国家现代农业产业技术体系建设项目(nycytx-40)
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
- 相关作者：陈玉林马雄张海瑞才学鹏翟军军更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学新疆农业大学中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用SMART技术构建新吉细毛羊皮肤组织全长cDNA文库被引量：2
- 2010年
- 【目的】探寻控制羊毛性状的相关基因,构建了新吉细毛羊皮肤组织全长cDNA文库。【方法】采用Clontech公司的CreaterTM SMARTTM cDNA library construction kit,用Biozol试剂提取新吉细毛羊皮肤组织总RNA后,以反转录酶SuperscriptTMⅡ反转录为第一链cDNA,然后通过LD-PCR合成并扩增ds cDNA,扩增产物经纯化、SfiⅠ酶切、过CHROMA SPIN-400柱去除小片段后,连接到SfiⅠ消化过的pDNR-LIB（带有SfiⅠA和B 2个位点）质粒载体中,最后用热击转化法将重组质粒转化到E.coliDH5α内,得到新吉细毛羊皮肤组织全长cDNA原始文库,扩增后的文库分装后用50 mL离心管保存。【结果】构建的cDNA文库约含4.2×105个独立克隆,重组效率为100%,插入片段多为0.5～3.0 kb,平均插入片段长度为1.3 kb,符合建库要求。【结论】经检测所构建的文库库容量满足基因筛选要求,可用于特异表达基因全长序列。
- 吴茜田可川刘武军张艳花吴伟伟徐新明张廷虎马晓燕黄锡霞
- 关键词：新吉细毛羊皮肤组织CDNA文库SMART技术
- 对我国毛皮用绵、山羊产业发展的思考被引量：1
- 2010年
- 在全面分析我国现有10个毛皮用绵、山羊品种所处生态环境和种质特性基础上,就当前存在的主要问题提出发展我国毛皮用羊的思考与建议,对我国毛皮羊的保种选育提高和更充分发挥其生产潜力具有一定的参考价值。
- 马章全陈小强
- 关键词：生态环境种质特性
- 日粮硒水平对4～6月龄绒山羊生长性能和组织抗氧化能力的影响被引量：14
- 2011年
- 旨在研究日粮硒水平对4~6月龄绒山羊生长性能和组织抗氧化能力的影响,为确定绒山羊羔羊日粮中适宜的硒供给量提供依据。选用体况良好、体质量接近的4月龄陕北白绒山羊羯羔羊24只,采用单因子随机区组设计分为4组,分别饲喂硒含量为0.11、0.21、0.41、0.61 mg/kg的4种试验日粮,试验期为60 d。结果表明：①日粮硒水平对绒山羊羔羊平均日增量无显著影响（P〉0.05）。②肝脏和肌肉中的硒含量以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性随日粮硒含量的提高而升高。当日粮硒含量为0.11~0.41 mg/kg时,肝脏和肌肉组织中的硒含量以及GSH-Px活性均随日粮硒含量的升高而显著升高（P〈0.05）;当日粮中硒含量为0.41~0.61 mg/kg时,肝脏和肌肉组织中的硒含量以及GSH-Px活性不再随日粮硒水平的增大而继续显著增大（P〉0.05）;两种组织中的硒含量和GSH-Px活性之间存在高度正相关。③肝脏和肌肉组织中的丙二醛（MDA）含量随着日粮硒含量的提高而降低。当日粮硒含量为0.41~0.61 mg/kg时,肝脏和肌肉中MDA含量均保持较稳定水平。因此,4~6月龄绒山羊日粮中硒含量为0.41 mg/kg时,已经能够满足其维持较高水平生长性能和组织抗氧化能力对硒的需要。
- 马雄陈玉林
- 关键词：硒绒山羊抗氧化能力
- 桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶活性分析及其基因CDs区的克隆与表达被引量：1
- 2011年
- 【目的】研究陕南地区桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶基因,为构建高效分解纤维素的工程菌奠定基础。【方法】用质量分数为1%的羟甲基纤维素钠（CMC-Na）测定桑天牛幼虫内切β-1,4-葡聚糖酶活性,Trizol法提取桑天牛肠道总mRNA,扩增其内切β-1,4-葡聚糖酶基因,用DNAStar和NCBI上的BLAST进行序列分析。根据测序得到的基因序列设计1对引物,扩增桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶基因CDs区,构建原核表达载体pET-APEG,并在大肠杆菌中表达。【结果】桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶最适pH为4.4~5.6,pH值为5.0时酶活性最高;最适温度为30~50℃,50℃时酶活最高;酶液在37℃稳定性好,而在60℃的水浴中处理30 min,酶活性急剧下降。桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶基因CDs区长度为978 bp,编码325个氨基酸残基;BLAST结果显示,该基因序列与黄星天牛属于GHF5的纤维素酶基因序列相似性达85%,氨基酸序列相似性达90%,与已报道的桑天牛Ag-EaseⅢ的序列相似性达98%,氨基酸序列相似性达99%;构建原核表达载体pET-APEG在大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达,SDS-PAGE检测结果表明,诱导表达沉淀在约55 ku处有1条特异蛋白条带,与预测蛋白的分子量相符。【结论】陕南地区桑天牛β-1,4-葡聚糖酶为内切葡聚糖酶,属于GHF5家族,其可以在大肠杆菌中表达。
