广东省自然科学基金(10151008901000071)
- 作品数：13 被引量：69H指数：4
- 相关作者：褚忠华来伟刘璐曾育杰伍衡更多>>
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- 肝再生磷酸酶-3和微小RNA17-92家族成员在结肠癌细胞中异常表达的意义被引量：3
- 2012年
- 目的探讨肝再生磷酸酶-3（PRL-3）和微小RNA17-92（miR-17-92）家族成员在结肠癌中异常表达的意义。方法构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC，用MicroRNA芯片筛查表达异常的促癌microRNA，从中选取miR-17-92家族成员miR-17、miR-19a行荧光实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）进行验证。在LoVo-PRL-3细胞中对STAT3信号传导与转录激活因子-3（STAT3）进行RNA干扰，检测miR-17、miR-19a的表达，在稳转细胞株中转染miR-17、miR-19a或对其进行敲除，用细胞计数试剂盒（CCK-8）、Tanswell试验对细胞增殖侵袭能力的变化进行研究。在13例患者结肠癌原发灶、转移灶及癌旁正常组织中行免疫组织化学及qRT-PCR检测PRL-3、pSTAT3和miR-17、miR-19a的表达。结果在结肠癌细胞株LoVo-PRL-3中miR-17、miR-19a的表达明显上调（P〈0．05），干扰STAT3可以抑制miR．17、miR-19a的表达。在LoVo-VC细胞中过表达miR-17、miR-19a促进了细胞的增殖（P〈0．05及P〈0．01）和侵袭（P〈0．01），而在LoVo-PRL-3细胞中敲除miR-17、miR-19a抑制了细胞的增殖侵袭（P〈0．05）。在结肠癌组织中PRL-3、pSTAT3和miR-17、miR-19a的表达呈正相关。结论PRL-3通过上调miR-17、miR-19a的表达在结肠癌细胞增殖侵袭中起到促进作用。
- 张建龙孙健何传超张贺云张育超褚忠华
- 关键词：结肠癌肝再生磷酸酶-3
- 蛋白酪氨酸磷酸酶-3通过诱导肿瘤性巨噬细胞钙离子依赖性钾离子通道表达增强LoVo细胞侵袭性被引量：2
- 2013年
- 目的观察结肠癌肿瘤微环境中肿瘤细胞与巨噬细胞（M2）相互作用及对肿瘤细胞功能学的改变。方法将转入蛋白酪氨酸磷酸酶．3（PRL-3）的LoVo细胞和M2细胞模拟肿瘤微环境进行共培养，通过Westernblot检测M2细胞钙离子依赖性钾离子通道（KCNN4）蛋白表达，并检测LoVo细胞侵袭性的改变。结果Westernblot检测示PRL-3能通过共培养后诱导M2细胞KCNN4蛋白表达升高，而未作共培养的M2细胞KCNN4蛋白表达未升高。此外，经过共培养后LoVo细胞侵袭性升高（3367±135比1442±89，P〈0．05），而在阻断KCNN4蛋白表达后，LoVo细胞侵袭性降低（1388±87比2893±163，P〈0．05）。结论PRL-3在结肠癌肿瘤微环境中通过提高KCNN4表达从而增强LoVo细胞的侵袭性。
- 许鹤洋刁飞宇曾育杰张旸来伟褚忠华
- 甲基强的松龙与地塞米松治疗腹部术后早期炎性肠梗阻的疗效对比被引量：3
- 2013年
- 目的比较甲基强的松龙(甲强龙)与地塞米松治疗术后早期炎性肠梗阻的疗效。方法回顾性分析2002年7月至2012年7月收治的66例炎性肠梗阻患者的临床资料,依据使用不同激素分为甲强龙组和地塞米松组,观察比较两组疗效及不良反应。结果66例患者均采用保守方法治愈,无中转手术病例。甲强龙组腹胀、腹痛缓解时间,肛门排气时间和治愈时间均少于地塞米松组,具有统计学差异(P<0.05)。结论甲强龙治疗术后早期炎性肠梗阻疗效优于地塞米松。
- 陆路许鹤洋褚忠华
- 关键词：地塞米松术后早期炎性肠梗阻
- 小分子干扰RNA干扰RhoGDI2基因表达对结肠癌细胞凋亡迁移的影响及其机制被引量：4
- 2012年
