国家自然科学基金(30370618)
- 作品数：22 被引量：91H指数：6
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- α-平滑肌肌动蛋白在高氧肺损伤中的表达变化及意义被引量：6
- 2012年
- 目的探讨高氧暴露下大鼠肺损伤中肌成纤维细胞表面标志α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化及意义。方法将64只3周龄SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组（置于空气中，吸入氧浓度0．21）和高氧暴露组（置于玻璃氧舱中，95％氧），每组于高氧暴露1、7、14、21d随机处死8只大鼠。苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变，免疫组化法观察α-SMA在肺组织中的表达与分布，蛋白质免疫印迹法（Westernblotting）检测肺组织α-SMA表达。结果HE染色发现，早期高氧肺损伤时肺组织以炎症水肿表现为主，后期则以间质纤维增生为主。免疫组化结果显示，正常对照组α-SMA在细支气管上皮、肺泡表面及肺泡间隔上表达极为微弱；高氧暴露后随时间的延长α-SMA在肺泡表面及肺泡间隔上表达逐渐增强，以21d时最为明显。Western blotting检测发现，与正常对照组相比，高氧暴露1d、7d时肺组织α-SMA表达无明显差异（1．02±0．12比1．00±0．13，1．05±0．14比0．99±0．12，均P〉0．05），高氧暴露14d、21d时α-SMA表达明显增强（1．27±0．21比1．05±0．15，2．26±0．28比1．05±0．14，P〈0．05和P〈0．01）。结论大鼠高氧暴露后随时间延长，α-SMA在肺组织中的表达逐渐升高，肺纤维化逐渐加重，说明肌成纤维细胞在肺组织纤维化重构过程中起重要作用。
- 符跃强刘成军李静胡兰卢仲毅许峰
- 关键词：高氧肺组织Α-平滑肌肌动蛋白肌成纤维细胞
- 氧化应激与肺细胞损伤凋亡信号途径被引量：7
- 2005年
- 氧化应激产生的活性氧 (ROS)与细胞凋亡关系密切 ,氧化应激导致肺泡上皮细胞的损伤和 (或 )凋亡 ,其作用方式可以是直接的 (通过打破细胞内氧化还原状态平衡 ) ,也可以是间接的 (通过激活氧化还原敏感的细胞信号转导通路 )。本文就肺细胞凋亡与氧化应激的关系作一概述 ,旨在为氧化应激相关疾病的抗氧化剂治疗和凋亡信号途径干预治疗提供理论依据。
- 蒋静许峰
- 关键词：氧化应激凋亡肺细胞
- 丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与高氧肺损伤的研究进展被引量：1
- 2006年
- 目的丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)是信号由细胞表面传递到细胞内部的重要传递者,近来研究发现在高氧肺损伤中MAPKs既有介导细胞死亡的作用,又有抗感染、抑制凋亡、保护细胞、促进细胞增殖及肺损伤修复作用。本文就这方面的研究进展作一概述。
- 胡兰许峰
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶活性氧肺损伤
- 高氧肺损伤中肺细胞凋亡及JNK信号通路调控机制被引量：7
- 2008年
- 目的:观察高氧暴露下肺组织细胞凋亡和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达的变化,并探讨JNK信号转导通路对高氧诱导的肺细胞凋亡的调控机制.方法:48只3 wk龄Wistar大鼠随机分为空气对照组、高氧暴露3,7,14d组、空气+JNK抑制剂干预组、高氧暴露7 d+JNK抑制剂干预组.光镜下观察肺组织病理学改变,末端标记法(TUNEL)分析肺组织细胞凋亡的变化,免疫组化检测肺组织p-JNK的表达分布,Western Blot检测肺组织p-JNK蛋白质的表达含量.结果:与空气对照组比较,高氧暴露各时间点组肺组织出现典型急、慢性肺损伤的病理学改变,肺组织细胞凋亡指数和p-JNK蛋白表达含量均显著增加(P<0.05),肺组织p-JNK阳性细胞明显增多.JNK抑制剂SP600125在空气和高氧暴露下均能明显阻断JNK的激活(P<0.05),SP600125干预后高氧暴露肺组织细胞凋亡指数显著减少(P<0.05).结论:细胞凋亡是高氧肺损伤的一个重要病理组织学特点.JNK信号转导通路在高氧肺损伤中被激活,可能发挥促细胞凋亡效应.
