教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-10-0964)
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
- 相关作者：左亚刚刘冰孙秋宁铁·杜尔娜晋红中更多>>
- 相关机构：北京协和医院北卡罗来纳大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗BP180N C16A IgG亚型检测方法的建立以及在大疱性类天疱疮中的意义被引量：3
- 2012年
- 目的建立抗BP180NC16A IgG亚型的检测方法，并探讨其在大疱性类天疱疮（BP）中的意义。方法原核表达GST—NC16A融合蛋白，并采用亲和层析法纯化。优化ELISA关键环节，建立抗BP180NC16AIgG各亚型的ELISA检测方法，并对10例未经治疗的BP、5例妊娠疱疹、1例成人线状IgA大疱性皮病、2例天疱疮患者血清分别进行检测。结果通过方阵测定法确定GST—NC16A融合蛋白的包被浓度为500μg／L，包被条件为4℃12h，血清稀释倍数为1：100，酶标二抗为1：2000，孵育条件为37℃1h，底物反应条件37℃20min。10例大疱性类天疱疮患者10例IgG1阳性，9例IgG2阳性，5例IgG3阳性，9例IgG4阳性。2例寻常型天疱疮、1例成人线状IgA大疱性皮病均阴性。5例妊娠疱疹所有亚型均阳性，以IgG1和IgG3亚型为主。结论抗BP180NC16AELISA检测法特异性强、重复性好，是检测BP和妊娠疱疹患者抗BP180NC16A抗体亚型的半定量方法。
- 左亚刚LIU Zhi
- 关键词：免疫球蛋白G酶联免疫吸附测定
- 大疱性类天疱疮和妊娠疱疹患者血清抗BP180NC16A抗体的纯化和鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的 探讨大疱性类天疱疮（BP）和妊娠疱疹（HG）患者血清抗BP180 NC16A抗体的纯化和鉴定方法.方法 原核表达系统pGEX-2TBP180NC16A表达GST/NC16A融合蛋白,将融合蛋白与谷胱甘肽琼脂糖凝聚微珠进行共价偶联.微珠亲和层析法纯化BP和HG患者血清中抗BP180 NC16A抗体,并用ELISA、免疫荧光、及Western印迹进行鉴定.结果 原核表达系统pGEX-2TBP180NC16A表达37 000GST/NC16A融合蛋白,微珠亲和层析法纯化后得单一抗BP180 NC16A抗体.经ELISA方法定量后确定其含量为2.4 mg/ml；该抗体能与人皮肤基底膜带结合,证明抗体活性；免疫印迹可见单一片段,显示抗体纯度.结论 微珠亲和层析法纯化的BP和HG患者血清中抗BP180 NC16A自身抗体活性高、特异性强.
- 左亚刚LIUZhi
- 关键词：类天疱疮大疱性BP180
- 大疱性类天疱疮患者血清抗BP180NC16A IgG抗体亚型检测被引量：2
- 2013年
- 目的建立并优化大疱性类天疱疮（BP）抗BP180NC16A IgG抗体亚型的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法，评估其敏感性和特异性。方法通过在大肠杆菌中表达并纯化GSTBP180NC16A重组蛋白，建立抗BP180NC16A IgG亚型的ELISA检测方法，检测2009至2012年北京协和医院136例BP患者血清中抗体水平，以20名健康体检者血清作为对照；阳性界值为健康对照血清测得的均值加3倍标准差，高于该界值的判断为阳性。并利用Western印迹法检测其中4种抗体均阳性的患者血清，和ELISA方法进行比较。