- 目的探讨小分子干扰RNA（siRNA）干扰RhoGD12基因的表达对结肠癌细胞株凋亡侵袭的影响及其机制。方法运用Westernblot和实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—qPCR）检测结肠癌细胞株LoVo、SW480、CaC02、DLD1、RKO、HT-29的RhoGD12表达。设计及合成RhoGD12 siRNA干扰序列，通过Lipofectamine“2000转染到筛选细胞，细胞分为干扰组和空白对照、阴性对照组；膜联蛋白V／碘化丙锭（Annexin V／PI）双染流式细胞仪检测细胞凋亡率，细胞划痕试验和Transwell实验检测细胞迁移能力，Westemblot检测上皮问质转化（EMT）相关E一钙黏蛋白（E—cadherin）／波形蛋白（Vimentin）、Snail转录因子表达水平。结果野生型人结肠癌细胞株RhoGDl2表达量由高到低依次是DLD1、HT29、RKO、CaC02、LoVo、SW480；LoVo细胞siRNA干扰后RhoGD12表达抑制率大于70％；干扰组、阴性对照组、空白对照组细胞凋亡率分别是（2．67±0．97）％、（2．45±0．74）％、（2．35±0．43）％（P〉0．05）；干扰组及对照组的细胞划痕24h愈合度分别是90％、50％（P〈0．05）；Tran．swell实验24h迁移细胞数目：干扰组为55．7±9．5，阴性对照组和空白对照组分别为25．1±8．6、32．3±12．9（P〈0．05）；siRNA后结肠癌细胞E—cadherin蛋白表达下调，Vimentin蛋白、Snail转录因子表达上调。结论结肠癌RhoGD12基因沉默可能通过引起EMT促进细胞迁移。
- 李守峰刘璐伍衡许鹤洋来伟褚忠华
- 关键词：小分子干扰RNA结肠癌上皮间质转化细胞迁移
- 肝再生磷酸酶-3-信号传导和转录激活子3-微小RNA21信号通路促进结肠癌细胞增殖侵袭的研究被引量：4
- 2012年
- 目的观察肝再生磷酸酶-3-信号传导和转录激活子3-微小RNA21（PRL-3-STAT3-miR-21）信号通路对结肠癌细胞增殖侵袭的作用。方法构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo、PRL-3和LoVo．VC，用荧光实时定量聚合酶链反应（RT—qPCR）检测稳转细胞株中miR-21的表达并在瞬时转染PRL-3的SW480及CaC02细胞中进行验证。用Westernblot法对PRL-3调控STAT3的表达进行检测，在LoVo-PRL-3细胞中对STAT3进行RNA干扰，检测miR-21的表达，在稳转细胞株中转染miR-21或对其进行敲除，用细胞计数试剂盒（CCK-8）、Transwell实验对细胞的增殖侵袭能力的变化进行研究。结果LoVo—PRL-3细胞在72、96h的增殖能力以及在Tran-swell实验24h后的侵袭能力要强于对照组LoVo—VC细胞（P〈0．01）。在结肠癌细胞株LoVo—PRL-3中pSTAT3、miR-21的表达明显上调，干扰STAT3可以抑制miR-21的表达（P〈0．05）。在LoVo—VC细胞中过表达miR-21促进了细胞的增殖侵袭（P〈0．01），而在LoVo-PRL-3细胞中敲除miR-21抑制了细胞的增殖侵袭（P〈0．05）。结论PRL-3-STAT3-miR-21信号通路在结肠癌细胞增殖侵袭中起促进作用。
- 张建龙张育超孙健何传超褚忠华
- 关键词：肝再生磷酸酶-3
- 腹部手术后早期炎性肠梗阻的诊治分析被引量：34
- 2017年
- 目的探讨腹部手术后早期炎性肠梗阻的临床特点,以及诊断和治疗分析。方法回顾性分析2005年7月至2015年7月收治的48例腹部外科手术后早期炎性肠梗阻患者的临床资料。结果 45例患者经胃肠减压,全胃肠外营养支持,应用肾上腺皮质激素、生长抑素和抗生素等非手术治疗痊愈,平均治疗时间为17.45 d。另3例患者分别于术后16、19、20 d保守治疗无效中转手术治疗,2例于术后出现肠瘘,其中1例患者于术后第9天死于严重腹腔感染。结论术后早期炎性肠梗阻应首选非手术治疗。手术治疗并发症多,疗效差。
- 陆路唐武来伟曾育杰褚忠华
- 关键词：炎性肠梗阻并发症
- 恶性肠梗阻的治疗进展被引量：2
- 2012年
