教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-07-0378)
- 作品数：6 被引量：34H指数：2
- 相关作者：堵国成陈坚李江华张东旭刘龙更多>>
- 相关机构：江南大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家重点基础研究发展计划江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 恒细胞密度发酵策略提高重组毕赤酵母生产碱性果胶酶的表达效率被引量：2
- 2012年
- 为了提高重组毕赤酵母生产碱性果胶酶(Alkaline polygalacturonate lyase,PGL)的比速率,开发了一种新的恒细胞密度发酵策略。通过不同的甲醇流加方式,实现发酵过程细胞密度的合理控制。实验结果表明:控制细胞密度为75 g/L的策略为最优,最终单位发酵液体积生产强度和单位菌体生产强度为6.11 U/(mL.h)和81.5 U/(g.h),分别比传统高密度发酵提高了42.1%和191.2%,最终PGL酶活为441.9 U/mL。此外,该策略还具有提高细胞活性和降低蛋白酶降解作用等优势。
- 王辉林李江华刘龙宋江宁堵国成
- 关键词：重组毕赤酵母细胞密度分批补料培养
- 添加保护剂促进碱性果胶酶的工业保藏稳定性被引量：1
- 2012年
- 保藏稳定性对于商品酶具有重要的实际意义。通过对碱性果胶酶的保护剂进行研究,最终筛选得到最优复合保护剂配方为:Tween 20 1 mL/L,六偏磷酸钠1.5 g/L,明胶5g/L,甘油5%(v/v),CaCl_2 2g/L;热稳定性提高18倍。此外在常温保藏时,在酶液中添加0.3‰山梨酸钾和0.3‰苯甲酸钠,能有效提高保藏效果,减少酶液染菌、混浊和发臭,最终常温保藏90 d后酶活保留率为84.5%,达到工业化保藏的要求。
- 王辉林李江华刘龙堵国成陈坚
- 关键词：碱性果胶酶稳定性保护剂防腐剂
- 混合碳源流加对重组毕赤酵母生产碱性果胶酶的影响被引量：13
- 2009年
- 为提高重组毕赤酵母生产碱性果胶酶(PGL)的产量和生产强度,在诱导期采用多种碳源与甲醇混合添加的模式。实验结果发现:甘油、山梨醇、乳酸与甲醇的混合添加均可以提高PGL的产量,其中山梨醇与甲醇的混合流加效果最为显著。研究表明,通过双碳源混合流加可以提高细胞活力,增强醇氧化酶活力,提高毕赤酵母表达外源蛋白效率。当山梨醇的流速为3.6g/(h·L)时,PGL酶活可达1593U/mL,生产强度为16.7U/(mL·h),比对照分别提高了84.6%和45.2%,实现了碱性果胶酶的高效生产。
- 汪志浩张东旭李江华堵国成陈坚
- 关键词：重组毕赤酵母碱性果胶酶混合碳源细胞存活率
- 过氧化氢酶基因在大肠杆菌中的克隆表达及发酵优化被引量：2
- 2011年
- 利用PCR扩增技术得到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)过氧化氢酶基因katA,将该基因与表达载体pET-20b(+)连接构建重组质粒,经测序验证后,在大肠杆菌JM109中进行表达得到重组大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21(DE3)(pET-20b(+)-katA)。SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异性表达条带,大小与过氧化氢酶吻合。摇瓶实验获得重组菌的最佳碳、氮源成分:5 g/L甘油,40 g/L安琪酵母粉,产酶水平最高达到20 000 U/mL。
- 周丽萍张东旭李江华堵国成陈坚
- 关键词：过氧化氢酶枯草芽孢杆菌质粒载体发酵优化
- 微生物过氧化氢酶的发酵生产及其在纺织工业的应用被引量：16
- 2010年
- 微生物过氧化氢酶是一种重要的工业酶制剂,可以催化分解过氧化氢生成水和氧气。这一酶制剂在食品、纺织、医药等领域表现出广泛的应用潜力。生物工程和基因工程技术的进步推动了微生物过氧化氢酶的发酵生产。以下综述了微生物过氧化氢酶发酵生产的进展及其在纺织工业中的应用,同时讨论了微生物过氧化氢酶的发酵生产和纺织工业应用的未来趋势。
- 张东旭堵国成陈坚
- 关键词：发酵纺织
- 添加稳定剂提高过氧化氢酶的稳定性被引量：1
- 2013年
- 为提高过氧化氢酶的应用稳定性和储藏稳定性,选用无机盐、醇类、大分子有机物、糖类、表面活性剂等物质为备选稳定剂,进行不同浓度的单因素实验,然后进行正交实验,又研究了蛋白酶抑制剂对过氧化氢酶酶液中蛋白酶的抑制效果,得到了最佳的稳定剂组合乙酸钠80 g/L,吐温20 2 mL/L,乙二醇80 mL/L,明胶1 g/L,六偏磷酸钠5 g/L,使蛋白酶得到抑制,提高了过氧化氢酶的稳定性。对最佳组合进行了酶的应用稳定性和储藏稳定性实验,在60℃处理15 min,酶活残留率为75.2%提高了43.2%;在常温25℃放置3个月,酶活残留率为90%,提高了67%,酶的应用稳定性和储藏稳定性得到了很大提高,为工业化的生产和应用奠定了基础。
- 冯卓林李江华刘龙堵国成陈坚
- 关键词：过氧化氢酶稳定剂储藏稳定性
