转染PA317/IL-27载体的Aspc1/IL-27细胞株。Aspc1/IL-27细胞高表达IL-27,而Aspc1/LXSN和Aspc1细胞不表达IL-27(P<0.01)。PA317/IL-27载体转染不影响Aspc1细胞表面MHC-Ⅰ类分子的表达(P>0.05)。Aspc1/IL-27组裸鼠移植瘤生长速度明显慢于Aspc1/LXSN组及Aspc1组(P<0.05),且生存期延长(P<0.05)。Aspc1/IL-27组移植瘤细胞凋亡率明显高于Aspc1/LXSN和Aspc1组[(19.5±2.4)%vs(8.5±0.3)%、(9.1±0.8)%,P<0.01]。结论:IL-27基因转染胰腺癌Aspc1细胞后通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。
- 刘丽华郝国贞张璁艾军邵丽丽单保恩
- 关键词：胰腺肿瘤凋亡增殖