结果ELISA法检测的特异性IgGl、IgG2、IgG3和IsG4的阳性界值分别为0．113、0．196、0．154和0．120，20名健康对照4种IgG亚型检测值均低于阳性界值水平，使本检测方法特异性较好。136例患者抗BP180NC16AIgG1、IgG2、IgG3及IgG4抗体亚型阳性率分别为67．6％（92／136）、45．6％（62／136）、50．7％（69／136）和54．4％（74／136）；其中4种IgG亚型均阳性者29例，占21．3％；至少一种IgG亚型为阳性者112例，占82．4％，即4种亚型综合敏感度为82．4％。而Western印迹检测20例经ELISA证实4种IgG亚型抗体均阳性的患者血清显示IgG1和IgG4阳性人数分别为15、14例。结论本研究建立的ELISA方法的特异性较好，敏感性尚需进一步提高。
- 周细平左亚刚刘冰何春霞刘跃华
- 关键词：类天疱疮大疱性酶联免疫吸附测定免疫球蛋白G
- 大疱性类天疱疮患者血清总IgE变化规律及与病情的相关性被引量：4
- 2012年
- 目的探讨大疱性类天疱疮(bullous pemphigoid,BP)患者血清中总IgE变化规律以及与BP病情的相关性。方法收集北京协和医院皮肤科住院及门诊就诊的有完整临床资料的BP患者59例,对其血清总IgE在治疗前后的变化规律进行总结,并对血清总IgE与皮质类固醇激素应用最大剂量、嗜酸性粒细胞总数及间接免疫荧光滴度间的相关性进行分析。结果 59例BP患者中,53例(89.83%)血清总IgE升高,治疗后患者病情好转后IgE下降,但多不能恢复到正常水平。BP患者总IgE水平与激素应用的最大剂量、嗜酸性粒细胞数量、间接免疫荧光滴度均无相关性(P>0.05)。结论 BP患者血清中总IgE水平明显升高,但BP病情好转后IgE不能恢复正常,IgE水平与BP病情严重程度无关。
- 刘冰左亚刚李军
- 关键词：大疱性类天疱疮IGE嗜酸性粒细胞皮质类固醇间接免疫荧光
- 嗜酸性粒细胞水平与大疱性类天疱疮激素应用剂量间的关系被引量：11
- 2012年
- 目的探讨外周血嗜酸性粒细胞(EOS)水平与大疱性类天疱疮(BP)激素应用剂量间的关系。方法对82例门诊(33例)和住院(49例)的未经任何治疗的BP患者进行回顾性分析,记录BP治疗所需激素量及治疗前后外周血EOS的数量,评价EOS水平与激素应用剂量间的相关性。结果 82例初发BP患者中,EOS增高者69例(84.15%),与正常对照(10%)相比,差异具有统计学意义(t=1.99,P<0.001);44例BP患者住院后经激素治疗,病情控制前EOS一直处于较高水平,病情控制后EOS很快恢复正常,EOS数量与病情严重程度一致。经Spearman相关分析显示,EOS水平和激素治疗的最大剂量间具有直线相关性(r=0.496,P<0.001)。5例患者应用非激素疗法,治疗后EOS水平随病情好转亦随之下降。结论 EOS水平可作为激素应用剂量的参考指标之一。
- 左亚刚刘冰李丽晋红中孙秋宁
- 关键词：大疱性类天疱疮嗜酸性粒细胞病情严重程度
- 副肿瘤性类天疱疮的研究进展被引量：3
- 2013年
- 大疱性类天疱疮与恶性肿瘤之间存在相关性，其相关恶性肿瘤类型包括血液系统肿瘤、前列腺癌、胃癌等，大部分恶性肿瘤出现在大疱性类天疱疮皮损之时或之后。副肿瘤性类天疱疮发病机制尚不清楚，治疗与经典大疱性类天疱疮有一定区别，患者皮损随着肿瘤的控制与治愈而好转。因此，临床中应注意大疱性类天疱疮患者可能伴发的恶性肿瘤，做到早发现早诊断早治疗，提高患者生命质量。
- 铁·杜尔娜左亚刚
- 关键词：肿瘤
- 大疱性类天疱疮与瘢痕性类天疱疮
- 2013年
