国家自然科学基金(30570644)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：韩雅玲郭鹏赵聪颖江克文闫承慧更多>>
- 相关机构：沈阳军区总医院浙江大学医学院附属儿童医院浙江大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建被引量：1
- 2008年
- 背景:血管平滑肌的增殖是动脉粥样硬化及支架内再狭窄发生的重要机制,小鼠E1A激活基因阻遏子(Cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG)可以抑制血管平滑肌的增殖,成为心血管领域新的治疗靶点。目的:构建小鼠CREG小分子RNA干扰真核表达载体,下调小鼠细胞中CREG基因的表达。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-04/10在解放军沈阳军区总医院心血管研究所完成。材料:小鼠成纤维母细胞系(NIH3T3)由美国新泽西州Robert Wood Johnson医学院病理实验科李少华教授馈赠。方法:应用RNA干扰在线设计工具设计4对可与小鼠CREG基因cDNA结合的短发夹RNA。通过化学合成法合成并克隆至pEN_mH1c载体中,与目的载体pDS_hpEY进行LR重组得到4种表达不同shCREG片段的表达载体pDS_shCREGs。应用LipofectamineTM2000将pDS_shCREGs转染至小鼠NIH3T3细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。主要观察指标:应用反转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹分别检测CREG的沉默效率。结果:经酶切和DNA测序证实,4种重组pDS_shCREG载体中插入片段的序列正确。反转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹证实,4种稳定转染细胞中的CREG表达水平均有不同程度的下降,稳定转染pDS_shCREG1的细胞克隆中CREG基因mRNA和蛋白表达分别降低了87%和70%。结论:成功构建小鼠CREG基因真核干扰表达载体,使体外培养NIH3T3细胞中CREG蛋白表达明显降低。
- 郭鹏闫承慧郭亮康建韩雅玲
- 关键词：RNA干扰
- 神经发生在不同癫痫模型中的变化及其与癫痫发病的关系被引量：1
- 2010年
- 神经发生是特定脑区神经前体细胞产生新生神经元的持续过程。癫痫主要影响海马齿状回的神经发生。本文主要根据年龄段和发病缓急综述近几年文献,阐明不同癫痫模型在痫样发作后神经发生变化的差异。同时概述了癫痫脑内神经发生的一系列调节因素包括内源性和外源性因素,及其可能作用途径:影响前体细胞增殖、分化和新生细胞的迁徙。神经发生与癫痫发病机制密切相关,但其具体意义目前尚不明确,可能是一个潜在的癫痫治疗新靶点。
- 赵聪颖江克文
- 关键词：癫痫神经发生迁徙
