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脑源性神经营养因子对缺氧胚脑神经元保护作用的信号传递途径初探被引量：9: 2007年; 目的研究胚鼠脑皮质神经元遭受缺氧刺激时,脑源性神经营养因子(BDNF)发挥保护作用的信号传递途径。方法采用免疫荧光技术结合激光扫描共聚焦显微镜观察不同缺氧时间点(3h和5h)实验组(分别于缺氧培养前24h和缺氧培养即刻加入BDNF100ng/mL)和对照组(缺氧培养,无BDNF干预)体外培养脑皮质神经元胞内酪氨酸激酶B(TrkB)、磷酸化TrkB和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)水平的变化并进行半定量分析。结果与对照组相比,实验组在缺氧后不同时间点神经元胞浆内TrkB及磷酸化TrkB水平均出现上调(P<0.05),MAPK在胞浆内和核内的表达也增加(P<0.05),且缺氧培养前24h加入BDNF者三种蛋白的表达强于缺氧培养即刻加入BDNF者(P<0.05)。结论BDNF对缺氧神经元的保护作用可能通过诱导TrkB表达上调来实现,以TrkB受体酪氨酸磷酸化起始,经Ras-MAPK途径完成。; 汪志凌毛萌周晖李胜富俞丹; 关键词：缺氧性脑损伤信号途径 MAPK

EB病毒GST-Rta融合蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备被引量：6: 2005年; 目的表达和纯化EB病毒的重组融合蛋白谷胱氨肽S转移酶(GST)-Rta185和GST-Rta150,并制备特异性多克隆抗体。方法质粒表达载体pGEX-R185I、pGEX-R150I和pGEX-5X-3分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化目的蛋白。将纯化后的GST-R185、GST-R150和GST蛋白免疫新西兰大白兔制备抗血清。结果在细菌裂解液中检测到高表达量的融合蛋白,经GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST-Rta融合蛋白。应用Westernblot和ELISA方法检测证实,用纯化的GST-Rta蛋白免疫家兔得到了特异性的多克隆抗体。结论通过上述方法制备出来的融合蛋白纯度较高,免疫家兔获得的多克隆抗体具有良好的特异性,为研究EB病毒Rta蛋白及与EB病毒相关疾病的诊断和治疗提供了重要的条件。; 徐永春梁伟波苟航陈文婕朱银华贾静张林; 关键词：融合蛋白多克隆抗体 EB病毒

鼻NK/T细胞淋巴瘤瘤细胞分化状态的探讨被引量：22: 2003年; 目的　探讨鼻自然杀伤 (NK) /T细胞淋巴瘤肿瘤细胞的分化状态。方法　收集已确诊的 88例鼻NK /T细胞淋巴瘤的临床资料。免疫组织化学染色选用的抗体有 :T细胞分化抗原(CD3ε、CD5、CD1a)、NK细胞相关抗原 (CD56、CD57) ,还有CD3 4和CD3 8抗原。结果　 (1)病变部位以鼻腔最常见 ,其次为咽部 ,主要体征为溃疡或黏膜糜烂。本组 88例鼻NK/T细胞淋巴瘤中有 62例(70 5% )之瘤细胞呈弥漫性增生和浸润 ,瘤细胞中等大小者有 71例 (80 7% ) ;(2 ) 88例NK /T细胞淋巴瘤中 ,T细胞标记CD3ε阳性者 78例 (88 6% ) ,CD5阳性者 56例 (63 6% ) ,NK细胞标记CD56阳性者 2 5例 (2 8 4% ) ;CD57、CD1a、CD3 4和CD3 8均为阴性。结论　鼻NK/T细胞淋巴瘤瘤细胞的分化可能已超越前体细胞阶段。; 姜余梅刘卫平唐琼兰李甘地郭嘉廖殿英; 关键词：鼻NK/T细胞淋巴瘤阳性 NK细胞 CD38 CD1A CD56

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美国中华医学基金(CMB00722)