植物病虫害生物学国家重点实验室开放基金(2007PD6)
- 作品数：4 被引量：30H指数：4
- 相关作者：张杰聂亚锋罗楚平刘邮洲刘永锋更多>>
- 相关机构：中国农业科学院植物保护研究所江苏省农业科学院南京农业大学更多>>
- 发文基金：植物病虫害生物学国家重点实验室开放基金江苏省农业科技自主创新基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 转座子诱变生防菌B-916及抗真菌活性相关基因克隆
- 生防枯草芽孢杆菌B-916对水稻纹枯病有很好的防治效果。本研究报道了1)采用转座子Tn10构建了B-916突变体库;以水稻纹枯病菌作为指示菌,从8500个突变株中筛选到3株拮抗性能降低的突变株;2)分析了突变株的生长特性...
- 罗楚平陈志谊刘永锋张杰刘邮洲王晓宇聂亚锋
- 关键词：枯草芽孢杆菌转座子功能基因
- 文献传递
- 生防菌Bs-916合成脂肽类化合物Bac操纵子突变株构建及功能被引量：9
- 2009年
- 生防枯草芽孢杆菌Bs-916对水稻纹枯病有很好的防治效果。【目的】明确其合成脂肽类化合物操纵子Bac功能,为遗传改良提高Bs-916防效奠定基础。【方法和结果】采用同源重组方法成功更换Bac内源启动子为组成性表达强启动子和插入失活Bac启动子,分别得到突变株BGG104和BGG105。突变株生物学活性测定结果表明:BGG104上清液相对Bs-916上清液对几种病原真菌毒力,血红细胞的溶血能力都显著提高;而BGG105则显著降低。采用6mol/L盐酸沉淀及甲醇抽提方法从Bs-916和突变株培养液中制备脂肽类化合物。反相HPLC结果表明Bs-916产生的脂肽类化合物与iturinA具有不同保留时间,BGG104培养液中脂肽类化合物量增加了3倍,BGG105培养液中未检测到脂肽类化合物峰。运用基质辅组解离质谱方法测得Bac合成的脂肽类化合物分子量分别为:1007.7Da、1021.7Da和1035.7Da;推测属于相差一个(—CH2)亚甲基同系物。【讨论】研究表明Bac编码多功能复合酶催化合成脂肽类化合物是Bs-916抗真菌活性关键因子,表达量提高可以增强其对多种病原真菌的毒力。
- 罗楚平陈志谊刘永锋张杰刘邮洲王晓宇聂亚锋
- 关键词：枯草芽孢杆菌操纵子突变株
- 枯草芽孢杆菌Bs916中脂肽抗生素Bacillomycin L的操纵子结构及生物活性被引量：14
- 2010年
- 【目的】明确枯草芽孢杆菌Bs916(Bacillus subtilis 916)分泌的脂肽化合物Bacillomycin L操纵子、结构和生物活性,阐明枯草芽孢杆菌Bs916防治病害的分子生化机制。【方法】采用LA-PCR和基因步行的方法克隆bacillomycin L的操纵子Bac;通过生物信息学的方法分析Bac操纵子的遗传特征;运用基质辅助解离质谱法测定Bac操纵子合成的脂肽类化合物bacillomycin L的分子量;利用碰撞诱导解离(CID)技术获得化合物的典型结构特征离子碎片测定bacillomycin L肽端的一级结构;通过平板对峙实验和溶血活性试验测定bacillomycin L的生物活性。【结果】克隆到全长约39.0kb的Bac操纵子,该操纵子由BacD、BacA、BacB和BacC4个多功能复合酶及1个启动子组成;生物信息学分析表明Bac操纵子与脂肽类化合物iturinA、mycosubtilin、bacillomycin D操纵子具有很高的同源性,然而也发现一段低同源性区域,该区域是一个新型Ser激活结构域。根据Bac操纵子特征推测Bac操纵子编码的脂肽类化合物可能是Bacillomycin L;Bac合成的脂肽类化合物的分子量分别为:1008,1022,1036和1050Da;推测属于相差一个(-CH2)亚甲基的同系物;脂肽化合物的一级结构为[cyclo-(Asn-Tyr-Asn-Ser-Glu-Ser-Thr-β-amino fattyacid)],该一级结构与以前报道的bacillomycin L的肽序列一致。生物活性测定结果表明其是一种生物表面活性剂,具有广谱抗真菌活性。【结论】本研究克隆了bacillomycin L的完整操纵子,并通过对操纵子生物信息学分析和生化试验鉴定了枯草芽胞杆菌Bs916分泌的脂肽bacillomycin L的化学结构,并阐明了生防菌Bs-916分泌的脂肽bacillomycin L是其抗真菌活性的关键因子。
- 罗楚平王晓宇陈志谊刘永锋张杰刘邮洲聂亚锋余俊杰尹小乐
- 关键词：枯草芽孢杆菌操纵子生物活性
- 枯草芽孢杆菌Bs-916胞外抗菌蛋白质的生物功能分析被引量：11
- 2008年
- 采用AKTA-epxlore层析系统,利用DEAE sepharose fast flow、Phenyl sepharose 6 F.F.和羟基磷石灰石柱层析后,分离纯化获得枯草芽孢杆菌Bs-916抗菌蛋白质Bacisubin。该蛋白质对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、水稻稻瘟病菌(Magnaporthe grisease)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、白菜黑斑病菌(Alternaria oleracea)、甘蓝黑斑病菌(A.brassicae)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici(syd.)Butl.)和水稻恶苗病菌(Fusarium moniliformeSheld)均有抑菌活性,尤其对Alternaria属的病原菌具有较高的毒力。枯草芽孢杆菌Bs-916胞外抗菌蛋白质的抑菌机制是造成病原菌菌丝营养吸收困难,致使菌丝顶端膨大,分支增加,胞壁加厚、断裂,从而抑制了病原菌的生长。研究发现抗菌蛋白具有凝集素活性和核糖核酸酶活性,无蛋白酶活性和蛋白酶抑制活性。
- 刘永锋张杰陈志谊周明国宋福平刘邮洲聂亚锋罗楚平
- 关键词：抑菌谱生物功能