- 恶性肠梗阻是指由恶性肿瘤引起的肠梗阻,通常是结直肠癌以及妇科恶性肿瘤晚期并发症。患者预后较差,平均生存期只有4～9个月。目前治疗恶性肠梗阻包括手术、置入可扩式支架、药物治疗,以及经皮内镜下胃造口和鼻胃管引流。除此之外,由于患者一般体质较差,还可给予肠外营养支持,不过该治疗效果存在争议。本文就目前恶性肠梗阻的多种治疗方案进行综合分析,并作一定的评估。
- 许鹤洋褚忠华
- 关键词：恶性肿瘤肠梗阻
- 蛋白质组学方法分析PRL-3功能相关蛋白被引量：6
- 2011年
- 目的蛋白质组学方法分析转染肝再生磷酸酶-3（PRL-3）后结肠癌细胞kVo的蛋白表达改变。方法构建绿色荧光蛋白载体PAcGFP—C3-PRL-3并转染至结肠癌细胞LoVo中，获得稳定表达GFP—PRL-3的结肠癌细胞LoVo—PRL-3。Westernblot检测转染后细胞的PRL-3表达。采用双向凝胶电泳（2-DE）分离LoVo—PRL-3细胞及转染空载体PAcGFP—C3的LoVo-Control细胞总蛋白，从中选取差异表达蛋白质点，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（MALDI-TOF-TOF-MS）鉴定差异表达的蛋白质。结果Westernblot结果显示PRL-3在LoVo—PRL-3细胞中高表达，而未检测到在LoVo—Control细胞中表达。通过双向凝胶电泳图谱分析发现20个差异蛋白质斑点，质谱成功鉴定出17种蛋白。与LoVo—Control细胞比较，10种蛋白在LoVo-PRL-3细胞中高表达，而7种蛋白在 LoVo—PRL-3细胞中表达降低。结论成功鉴定出PRL-3功能相关蛋白，为进一步研究PRL-3促进结直肠癌转移机制奠定基础。
- 关玉峰刘璐伍衡来伟李守峰褚忠华
- 关键词：结肠癌蛋白质组学肝再生磷酸酶-3
- 扭曲肉芝甲酯对人结肠癌LoVo细胞生长的抑制作用及其机制被引量：1
- 2012年
- 目的探讨扭曲肉芝甲酯抗结肠癌LoVo细胞增殖活性及其机制。方法将LoVo细胞随机分为对照组和处理组（10、30、50umol／L3个亚组）。对扭曲肉芝甲酯处理后LoVo细胞凋亡率、细胞周期、凋亡蛋白表达的改变进行定量分析。结果经10、30、50umol／L扭曲肉芝甲酯处理24h后，LoVo细胞凋亡率分别为（2．32±0．93）％、（11．03±0．14）％和（16．29±1．98）％，对照组凋亡率为（2．09±0．97）％，而50umol／L扭曲肉芝甲酯处理0、6、12、24h后凋亡率分别为（2．67±0．97）％、（5．08±1．03）％、（5．04±0．83）％和（13．50±1．16）％（P〈0．05）。荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变；扭曲肉芝甲酯在0、10、50及100umoL／L时将LoVo细胞抑制在G2／M期（9．53±3．97）％、（10．26±1．89）％、（11．36±2．56）％、（15．39±1．56）％（P〈0．05），该期的比例逐渐增高；Westernblot法结果显示扭曲肉芝甲酯处理后结肠癌kVo细胞的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-8、Caspase-3表达升高。结论扭曲肉芝甲酯以浓度依赖性和时间依赖性的方式抑制结肠癌LoVo细胞增殖，抑制细胞周期G2／M期，通过Caspase-8／Caspase-3来诱导细胞凋亡。
- 李守峰刘璐伍衡来伟曾育杰许鹤洋褚忠华
- 关键词：结肠癌细胞增殖脱噬作用
- 完全腹腔镜下直肠癌根治合并肝左叶转移癌规则左半肝切除被引量：1
- 2012年
- 目的总结腹腔镜下一期行直肠癌根治、前入路左半肝切除的适应症和手术技巧。方法分析我院一例直肠癌合并左肝多发转移的患者采用腹腔镜下直肠癌根治、规则性左半肝切除术。结果手术时间190min,术中出血300ml,无明显手术并发症,切口一期愈合。术后14d给予化疗。术后随访5个月,无局部复发、远处转移、及切口处肿瘤种植发生。结论一期行腹腔镜直肠癌根治合并左半肝规则切除,局限在单叶的肝多发转移灶行规则肝切除是安全可行的。
- 刘璐褚忠华王捷伍衡刁飞宇
- 关键词：腹腔镜直肠癌
