辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2009A729)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：梁健郭大伟张弘彬侯学忠朱磊更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第四医院中国人民解放军更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- BDNF和TrkB在肝细胞癌中的表达及其功能研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究BDNF及其受体TrkB在人肝细胞癌(HCC)中的表达,并探讨二者在HCC发生、发展中的作用。方法:采用免疫组织化学方法检测BDNF和TrkB在65例HCC组织中的表达。在人HCC细胞系HepG2中,采用ELISA方法检测BDNF在培养上清中的分泌水平,分别采用流式细胞术和Transwell细胞侵袭方法测定BDNF中和抗体或TrkB激酶活性抑制剂K252a处理对细胞凋亡和侵袭的影响。结果:65例HCC组织标本中,41例(63.1%)高表达BDNF,36例(55.4%)TrkB阳性表达,而且BDNF高表达于多发性HCC(P<0.01),TrkB阳性率在多发性HCC中较高(P<0.05)。此外,BDNF高表达和TrkB阳性均与晚期HCC显著相关(P均<0.05)。BDNF在HepG2细胞培养上清中的浓度为(88.56±7.45)pg/mL。BDNF抗体或K252a均可有效诱导HepG2细胞凋亡,并抑制细胞侵袭。结论:BDNF/TrkB可能对HCC细胞的存活和侵袭具有重要的支持作用,并促进HCC的发展演进。
- 郭大伟侯学忠张弘彬孙文郁朱磊姜晓峰梁健
- 关键词：脑源性神经营养因子肝细胞癌凋亡
- 斑蝥酸钠维生素B6诱导肝癌细胞HepG2凋亡的实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨斑蝥酸钠维生素B6与人肝癌细胞HepG2凋亡的关系。方法采用MTT法动态观察不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6对HepG2细胞生长的抑制率,采用流式细胞术分析不同浓度斑蝥酸钠维生素B6作用下HepG2细胞的凋亡率,荧光显微镜观察HepG2细胞凋亡的形态学改变。结果斑蝥酸钠维生素B6可明显抑制HepG2细胞生长及诱导细胞凋亡(P<0.05),且基本随着其浓度的增加以及作用时间的延长,抑制率及凋亡率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05),提示斑蝥酸钠维生素B6对HepG2细胞生长的抑制效应及诱导凋亡作用具有浓度依赖性和时间依存性。荧光显微镜下可见经斑蝥酸钠维生素B6处理后的HepG2细胞具有明显的凋亡形态学改变。结论斑蝥酸钠维生素B6可能通过诱导凋亡的途径抑制人肝癌细胞HepG2的生长。
- 赵航宇梁健
- 关键词：斑蝥素斑蝥酸钠维生素B6凋亡
- 脑源性神经营养因子及其受体原肌球蛋白相关激酶B在肝癌组织中的表达以及对肝癌细胞97-H凋亡和侵袭作用的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:研究脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体原肌球蛋白相关激酶B(Tropomyosin-related kinase B,TrkB)在人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,并探讨2者在HCC发生、发展中的作用。方法:采用蛋白质印迹法检测BDNF和TrkB蛋白在30例HCC和癌旁组织中的表达情况。采用ELISA法检测BDNF在人HCC细胞系97-H培养液上清中的浓度;FCM和Transwell小室法分别检测抗BDNF抗体或TrkB激酶活性抑制剂K252a对细胞凋亡和侵袭的影响。结果:30例配对组织标本中,BDNF和TrkB在HCC组织中的表达水平高于癌旁组织(P均<0.05)。BDNF在97-H细胞培养液上清中的表达量为(119.08±6.21)pg/mL。抗BDNF抗体或K252a都能有效诱导97-H细胞的凋亡,并抑制细胞的侵袭能力。结论:BDNF/TrkB可能对HCC细胞的存活和侵袭具有重要的支持作用,并促进HCC的发生及发展。
- 郭大伟刘武孙文郁朱磊张弘彬侯学忠姜晓峰梁健
- 关键词：脑源性神经营养因子肿瘤转移
- BDNF表达下调抑制HepG2细胞侵袭的相关分子机制研究
- 2012年
- 目的:应用特异性siRNA下调HepG2细胞中BDNF表达,观察对细胞凋亡和侵袭的影响并探讨相关分子机制。方法:在人HCC细胞系HepG2中,采用Western blot方法检测BDNF的表达,采用ELISA方法检测培养液上清BDNF的分泌水平。特异性BDNF-siRNA转染细胞,采用FITC-phalloidin染色方法检测actin细胞骨架的变化,采用Western blot方法检测细胞内RhoA、Rac1、Cdc42的活化情况。同时,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室测定细胞侵袭能力的变化。结果:HepG2细胞培养上清中BDNF含量为88.56±7.45 pg/ml。在HepG2细胞中,特异性BDNF-siRNA显著抑制BDNF的表达,干扰细胞内actin细胞骨架聚合,RhoA或Rac1活性受到抑制,同时凋亡细胞数增加、细胞侵袭能力下降。结论:干扰BDNF的表达可以显著抑制细胞侵袭能力,这可能与阻断actin细胞骨架聚合、以及RhoA或Rac1活化相关。BDNF/TrkB信号通路可能作为阻断HCC发展演进的新靶点,有待于进一步深入研究。
- 郭大伟侯学忠孙文郁朱磊张弘彬姜晓峰梁健
- 关键词：BDNFRHOGTPASE
- 干扰BDNF表达对97-H细胞侵袭影响及其机制的探讨被引量：2
- 2012年
- 目的:应用特异性小干扰RNA(siRNA)下调97-H细胞中脑源性神经生长因子(BDNF)表达,观察对细胞凋亡和侵袭的影响并探讨相关分子机制。方法:在人肝细胞癌(HCC)细胞系97-H中,采用蛋白质印迹法检测BDNF的表达,采用ELISA方法检测培养上清上BDNF的分泌水平。特异性BDNF-siRNA转染细胞,采用FITC-phalloidin染色方法检测actin细胞骨架的变化,采用western blot方法检测细胞内RhoA、Rac1、Cdc42的活化情况。同时,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室测定细胞侵袭能力的变化。结果:97-H细胞培养上清中BDNF含量为(119.08±6.21)ρg/mL。在97-H细胞中,特异性BDNF-siRNA显著抑制BDNF的表达,干扰细胞内actin细胞骨架聚合,RhoA或Rac1活性受到抑制,同时与对照组相比,凋亡细胞百分比增加至(27.00±1.71)%,P=0.000,侵袭细胞数减少至(26.9±1.6)%,P=0.000。结论:干扰BDNF的表达能显著降低HCC细胞侵袭能力,其机制可能与阻断actin细胞骨架聚合、以及RhoA或Rac1活化相关。BDNF信号通路可能作为阻断HCC发展演进的新靶点,有待于进一步深入研究。
- 郭大伟姜晓峰孙文郁朱磊张弘彬侯学忠梁健
- 关键词：神经生长因子类细胞骨架细胞培养
