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国家公益性行业科研专项(2012AA100505)
作品数:
1
被引量:5
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相关作者:
扈荣良
米立娟
赵雪超
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张学炜
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赵雪超
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米立娟
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扈荣良
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中国畜牧兽医
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2013
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狂犬病病毒BD-06株基质蛋白的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备
被引量:5
2013年
本研究旨在获得抗狂犬病病毒M蛋白的多克隆抗体,为进一步研究M蛋白功能提供材料。本试验以狂犬病病毒BD06毒株为模板克隆M基因序列,将其克隆至原核表达载体pET28a;经酶切和测序鉴定,M蛋白基因序列已正确插入表达载体pET28a;以表达载体pET28a-M转化E.coli Rosetta株,并以0.5mmol/L IPTG诱导,结果表达出27ku左右的M蛋白;将诱导表达的蛋白质回收纯化,以纯化的M蛋白多次免疫兔子制备多克隆抗体;Western blotting分析和间接免疫荧光分析结果表明,制得的抗体与病毒能够反应,运用制得的多克隆抗体定位了基质蛋白在感染狂犬病病毒的BHK-21细胞中的位置。结果表明成功制得了抗狂犬病病毒M蛋白的多克隆抗体,为研究狂犬病病毒M蛋白功能奠定了基础。
赵雪超
张学炜
张守峰
刘晔
米立娟
扈荣良
关键词:
狂犬病病毒
M蛋白
原核表达
多克隆抗体
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