国家教育部博士点基金(20111106110030)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：刘虹李辙吕晓希米粟更多>>
- 相关机构：北京协和医学院药物研究所北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 优化宿主菌在重组系统中构建大容量天然噬菌体抗体库被引量：3
- 2013年
- 制备大容量天然噬菌体抗体库。从健康成人外周血和新生儿脐带血中提取淋巴细胞总RNA,反转录后PCR分别扩增抗体重链和轻链基因。将获得的基因片段通过overlap PCR连接为单链抗体基因(scFv),限制性内切酶酶切后连入pDAN5a载体中,连接产物转化大肠杆菌XL2-blue MRF’。与XL1-blue菌株相比,初级库库容增加了3.9倍。再将初级库噬菌体感染含有Cre重组酶的大肠杆菌BS1365,抗体基因在重组酶作用下发生同源重组,最终得到库容为1.7×1011的噬菌体抗体库。经检测,该抗体库多样性良好,利用该库可获得针对6种抗原的抗体。以上结果表明,应用XL2-blue MRF’作为抗体基因的转化宿主,提高了噬菌体抗体库的库容,获得的抗体库可用于下一步抗体药物的筛选。
- 孙巍林珩花芳胡卓伟
- 关键词：噬菌体展示抗体库宿主菌
- 中和IL-17A活性改善肺纤维化小鼠肺功能被引量：5
- 2013年
- 目的探讨中和细胞因子IL-17A能否改善肺纤维化小鼠的肺功能。方法小鼠随机分为4组,每组30只。假手术组小鼠注射等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS),BLM组气管内注射博来霉素(bleomycin,BLM)造成小鼠急性肺损伤诱导肺纤维化形成。造模后第14天、17天及21天尾静脉注射IL-17A中和性抗体进行治疗(IL-17Ab组),同时注射IgG为对照(IgG组)。造模后第28天,使用Flexivent肺功能检测系统,气管插管检测肺功能。结果中和IL-17A降低BLM导致的动物死亡(P<0.05);降低肺纤维小鼠的胶原沉积(P<0.01)和羟脯氨酸含量(P<0.01);增加肺纤维小鼠的深吸气量(P<0.05);降低气道阻力(P<0.01)和弹性阻力(P<0.01);恢复呼吸系统顺应性(P<0.01)。结论中和IL-17A能改善肺纤维化小鼠的肺功能,为特发性肺纤维化的治疗提供新思路。
- 刘虹李辙吕晓希米粟
- 关键词：肺纤维化肺功能
- 阻断IL-17A活化p50NF-κB抑制小鼠肺损伤引起的肺纤维化被引量：9
- 2012年
- 探讨阻断IL-17A对小鼠肺损伤后肺纤维化发生的预防作用及其机制。博来霉素造成小鼠肺损伤7天后给予抗IL-17A中和性抗体治疗,第14天取材。利用HE和天狼星红染色法观察肺组织炎症及胶原沉积情况;利用生化检测试剂盒检测肺组织中羟脯氨酸及肺泡灌洗液中胶原含量;利用Kaplan-Meier法统计小鼠生存率;利用ELISA方法检测肺泡灌洗液中IL-17A、TGF-β1、IL-13、IFN-γ表达水平;利用免疫印迹分析方法检测肺组织中p65NF-κB、p50NF-κB、COX-2、5-LOX、15-LOX的表达或活化。结果显示:与模型对照组比较,阻断IL-17A能够降低胶原沉积、减少羟脯氨酸及胶原含量、提高小鼠生存率,并能抑制炎症反应,降低IL-17A、TGF-β1、IL-13,升高IFN-γ、COX-2、5-LOX、15-LOX表达水平,抑制p65NF-κB活化但促进p50NF-κB活化。结果提示,阻断IL-17A能预防肺损伤后肺纤维化发生,其机制与促进p50NF-κB活化及其下游分子表达、抑制急性炎症转变为慢性炎症反应有关。
- 米粟李辙刘虹胡卓伟花芳
- 关键词：白细胞介素17A炎症肺损伤肺纤维化
- 治疗性抗体：炎性免疫性疾病治疗的新选择
- 2012年
- 治疗性抗体经历数十年的发展已经成为治疗人类疾病包括炎性免疫性疾病的主要药物。利用人源化或全人化技术制备单克隆抗体,降低了鼠源抗体在人体中的免疫原性,提高了抗体的生物活性及半衰期,并成功获得多种治疗性抗体。目前,使用治疗性抗体治疗的炎性免疫性疾病包括移植排斥、自身免疫病、自身炎症病及过敏性疾病。预期与炎症免疫相关的治疗性抗体将会有广阔的应用前景。治疗性抗体通过阻断配体或受体、调控受体、清除靶细胞或激活受体等机制发挥靶向治疗作用。通过基因工程手段改造抗体的Fc段来优化抗体的生物学功能,以及改造与抗原结合的结构域,能够生成新的疗效更高、副作用更少的抗体药物。
- 孙巍林珩花芳胡卓伟
- 关键词：炎症抗体药物