- 胡兰许峰李静方芳匡凤梧王兴勇卢仲毅
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶细胞凋亡
- p53在氧化应激下肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨氧化应激状态下肺泡II型上皮细胞(ATIIcells)凋亡时,activecaspase-3的表达和p53在细胞内分布情况.方法:原代培养大鼠ATII细胞,用500μmol/L过氧化氢(H2O2)处理,建立氧化损伤性细胞模型.经DAPI染色后观察细胞核的形态变化.流式细胞术检测H2O2刺激后细胞凋亡率的变化;蛋白质免疫印迹法检测H2O2刺激后activecaspase-3的表达变化.免疫荧光染色后观察p53的表达和细胞内分布.结果:DAPI染色发现,正常对照组细胞核较大,发出浅蓝色的荧光,而H2O2刺激后,细胞核发生致密浓染,核周出现光晕等改变.与正常对照组比较,随H2O2刺激时间延长,细胞凋亡率显著上升(P<0.05);Western Blot检测发现H2O2刺激后,activecaspase-3蛋白表达增加(P<0.05).激光共聚焦显微镜观察发现正常细胞p53表达微弱,H2O2刺激3h后,p53表达显著增强,主要集中于细胞核.结论:氧化应激能促使activecaspase-3蛋白表达增加及p53细胞核内表达增加,诱导细胞发生凋亡;p53可能通过转录依赖的途径诱导细胞凋亡.
- 符跃强卢仲毅方芳许峰
- 关键词：凋亡氧化应激P53
- 活性氧与肺上皮细胞损伤机制及防治措施
- 2005年
- 肺上皮细胞执行多种重要功能,是肺组织中的重要细胞。高氧作用于肺上皮细胞后能产生大量活性氧,活性氧能激活特定信号传导通路,使细胞发生死亡。高氧刺激细胞后可引起细胞发生胀亡,而用活性氧直接刺激则发生凋亡。虽然凋亡和胀亡共用部分上游信号传导通路,但下游通路不同,胀亡的肺上皮细胞没有半胱氨酸蛋白酶-3的激活。根据被活性氧激活的肺上皮细胞死亡的信号传导通路可采取针对性防治策略,为治疗肺的氧化损伤找到切实可行的方案。
- 符跃强许峰
- 关键词：呼吸窘迫综合征上皮细胞活性氧细胞死亡
- p38丝裂素活化蛋白激酶在幼鼠高氧肺损伤模型中的表达及作用被引量：3
- 2009年
- 目的近年来的研究证实p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)在多种因素诱导的肺损伤中发挥着重要的调控作用,但其在高氧肺损伤中的表达和作用尚不明了。该文通过建立幼鼠高氧肺损伤模型来研究p38MAPK在该模型中的表达及作用。方法90%氧气暴露建立幼年Wistar大鼠高氧肺损伤模型,用免疫组化和蛋白质免疫印迹法观察p38MAPK在肺组织中的分布和表达,用TUNEL法观察肺组织的细胞凋亡指数,并同时观察p38MAPK抑制剂SB203580对肺组织细胞凋亡的影响。结果高氧暴露后肺组织磷酸化p38MAPK蛋白表达明显增强,主要分布于肺泡上皮细胞、气道上皮细胞、血管内皮细胞、浸润炎症细胞。同时肺凋亡指数明显增加。使用SB203580抑制了p38MAPK活性的上升,同时降低了肺凋亡指数。结论高氧诱导的急性肺损伤模型中,磷酸化的p38MAPK表达增加,并表达于肺内多种细胞,可能起促凋亡作用。
- 李静许峰胡兰谭利平符跃强方芳匡凤梧卢仲毅
- 关键词：P38丝裂素活化蛋白激酶高氧症肺损伤幼鼠
- 氧化应激诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡时NF-κB和Bak的表达变化
- 2014年
- 目的:探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型(alveolar typeⅡ,ATⅡ)上皮细胞的凋亡情况及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65和Bak表达变化。方法:原代培养大鼠ATⅡ细胞,用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)500μmol/L处理不同时间,建立氧化损伤性细胞模型。相差显微镜下观察细胞形态变化。流式细胞仪检测H2O2刺激后细胞凋亡率的变化。蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测ATⅡ细胞受H2O2刺激后NF-κB p65和Bak的表达变化。免疫荧光染色后,激光共聚焦显微镜下观察NF-κB p65的变化和细胞内分布情况。结果:受H2O2刺激3 h后,ATⅡ细胞体积减小,胞内颗粒数目减少,细胞核固缩。与正常对照组比较,受H2O2刺激1 h和3 h后,ATⅡ细胞的凋亡率明显上升(P=0.000,P=0.000)。Western blot检测发现H2O2刺激3 h后,细胞核内NF-κB p65的表达明显增加(P=0.000),ATⅡ细胞Bak蛋白的表达增加(P=0.000)。激光共聚焦显微镜观察发现正常细胞NF-κB p65表达微弱,H2O2刺激3 h后,NF-κB p65表达明显增强,主要集中分布于细胞核。结论:氧化应激能诱导ATⅡ细胞凋亡,在此过程中NF-κB p65在细胞核内的表达增加,Bak的表达也增加,两者参与了ATⅡ细胞的凋亡。
