湖北省自然科学基金(2004ABA204)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 相关作者：宋宇虎林菊生陶璐薇黎培员朱冉旭更多>>
- 相关机构：华中科技大学中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗TGFβ1核酶以及嵌合型核酶的细胞外和肝星状细胞内活性鉴定被引量：2
- 2005年
- 大量研究表明转化生长因子β1参与细胞的多种生理和病理过程.为了研究TGFβ1在这些过程中的详细发病机制,设计了针对TGFβ1的非嵌合型锤头状核酶和U1小核RNA嵌合型核酶.鉴定非嵌合型锤头状核酶和U1小核RNA嵌合型核酶的胞外以及活化型肝星状细胞内的活性.核酶的胞外切割反应结果证实,非嵌合型核酶的胞外活性优于U1小核RNA嵌合型核酶.进一步研究发现,U1小核RNA嵌合型核酶在转染的肝星状细胞内可以高效下调TGFβ1的表达,且其胞内活性明显强于非嵌合型核酶.这些结果表明,抗TGFβ1的U1小核RNA嵌合型核酶不仅为TGFβ1在细胞的生理和病理过程中具体作用机制的研究提供一种有效的工具,而且有望为TGFβ1相关性疾病的治疗提供一个有效手段.
- 宋宇虎刘芳田德安薛秀兰刘南植吴小力林菊生金由辛
- 关键词：核酶锤头状核酶TGFΒ活性鉴定细胞外
- 死亡受体5与肝癌细胞凋亡的相关性被引量：9
- 2006年
- 目的探讨人死亡受体5(DR5)及其配体(TRAIL)和竞争性单克隆抗体(DR5mAb)对肝癌细胞凋亡的影响。方法采用半定量RT-PCR及Western blot法检测肝癌细胞株HepG2、SMMC7721和正常人肝细胞株LO2的DR5在mRNA和蛋白水平的表达含量。应用四甲基偶氮唑盐法测试细胞的生长曲线,以观察TRAIL和DR5mAb对肝癌细胞生长的抑制作用,并用流式细胞仪测定细胞的凋亡率。结果肝癌细胞株HepG2、SMMC7721的DR5高表达,正常人肝细胞株LO2的DR5低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌细胞的增殖率随着TRAIL浓度的增加而逐渐降低,但当TRAIL超过1000ng/ml时,肝癌细胞株的增殖率就不再下降;而肝癌细胞的增殖率随着DR5mAb浓度的增加而逐渐降低,呈现明显的剂量依赖关系。1000ng/ml TRAIL处理24h时,HepG2的凋亡率在14.74%±0.48%,继续增加TRAIL浓度,其凋亡率无显著改变;而同样剂量的DR5mAb处理24h时,HepG2的凋亡率高达52.45%±0.57%,明显高于前者(P<0.05)。同时发现,正常人肝细胞株LO2的增殖率随着TRAIL浓度的增加呈下降趋势,与PBS阴性对照组差异有统计学意义(P<0.05);而DR5mAb的浓度变化对人正常肝细胞株LO2无明显影响。结论死亡受体DR5在诱导肝癌细胞凋亡中起重要的作用;DR5mAb选择性地诱导肝癌细胞凋亡,对人正常肝细胞无诱导凋亡作用。
- 朱冉旭林菊生宋宇虎黎培员陶璐薇
- 关键词：死亡受体5肝肿瘤细胞凋亡
