国家现代农业产业技术体系建设项目(nycytx-44)
- 作品数：33 被引量：158H指数：8
- 相关作者：王芳范志宇胡波李福昌麻名文更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院山东农业大学扬州大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 家兔支气管败血波氏杆菌重组百日咳杆菌粘附素(PRN)蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立被引量：1
- 2012年
- 目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)PRN蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌prn基因序列(AY376325)设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷酸片段。将PCR扩增产物连接至原核表达载体pGEX-4T-1中,以E.coli BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达,以纯化重组蛋白PRN作为诊断抗原,通过探索最佳抗原包被量和抗体血清稀释倍数等,建立检测支气管败血波氏杆菌抗体的间接ELISA方法。结果成功克隆了prn全基因序列,并在E.coliBL21(DE3)中获得高效表达,经SDS-PAGE、Western blot分析显示重组蛋白PRN具有良好的抗原性。应用重组蛋白PRN为抗原建立了检测Bb血清抗体的间接ELISA诊断方法。试验确定重组蛋白PRN抗原的包被浓度为500ng/mL,最适血清稀释度为1∶40。结论建立的ELISA检测方法,不仅为Bb抗体检测提供了实用的血清学检测手段,也为进一步开发Bb检测试剂盒奠定了基础。
- 胡佳佳恽时锋王芳范志宇胡波
- 关键词：支气管败血波氏杆菌原核表达间接ELISA
- 不同剂量马绒毛膜促性腺激素对母兔同期发情效果的影响被引量：7
- 2010年
- 在规模饲养频密繁殖条件下(繁殖周期为42 d;人工授精在产后第11天;断奶在产后第35天),按照品种和生理状态将母兔分成5个试验组,每个组在人工授精前48 h对母兔注射不同剂量的马绒毛膜促性腺激素(eCG)(20、30、40、50、0 IU),研究其对母兔同期发情的效果。试验共进行了4个周期1 086次人工授精。结果表明:与对照组相比,20、30、40、50 IU eCG均可显著提高母兔的产仔率(P<0.05),同时20 IU和30 IU的产仔率显著高于40 IU和50 IU(P<0.05)。30 IU组活窝重显著高于20、40 IU和对照组(P<0.05)。40 IU组仔兔个体重显著低于20、30 IU和对照组(P<0.05)。综合分析母兔繁殖性能,eCG 30 IU组表现最佳;同时,采用eCG对母兔进行同期发情,20、30 IU在长期的使用中较40 IU和50 IU对母兔产仔率具有更好的提高作用。
- 张雅琼秦应和阎英凯李士栋
- 关键词：同期发情人工授精
- 粗蛋白水平对长毛兔产毛性能及生化指标的影响被引量：2
- 2010年
- 日粮不同粗蛋白水平对长毛兔产毛性能及血液生化指标的影响。选用体质量、年龄和产毛量基本一致的80只成年长毛兔,按平均体质量和产毛量一致的原则分成4组,每组20只兔,公母各半。试验日粮分为4个粗蛋白处理水平,分别为14%、16%、18%和20%,试验前所有长毛兔进行剪毛处理,正试期73d。结果表明:日粮粗蛋白水平对毛长影响极显著;对年产毛量和料毛比影响显著;对血清总蛋白和白蛋白影响显著;对血清尿素氮和谷草转氨酶有极显著影响。试验结果表明:成年长毛兔日粮适宜的粗蛋白水平为18%。
- 麻名文王春阳王雪鹏李福昌
- 关键词：长毛兔粗蛋白产毛性能生化指标
- 沙门氏菌快速检测技术概述被引量：6
- 2011年
- 沙门氏菌是一种能引起人和多种动物肠道感染的重要人畜共患的病原菌。简要介绍了近年来沙门氏菌快速检测技术研究进展,并分析各种检测方法的优缺点,以期寻找一种快速、简便、特异、灵敏,能检测绝大多数血清型沙门氏菌的方法。
- 邝良德朱晓霞谢晓红易军雷岷任永军郭志强李丛艳郑洁
- 关键词：沙门氏菌免疫学技术分子生物学技术
- 不同锌源对断奶肉兔组织器官锌浓度及血清碱性磷酸酶活性的影响被引量：5
- 2010年
- 试验旨在研究日粮中不同硫酸锌和蛋氨酸锌水平对断奶-2月龄生长肉兔各组织锌浓度的影响。选用断奶新西兰肉兔140只,随机分为7个处理,每个处理20个重复。在基础日粮中分别以硫酸锌和蛋氨酸锌形式添加40、80、120mg/kg锌,预试期7d,正试期18d。结果表明:不同来源的锌,均能有效提高肝脏、脾脏、肾脏、胰脏、血清、胫骨中锌含量;日粮锌极显著影响血清碱性磷酸酶(AKP)活性。在添加120mg/kg锌范围内,肝脏、血清、胰脏、脾脏锌浓度和AKP活性与日粮锌含量有较强的相关性。蛋氨酸锌使锌离子得到有效保护,锌的吸收利用率高于ZnSO4。
- 徐振华李福昌
- 关键词：锌血清碱性磷酸酶肉兔
- 检测兔出血症病毒抗体间接ELISA方法的建立被引量：15
- 2010年