- 通过大疱性类天疱疮与瘢痕性类天疱疮之间的比较，发现大疱性类天疱疮与瘢痕性类天疱疮之间存在相关性，表现在好发人群均为老年人、存在相同致病抗体、两者可同时合并肿瘤、间接免疫荧光显示致病抗体沉积在表皮侧等方面。近年来生物制剂如抗CD20抗体利妥昔等应用于大疱性类天疱疮与瘢痕性类天疱疮的临床治疗，具有一定疗效。瘢痕性类天疱疮的黏膜受累机制与大疱性类天疱疮180及层粘连蛋白332等自身抗体有关，发病机制尚待进一步研究。
- 铁·杜尔娜左亚刚
- 关键词：类天疱疮大疱性类天疱疮
- 抗BPl80NCl6AIgEELISA检测方法的建立被引量：1
- 2013年
- 目的建立抗BPl80NCl6AIgE抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法，评价其在大疱性类天疱疮（BP）诊断中的意义。方法采用pGEX一2T原核表达GST—BPl80NCl6A融合蛋白，并用谷胱甘肽亲和层析法进行纯化。采用棋盘滴定法确定抗原包被浓度，明确二抗及待测标本最佳稀释度，确定最佳实验条件。对2011年2月至2012年10月就诊于北京协和医院的56例BP患者、24名健康对照以及18例天疱疮、1例Stevens—Johnson综合征（SJS）患者血清进行检测，根据受试者工作特征（ROC）曲线确定最优阳性界值并评价其敏感度和特异度。结果确定抗原包被浓度为500μg/ml、酶标二抗最佳稀释倍数为1：1000，血清标本采用原液及1：10为最佳实验条件。根据ROC曲线判断最优阳性界值为0．549，实验的敏感度为71．4％、特异度为100％。天疱疮和SJS患者血清中此抗体均为阴性。结论抗BPl80NCl6AIgE抗体检测方法具有较高的特异度以及相对较高的敏感度，在BP的诊断及发病机制的研究中具有重要意义。
- 刘冰左亚刚周细平何春霞李军铁·杜尔娜李丽孙秋宁
- 关键词：类天疱疮大疱性免疫球蛋白E酶联免疫吸附测定
- 药物诱发大疱性类天疱疮被引量：8
- 2012年
- 药物诱发大疱性类天疱疮是一种由于系统及局部用药诱发的以水疱大疱为主要表现的自身免疫性疾病。其诱导药物种类繁多，包括抗生素、利尿剂、血管紧张素转化酶抑制剂等。其发病机制尚不完全清楚，但与经典的大疱性类天疱疮不同，各种药物导致疾病发生的机制亦不完全相同。本病与经典大疱性类天疱疮在临床表现方面有一定区别，但实验室检查相似。因此，临床中应注意大疱性类天疱疮患者潜在的药物诱发因素，并及时停用诱发或可疑药物。
- 刘冰左亚刚
- 关键词：药用制剂
- 大疱性类天疱疮合并结核感染4例及文献复习被引量：5
- 2012年
- 目的探讨大疱性类天疱疮(bullous pemphigoid,BP)合并结核杆菌感染的临床、实验室和诊治特点。方法回顾性分析1990年1月至2012年4月北京协和医院皮肤科4例住院的有完整记录的BP合并结核杆菌感染患者的临床资料,总结其诊治规律。结果 4例患者中3例结核菌素(purified protein derivative,PPD)试验阴性,1例阳性。4例患者的嗜酸性粒细胞水平明显升高,且与病情相平行。3例患者采用皮质类固醇激素和利福平为主的三联抗痨药,1例采用异烟肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺和皮质类固醇激素治疗;2例皮质类固醇激素剂量超过180mg/d。3例患者皮损全部消退,结核感染得到控制。2例静脉点滴人免疫球蛋白有短期疗效。结论对于长期应用皮质类固醇激素的BP患者仔细筛查潜在的结核感染至关重要。在皮质类固醇激素应用患者中,PPD试验可出现假阴性。为此,若同时应用皮质类固醇激素与利福平,皮质类固醇激素的剂量应增加一倍以上。此外,人免疫球蛋白也是治疗BP合并结核感染的一种较好方法 。
- 左亚刚晋红中王宏伟乔菊刘跃华刘洁孙秋宁王家璧
- 关键词：类天疱疮大疱性结核
