江苏省科技攻关计划(BE2001372)
- 作品数：5 被引量：104H指数：4
- 相关作者：何孔旺陆承平马清霞王继春吕立新更多>>
- 相关机构：南京农业大学江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省科技攻关计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪链球菌病双重PCR诊断方法的建立被引量：11
- 2007年
- 根据猪链球菌2型荚膜多糖和马链球菌兽疫亚种类M蛋白的保守区序列分别设计了2对简并引物,建立了一种能同时检测猪链球菌2型和马链球菌兽疫亚种的双重PCR方法。结果显示,该双重PCR能从100个细菌的混合纯培养物中扩增出2条目的片段。而且可以直接从病料组织中检测到相应的病原菌。用建立的双重PCR方法和细菌分离培养法平行检测人工感染的组织病料,PCR方法与细菌培养法的阳性检出率基本一致,但PCR方法的特异性好、敏感性高,简便易行,可以用于猪链球菌病的流行病学调查和实验室的快速鉴别诊断。
- 马清霞何孔旺陆承平
- 关键词：猪链球菌2型马链球菌兽疫亚种双重PCR
- 猪链球菌2型SS_2-1和SS_2-H株的培养稳定性检测被引量：1
- 2002年
- 将猪链球菌 2型制苗候选菌株SS2 1和SS2 H在血平板上连续传代至第 41代 ,并分别检测第 1代、第 11代、第2 1代、第 3 1代和第 41代菌株的菌落及细菌形态、生化特性、溶菌酶释放蛋白 (MRP)和胞外因子 (EF)等指标。结果 ,从第1代至第 41代 ,2株细菌的菌落及细菌形态、生化特性、MRP和EF均没有发生变异。这表明SS2 1和SS2 H菌株培养稳定性较好 ,使用限定代次至少可达 41代 。
- 倪艳秀何孔旺何家惠王继春俞正玉侯继波吕立新
- 关键词：链球菌2型传代
- 猪链球菌2型及其毒力因子检测多重PCR的建立与应用被引量：27
- 2006年
- 根据相关文献设计并合成引物,建立了能同时检测猪链球菌2型(cps)及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白(mrp)和细胞外因子(epf)的多重PCR方法。目的片段的大小分别为885bp(mrp)、675bp(cps)和443bp(epf)。对参考菌株、人工攻毒病料和临床收集病料的检测结果显示,该多重PCR特异性强、敏感性高,可直接从临床病料中检测出猪链球菌2型,并能鉴定其毒力因子表型。
- 马清霞何孔旺陆承平
- 关键词：猪链球菌2型毒力因子多重PCR
- 猪链球菌2型的分子流行病学研究被引量：68
- 2002年
- 目的 了解猪链球菌 2型高发地区 (疫区 )与少发地区 (非疫区 )猪群的带菌率及其毒力因子MRP与EF的分布情况 ,探讨猪链球菌 2型的发生及其流行规律。方法 分别从不同地区采集正常屠宰猪或活体采集成年猪扁桃体 ,经接种马丁汤培养基增菌培养后 ,用PCR方法进行 2型猪链球菌的检测 ,同时检测各 2型菌的主要毒力因子溶菌酶释放蛋白 (MRP)与细胞外蛋白因子 (EF)基因 (mrp和epf)。 结果 除少数猪群外正常猪群中猪链球菌 2型的带菌率普遍较高 ,为 31 6 %～77% ,平均为 4 0 9% ,且疫区 (39% )与非疫区 (42 % )差异不明显。但毒力因子mrp和epf的阳性率疫区与非疫区存在明显差异 ,非疫区的 2型菌株除极少数表现为mrp+ epf-(5 % )或mrp-epf+ (5 % )外 ,绝大多数 (90 % )都表现为对猪无毒力的mrp-epf-表现型 ,无一株表现为mrp+ epf+ ;来自疫区的所有 16株 2型菌株均为对猪有强毒力的mrp+ epf+ 表现型。结论 正常猪群中 2型猪链球菌的带菌率与猪群是否暴发流行该病可能并无直接关系 ,但疫区猪群mrp+ epf+ 表现型菌株检出比率较高 ,提示携带mrp+ epf+
- 何孔旺倪艳秀王继春何家惠王伟峰杨瑛陆承平林继煌
- 关键词：猪链球菌2型MRPPCR流行病学
- 2种猪源链球菌对猪、兔的致病性试验被引量：6
- 2005年
- 检测了4株猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2, SS2)和2株马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp. zooepidemicus, SEZ)对猪、兔的致病性.SS2-1、SS2-H及SS2-006444株均分离自发病猪内脏,前2株毒力因子表现型为MRP+EF+SLY+,后者为MRP-EF-SLY-;SS2-D株为国外引进的SS2人源株,作为对照,其毒力因子的表现型为MRP+EF·SLY+;SEZ-CY和SEZ-CN株均分离自发病猪并经鉴定.SS2-1、SS2-H、SEZ-CY和SEZ-CN株对猪(2～3头/组)的最小致死量分别为106、107、104和108 cfu;对兔(2～3只/组)的最小致死量分别为100～1 000、1 000、 100和105 cfu;SS2-D株108 cfu对猪不致死,对兔的最小致死量为108 cfu,而SS2-006444对猪、兔无致病性.显示SS2毒力因子与其对猪、兔的致病性有关;SS2与SEZ菌株对兔或猪的致病性一致,可用兔取代猪做试验;SS2和SEZ菌株通过腹腔、皮下、肌肉或静脉注射均可感染兔(2～4只/组),并致死,SEZ还可经口、鼻感染;SEZ与SS2静脉感染猪后10 min即可检出细菌,此后2～4 h为无菌血症阶段,之后重新出现.
- 王继春何孔旺陆承平
- 关键词：猪链球菌2型马链球菌兽疫亚种毒力因子