- 为建立检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法,应用杆状病毒表达系统表达的RHDV VP60包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被浓度为4.62μg/ml,标准阴、阳性血清稀释度为1∶200,封闭液选用2%明胶;羊抗兔IgG最佳稀释度为1∶4 000。阻断试验、特异性试验、敏感性试验、重复性试验结果显示,该方法具有较高的特异性、敏感性和重复性。用建立的ELISA方法与血凝抑制试验对临床血清样品进行检测,结果显示,ELISA与HI检测兔血清的RHDV抗体阳性率分别为84.7%(955/1 127)和76.0%(857/1 127),符合率为91.3%。该方法的建立为检测RHDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、快速、操作简便经济的检测方法,为兔出血症免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段。
- 李超美王芳蔡少平任雪枫胡波范志宇徐为中何孔旺
- 关键词：兔出血症病毒VP60间接ELISA
- 6个家兔群体KAP3.1基因的遗传变异分析被引量：3
- 2010年
- 研究设计了2对特异性引物,经过序列拼接首次获得了家兔KAP3.1基因的全长CDS序列,同时采用PCR-SSCP法对6个家兔群体KAP3.1基因的全部CDS序列以及部分5’端和3’端序列进行SNP检测,结果显示,KAP3.1-1位点上发现3种基因型,2个等位基因,在序列上发生了C91T突变,为沉默突变;而KAP3.1-2位点未检测到突变。6个群体的基因型分布均处于Hardy-Weinberg平衡,且表现为低度或没有多态。福建黑兔与九疑山兔,福建黑兔与皖系长毛兔,有色獭兔与白色獭兔,九疑山兔与白色獭兔,九疑山兔与皖系长毛兔之间不存在分布差异(P>0.05),而其他家兔群体彼此之间的分布差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。研究为KAP3.1基因是否能作为家兔毛质性状选育工作的分子标记可提供一定参考。
- 吴添文何孟颉王晓明冯凯李碧春吴信生
- 兔场突发兔出血症诊治报告
- 2011年
- 兔出血症,俗称兔瘟,是由兔出血症病毒引起的以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的家兔烈性传染病。目前,该病可由兔出血症疫苗得到很好防控,但由于免疫程序不当、主观因素导致免疫失败等原因,该病呈零星散发态势,给发病兔场造成严重损失。2010年4月底,江苏溧阳市某兔场发生兔子连续死亡情况,与专家联系,初步判断为疑似兔出血症病例,后经诊断为兔出血症,立即进行兔出血症疫苗紧急免疫,从而避免该兔场发生大规模爆发和死亡。
- 徐鹏范志宇王芳胡波薛家宾魏后军
- 关键词：兔出血症兔场兔瘟紧急免疫烈性传染病兔病毒性出血症
- 兔出血症诊治病例被引量：2
- 2011年
- 兔出血症（rabbit hemorrhagic disease,RHD）俗称兔瘟,是由兔出血症病毒（rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV）引起的以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的烈性家兔传染病。目前,使用兔出血症疫苗后该病得到了很好防控,但由于免疫程序不适当或因主观因素不免疫疫苗等原因,该病呈零星散发态势,给发病兔场造成严重损失。
- 徐鹏范志宇王芳胡波薛家宾魏后军
- 关键词：兔出血症病毒病例诊治免疫疫苗VIRUS
- 家兔支气管败血波氏杆菌重组蛋白DNT1的原核表达及其间接ELISA方法的建立
- 2011年
- 目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)DNT蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌dnt基因序列(AB020025)针对其N-端设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷酸片段。将PCR扩增产物连接至原核表达载体pET-28a(+)载体中,以E.coli BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达,以纯化重组蛋白DNT1作为诊断抗原,通过探索最佳抗原包被量和抗体血清稀释倍数,建立检测支气管败血波氏杆菌重组蛋白DNT1抗体的ELISA方法。结果成功克隆了dntN-端的基因序列,并在E.coli BL21(DE3)中获得高效表达,经SDS-PAGE、Western blot分析显示重组蛋白DNT1具有良好的抗原性。应用重组蛋白DNT1为抗原建立了检测Bb血清抗体的间接ELISA诊断方法。试验确定重组蛋白DNT1抗原的包被浓度为6.25μg/mL,最适血清稀释度为1∶100。结论建立的ELISA检测方法,不仅为Bb抗体检测提供了一种比较实用的血清学检测手段,也为进一步开发Bb检测试剂盒奠定了基础。
- 赵宁恽时锋王芳范志宇胡波刘涛
- 关键词：支气管败血波氏杆菌原核表达间接ELISA
