博士科研启动基金(2013-06)
- 作品数：5 被引量：36H指数：4
- 相关作者：韦鑫王小利吴佳海尹文静冯娟更多>>
- 相关机构：贵州省农业科学院贵州阳光草业科技有限责任公司山西医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金贵州省农业科技攻关项目贵州省科技创新人才团队建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 过表达FaSAMDC基因提高黑麦草属植物的抗旱性和耐热性被引量：4
- 2017年
- 主要探讨了在黑麦草属植物中导入高羊茅S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因(FaSAMDC)对转基因植株抗旱耐热性的提高效果,为培育黑麦草抗旱耐热新品种提供种质新材料。选择黑麦草成熟种子为外植体,采用贵州省草业研究所分子生物学实验室构建的过表达载体以及黑麦草胚性愈伤组织高频植株再生和农杆菌介导的遗传转化体系,将克隆自高羊茅的FaSAMDC基因转入贵州地区主栽品种多花黑麦草特高和多年生黑麦草四季的基因组内,经抗性筛选、PCR检测和Southern杂交分析验证,获得45株特高与44株四季的转基因植株,转化频率分别为2.93%和2.28%。抗旱耐热试验表明,在30℃高温和中度干旱胁迫条件下,特高转基因株系的根冠比比对照组培苗高出7.08%,叶片相对含水量(RWC)比对照高出13.12%,RWC降低幅度比对照少5.49个百分点;四季转基因株系的根冠比比对照组培苗高出6.54%,RWC比对照高出12.54%,RWC降低幅度比对照少6.50个百分点,差异均达到显著水平(P<0.05),证明转入FaSAMDC基因的黑麦草阳性株系的抗旱耐热能力得到了明显提高。形态与生长特征观测结果显示,与非转基因组培苗相比,转基因株系的叶长、株高、主茎节数减小,叶宽、单株分蘖数增加,叶色变深,植株形状趋向于叶片丛生的紧凑型,推测导入的FaSAMDC基因参与了基因表达、细胞分裂等生理功能的调节。
- 曾庆飞韦鑫蔡一鸣舒健虹吴佳海王小利
- 关键词：黑麦草根癌农杆菌
- 多花黑麦草特高和多年生黑麦草四季高频组培再生体系的优化与建立被引量：8
- 2017年
- 对在贵州地区广泛种植的多花黑麦草特高(Lolium multiflorum‘Tetragold’)和多年生黑麦草四季(L.perenne‘Four seasons’)的成熟种子进行了愈伤组织诱导及植株再生的研究,建立了两个品种的胚性愈伤组织高频诱导与再生体系。结果表明,剥去成熟种子的颖壳,切除1/3胚乳端,将特高接种于CC+7mg·L^(-1) 2,4-D+0.5mg·L^(-1) 6-BA、四季接种于CC+5mg·L^(-1) 2,4-D+0.5 mg·L^(-1) 6-BA的培养基中,在明显降低组培污染率的同时,能分别得到65.52%和63.55%的最高愈伤组织诱导率;将两个品种诱导出的愈伤组织转移在MS+0.5 mg·L^(-1) 2,4-D+0.5mg·L^(-1) 6-BA+1.25mg·L^(-1) CuSO4+1.0g·L^(-1) CH的继代培养基上,能促进质量较好的Ⅱ型胚性愈伤组织的形成;根据后续转化试验所选用的植物表达载体pCAMBIA 1300的抗性特点,30~40mg·L^(-1)的潮霉素是两个品种愈伤组织最佳的筛选剂和临界浓度;特高的胚性愈伤组织接种在MS+2.0 mg·L^(-1) 6-BA+0.5 mg·L^(-1) NAA+0.1mg·L^(-1) TDZ的培养基上,可以产生86.37%的最高分化率,四季的胚性愈伤组织接种在MS+6.0 mg·L^(-1) 6-BA+0.3mg·L^(-1) NAA+5.0mg·L^(-1) KT的培养基上,能得到85.40%的最高分化率;生根培养基1/2MS+0.5 mg·L^(-1)NAA+0.5mg·L^(-1) IAA能让两个品种分化出的不定芽形成100%的生根率;以腐殖土∶蛭石∶砂壤土=1∶1∶1的混合材料作为营养土,能保证组培再生苗达到99%以上的成活率。优化建立的高频组培再生体系为下一步的遗传转化奠定了基础。