- 徐伟佳韩卫杰李旺陈玉林
- 关键词：桑天牛克隆
- 日粮硒水平对4～6月龄绒山羊生长性能和组织抗氧化能力的影响被引量：3
- 2011年
- 试验旨在研究日粮硒水平对4～6月龄绒山羊生长性能和组织抗氧化能力的影响,为确定绒山羊羔羊日粮中适宜的硒供给量提供依据。选用体况良好、体重接近的4月龄陕北白绒山羊羯羔羊24只,采用单因子随机区组设计分为4组,分别饲喂硒含量为0.11、0.21、0.41、0.61 mg/kg的4种试验日粮,试验期为60 d。结果表明:日粮硒水平对绒山羊羔羊平均日增重无显著影响(P>0.05)。肝脏和肌肉中的硒含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性随着日粮硒含量的提高而升高。当日粮硒含量在0.11～0.41 mg/kg范围内时,肝脏和肌肉组织中的硒含量以及GSH-Px活性均随日粮硒浓度的升高而显著升高(P<0.05);当日粮中硒含量在0.41～0.61 mg/kg范围内时,肝脏和肌肉组织中的硒含量以及GSH-Px活性不再随日粮硒水平的增大而继续显著增大(P>0.05);2种组织中的硒含量和GSH-Px活性之间存在高度正相关。肝脏和肌肉组织中的丙二醛(MDA)含量随着日粮硒含量的提高而降低。当日粮硒含量范围在0.41～0.61 mg/kg内时,肝脏和肌肉中MDA含量均保持在较稳定水平上。因此,4～6月龄绒山羊日粮中硒含量为0.41 mg/kg时,已经能够满足其维持较高水平生长性能和组织抗氧化能力对硒的需要。
- 马雄陈玉林
- 关键词：硒抗氧化能力绒山羊
- 新吉细毛羊皮肤组织均一化全长cDNA文库的构建及其ESTs的生物信息学分析
- 引言新吉细毛羊是我国培育成功的第1个超细型细羊毛品种。其主体细度在66～70支(少部分达到80支),毛长8 cm以上,是高档精纺毛织品的理想原料。如何保持和继续培育具有更细的细毛羊品种的一个主要方面就是克隆和鉴定一批可能...
- 吴茜黄锡霞刘武军田可川张艳花徐新明吴伟伟张廷虎
- 文献传递
- 利用DDRT-PCR技术筛选新疆超细型细毛羊毛用性状相关基因
- ＜正＞引言新吉细毛羊是我国生产优质羊毛的主要品种。羊毛纤维细度是评定羊毛品质的重要指标,在同一品种,同一年龄,相同的环境和饲养管理条件下,个体的遗传差异对羊毛的生长起到了决定性作用。通过对个体差
- 劳荃蘅黄锡霞田可川徐新明贺三刚汤存伟
- 关键词：新吉细毛羊DDRT-PCR差异表达基因
- 文献传递
- 麻疹病毒属病毒非结构蛋白结构及功能研究进展被引量：4
- 2011年
- 麻疹病毒属在分类上属于副黏病毒科副黏病毒亚科,其成员包括麻疹病毒（Measles virus,MV）、犬瘟热病毒（Canine distemper virus,CDV）、牛瘟病毒（Rinderpest virus,RPV）、海豹瘟病毒（Phocine distemper virus,PDV）和小反刍兽疫病毒（Peste-des-petits-ruminants virus,PPRV）。
- 张海瑞翟军军才学鹏
- 关键词：麻疹病毒蛋白结构非结构副黏病毒牛瘟病毒犬瘟热病毒
- 用注射器直接对睾丸打点注射EGFP生产转基因兔的试验研究被引量：2
- 2010年
- 为探讨直接用1 mL注射器对睾丸打点注射pIRES2-EGFP建立操作方便、效率高、成本低、可批量生产转基因兔的可行性。选择4只成年新西兰雄兔,双侧睾丸内分别打点注射0.5～0.8 mg/mL浓度的质粒0.25 mL,第3周和第8周分别取4^#和3^#雄兔睾丸做冰冻切片,置荧光显微镜下观察是否发绿色荧光。其它雄兔于第3周开始参与配种,最后采新生仔兔耳组织提取其基因组进行PCR和Southern杂交检测阳性率。结果表明,雄兔睾丸冰冻切片于荧光显微镜下可见绿色荧光,PCR和Southern杂交检测表明在睾丸注射后的第6周和第7周进行配种所得后代阳性率最高。不同雄兔后代经PCR和Southern杂交检测平均阳性率存在差异（P〈0.05）,2^#雄兔后代平均阳性率达到56.46%,3^#雄兔的最低达36.96%的阳性率。表明用注射器直接对睾丸打点注射外源基因生产转基因的方法操作简便、高效,为大规模制备一些大型家畜的转基因后代奠定了基础。
- 宋天增冯静曾宪垠杨剑波杨华皮文辉张红琳贾斌赵宗胜郭延华石国庆
- 关键词：转基因兔转基因
