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国家自然科学基金(30907843)
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陈宓
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RNA干扰CD133基因对结肠癌干细胞生物学行为的影响
2011年
目的探讨CD133基因表达、活化被阻断后对结肠癌干细胞生物学行为的影响。方法从EpCAM^(high)CD44^+结肠癌干细胞中流式分选获得CD133+细胞,感染LV-CD133shRNA载体慢病毒后观察CD133+结肠癌干细胞在生长方式、成球能力、克隆形成率、成瘤能力以及ABCG2 mRNA的变化;Western blot分析CD133^-细胞中CD133蛋白表达情况。结果 EpCAM^(high)CD44^+结肠癌干细胞中CD133^+细胞比例为89.2%。实验组经过LV-CD133shRNA载体病毒感染后,在干细胞养液中细胞改悬浮生长的方式为贴壁生长,不能形成细胞球。MTT法测定发现细胞增殖减慢,克隆形成率明显下降。将感染细胞移植在Balb/C裸鼠体内,在观察期间,感染LV-CD133shRNA载体病毒的CD133^+细胞无肿瘤形成。ABCG2 mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。从EpCAM^(high)CD44^+结肠癌干细胞中流式分选获得CD133^-细胞,其中也有CD133蛋白的表达。结论 CD133维持结肠癌干细胞生物学特性。
艾亮
刘美
陈宓
李少林
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结肠癌干细胞
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RNA干扰
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