- 符跃强刘成军陈应富李静胡兰卢仲毅许峰
- 关键词：凋亡BAK核因子ΚB
- 高氧性肺损伤中MAPK信号途径的表达及其作用机制被引量：15
- 2007年
- 目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路三亚族ERK,p38,JNK在大鼠高氧性肺损伤动物模型中的表达及作用.方法:24只3周龄Wistar大鼠随机分成4组:空气对照组和高氧暴露3,7和14d组,每组动物6只.高氧暴露组置于常压高氧仓中(O2≥95%),空气对照组置于常压空气中(O2=21%).光镜下观察肺组织病理学改变,采用二步法免疫组化检测磷酸化ERK,p38,JNK在肺组织中的分布.WesternBlot检测磷酸化MAPK蛋白表达变化.结果:高氧暴露3,7d组出现急性肺损伤的典型病理学特征,高氧暴露14d组肺间质及纤维细胞增生明显.免疫组化显示空气对照组仅肺泡上皮细胞及气道上皮细胞见少量磷酸化ERK,p38,JNK阳性表达,高氧暴露组则阳性细胞明显增多,广泛分布于肺内细胞中:肺泡上皮细胞、气道上皮细胞、胸膜间皮细胞、浸润炎细胞及间质纤维细胞,p38阳性表达尤多见于炎性细胞中.WesternBlot显示高氧暴露组较空气对照组磷酸化蛋白表达明显增强,ERK,JNK高氧暴露7d组表达最强(P<0.05),p38在高氧暴露14d组表达最为明显(P<0.05).结论:高浓度氧可激活MAPK信号途径,磷酸化ERK,p38,JNK在高氧损伤肺组织表达明显增加,MAPK三亚族ERK,p38,JNK活性变化在时间上并不具有同步性.
- 谭利平许峰匡凤梧方芳卢仲毅王兴勇
- 关键词：高氧症急性病MAP激酶信号系统ROS
- N-乙酰半胱氨酸对高氧肺损伤保护机制与p38丝裂素活化蛋白激酶途径的相关性研究被引量：5
- 2010年
- 目的 观察p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）信号途径在高氧肺损伤中的表达,探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）在高氧肺损伤中的保护作用及机制.方法 将30只幼年Wistar大鼠按随机数字表法分为空气对照组（A组）、高氧暴露组（B组）、高氧＋NAC干预组（C组）、高氧＋p38MAPK特异性抑制剂（SB203580）干预组（D组）、高氧＋NAC＋SB203580联合干预组（E组）,每组6只.实验7 d后,光镜下观察肺组织病理改变,并行肺损伤评分;测定肺湿/干重（W/D）比值、支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白（TP）含量、肺通透系数;采用免疫组化法检测磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）在肺组织中的分布;用蛋白质免疫印迹法检测p-p38MAPK蛋白含量.结果 与A组比较,高氧各组均有不同程度的肺损伤,但药物干预各组（C、D、E组）肺损伤均较B组有所减轻.免疫组化显示,高氧各组p-p38MAPK阳性表达较A组明显增强,尤高表达在炎性浸润细胞;药物干预后（C、D、E组）p-p38MAPK阳性细胞较B组明显减少.蛋白质免疫印迹法显示,B组p-p38MAPK蛋白含量明显高于A组（0.20±0.03比0.11±0.01,P〈0.05）;干预后C、D、E组p-p38MAPK蛋白含量低于B组（0.16±0.02、0.15±0.01、0.14±0.02比0.20±0.03,均P〈0.05）,但仍高于A组（均P〈0.05）,而C、D、E组间则无明显差异.各组肺W/D比值、BALF中TP含量、肺通透系数改变与p-p38MAPK蛋白含量变化趋势一致.结论 高氧应激可激活损伤肺组织p38MAPK活性;NAC抗氧化肺保护作用机制可能是通过下调高氧诱导p38MAPK的激活而对肺损伤起保护作用.
- 谭利平许峰匡凤梧
- 关键词：高氧肺损伤P38丝裂素活化蛋白激酶N-乙酰半胱氨酸