- 曾庆飞韦鑫陈锡陈光洁马培杰吴佳海王小利
- 关键词：培养基成分组培再生体系
- 不同材料金属烤瓷冠磁共振成像伪影的比较被引量：13
- 2014年
- 背景:口腔内有金属烤瓷冠的患者在进行磁共振成像检查时会形成伪影,但是在临床方面鲜见有关不同材料金属烤瓷冠在磁共振成像形成伪影的定量报道。目的:研究不同材料金属烤瓷冠在FSE T2WI序列中磁共振成像伪影的大小。方法:在核磁室收集需做磁共振成像检查且有右下颌第一磨牙烤瓷冠修复的患者48例,分为镍铬合金烤瓷冠组、钴铬合金烤瓷冠组及纯钛烤瓷冠组。采用1.5T MRI扫描仪对所有患者进行FSE T2WI扫描,观察同一序列不同材料金属烤瓷冠患者成像伪影的大小。结果与结论:选择金属修复体边界出现清晰的弧形高信号环带且可进行测量的样本共45例,每种材料各15例。不同材料的金属烤瓷冠患者在同一序列产生的伪影大小不同,镍铬合金烤瓷冠组、钴铬合金烤瓷冠组和纯钛烤瓷冠组的伪影分别为(321.67±33.29),(263.53±34.95),(143.67±31.13)mm2,3组间两两比较差异均有显著性意义(P<0.05)。表明3种临床常用的金属烤瓷冠修复材料中,纯钛烤瓷冠形成的伪影最小,镍铬合金烤瓷冠伪影最大。
- 冯娟李文晋牛金亮王慧敏尹文静
- 关键词：生物材料口腔生物材料镍铬合金烤瓷冠钴铬合金烤瓷冠FSE
- 高羊茅黔草1号SAMDC基因的克隆及植物表达载体的构建被引量：3
- 2015年
- 采用高保真平末端法从高羊茅"黔草1号"(Festuca arundinacea cv.Qiancao No.1)叶片c DNA中扩增S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因(SAMDC)序列。基因测序分析表明,扩增片段含有1 835个核苷酸,包含有9 bp的微型上游阅读框、147 bp的小型上游阅读框和1 185 bp的主阅读框。微型上游阅读框和小型上游阅读框存在一个碱基重叠,主阅读框编码395个氨基酸。整个克隆片段与Gen Bank上注册的高羊茅Fa SAMDC基因的核苷酸同源性为95.05%,编码氨基酸的同源性为98.22%。利用Kpn I和Pst I酶切位点将该片段插入到经贵州省草业研究所分子生物学实验室改造过的p CAMBIA1300植物表达载体的多克隆位点内,经琼脂糖凝胶电泳检测、酶切鉴定和序列测定,获得具有SAMDC基因和潮霉素抗性基因的适合于单子叶植物遗传转化的表达载体p CAM-SAMDC。通过冻融法将构建的重组质粒导入根癌农杆菌GV3101和EHA105感受态细胞中,并通过PCR反应对所获得的工程菌株进行鉴定,为进一步通过农杆菌介导法培养抗逆禾草新材料奠定了基础。
- 曾庆飞杨春燕李小冬吴佳海王小利
- 关键词：SAMDC基因克隆
- 贵州高原石漠化灌丛草地土壤真菌群落结构及多样性研究被引量：8
- 2015年
- 采集相同海拔高度四种不同石漠化程度的灌丛草地土样,以岩石缝玉米种植地为对照,分离提取土壤微生物DNA,分析各样品中的真菌多样性指数,并进行真菌群落结构相似性和系统发育分析。结果表明,潜在石漠化样品E和轻度石漠化样品D真菌群落的香浓指数(H)与丰富度指数(S)均明显大于中度石漠化样品C、重度石漠化样品B和对照样品A(P<0.05),而且样品B与样品C的PCR-DGGE图谱相似性较高,样品D与样品E的图谱相似性最大,在系统树状图(UPGMA)中分为2大族群,表明土壤石漠化程度的强弱与真菌群落的复杂度和丰富度均呈负相关关系。在系统发育分析中,12个条带的测定序列聚成了12个分支,揭示灌丛草地土壤的石漠化进程同时伴随着土壤真菌群落结构逐渐演替的过程,不同石漠化程度灌丛草地的土壤真菌存在着群落结构的差异性和遗传背景的多态性。
- 曾庆飞陈莹杨春燕刘正书罗绍薇吴佳海
- 关键词：灌丛草地土壤真菌
