河南省教育厅自然科学基金(2011A180026)
- 作品数：11 被引量：45H指数：4
- 相关作者：周晨妍付冠华王丹丹李端高启禹更多>>
- 相关机构：新乡医学院河南师范大学更多>>
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学理学更多>>
- 木聚糖酶高产菌株Pichia pastoris G12摇瓶发酵工艺的优化
- 2012年
- 目的研究甲醇诱导的Pichia pastoris G12在摇瓶发酵条件下产木聚糖酶的表达规律。方法以木聚糖酶酶活力为评价指标,通过单因素试验和L9(34)正交试验考察确定摇瓶发酵条件下pH、接种时间、甲醇体积分数、诱导时间等因素对酶活力的影响。结果各因素影响程度依次为pH>甲醇体积分数>诱导时间>接种时间,最优表达条件为接种时间21 h,pH为5.5,甲醇诱导体积分数为1.50%,诱导时间为162 h。在此最优条件下培养菌株酶活力可达395.124 U.mL-1。结论该研究为木聚糖酶的工业化生产和应用提供了依据。
- 王丹丹张莉莉刘丹张艺严周晨妍
- 关键词：木聚糖酶毕赤酵母
- 纳米材料固定化酶的研究进展被引量：7
- 2013年
- 纳米材料在蛋白酶及核酶的固定化研究领域进展迅速,主要包括各种磁性纳米载体及非磁性纳米载体。目前在固定化纳米载体的特性、固定化方法及固定化效果上已进行了广泛探讨。综述以纳米载体的研究现状为基础,分析纳米载体固定化酶的应用前景及纳米载体固定对酶学性质的影响,并对该技术的研究进行介绍和展望。
- 高启禹徐光翠陈红丽周晨妍
- 关键词：纳米材料固定化酶磁性载体核酶
- 木聚糖酶基因克隆和表达的研究进展被引量：4
- 2013年
- 半纤维素分解微生物在自然界的物质循环过程中起着重要作用,半纤维素是植物多糖的重要成分之一,而木聚糖则是半纤维素的主要成分。木聚糖酶(xylanase)可催化木聚糖的水解,在各种生物体内均发现木聚糖酶。在过去几十年中,已有上百种木聚糖酶基因被克隆至同源或异源宿主内来表达木聚糖酶,以期改变宿主特性并适于商业应用。本文综述了木聚糖酶基因的克隆和表达,并对基因工程技术在木聚糖酶上的应用前景进行了展望。
- 王丹丹周晨妍付冠华
- 关键词：木聚糖酶克隆基因表达
- 黑曲霉木聚糖酶(xynZF-2)基因克隆、表达及酶学性质分析被引量：9
- 2012年
- 利用RT-PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger)XZ-3S中成功克隆出木聚糖酶基因(xynZF-2)的cDNA序列(Genbank登录号为:JQ700382)。该基因核苷酸序列阅读框全长678bp,编码225个氨基酸,其中成熟肽为107个氨基酸。以重组质粒pUCm-T-xynZF-2为模板,扩增得到编码xynZF-2成熟肽的cDNA片段(624bp)。将其与表达载体pET-28a连接,构建重组表达载体pET-28a-xynZF-2,并转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),获得重组工程菌BL21/xynZF-2。经IPTG诱导表达,木聚糖酶的的比酶活最高可达42.33U/mg。重组表达的木聚糖酶最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.0,在碱性条件下具有良好的稳定性。Fe3+对酶的激活作用最为明显。
- 付冠华刘振华王丹丹周晨妍
- 关键词：黑曲霉酶学性质
- 黑曲霉XZ-3S木聚糖酶Xyn ZF-1基因克隆和序列分析被引量：3
- 2012年
- 利用RT-PCR技术从黑曲霉XZ-3S中扩增并克隆了木聚糖酶(Xyn ZF-1)基因的cDNA片段,测序结果表明,Xyn ZF-1基因核苷酸序列阅读框全长678bp,编码225个氨基酸,推测分子量为24.06ku,等电点为5.20。以XZ-3S基因组DNA为模板扩增Xyn ZF-1的DNA序列,该序列仅存在一个内含子,长度为68bp。成熟肽基因推导的氨基酸序列与其他微生物来源的木聚糖酶一级结构进行比较,同源性最高达到了89.47%。系统进化树分析该酶属于G/11族糖基水解酶。又进一步对Xyn ZF-1二级结构进行了分析,并通过SWISS-MODEL预测了该酶的三维结构。
- 付冠华李端周晨妍
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶基因克隆
- 木聚糖酶热稳定性分子改造的研究进展被引量：6
- 2014年
- 木聚糖酶广泛应用于食品加工、生物制药、酒的澄清及纸浆漂白等行业。热稳定性对于木聚糖酶在工业领域中的应用起着至关重要的作用。根据催化结构域的氨基酸组成不同,木聚糖酶主要分为F/10和G/11两大家族。本文主要就这两大家族木聚糖酶热稳定性分子改造的技术和方法作一综述,为进一步提高木聚糖酶的热稳定性提供参考。
- 李同彪周晨妍王丹丹
- 关键词：木聚糖酶热稳定性分子改造
- 明胶载体固定化木聚糖酶技术的研究被引量：3
- 2013年
- 以明胶为载体,戊二醛为交联剂,采用包埋-交联法制备固定化木聚糖酶,探讨明胶浓度、戊二醛体积分数、交联时间和固定化时间对固定化酶相对酶活力的影响。通过正交实验确定木聚糖酶的最佳固定化条件,比较固定化酶与其游离酶的最适反应温度、热稳定性、最适反应pH及pH稳定性。研究发现,在明胶浓度为15%、戊二醛体积分数为4%、交联时间为1h和固定化时间为3h时,固定化酶的回收率可达72.56%,同时固定化和游离酶的最适温度分别为50、60℃,最适pH分别为3.6、4.6,pH稳定性及热稳定性有显著提高。
- 高启禹徐光翠李永佳刘瑞周晨妍
- 关键词：木聚糖酶戊二醛固定化酶
- 酸性木聚糖酶固态发酵条件与粗酶性质研究
- 2012年
- 利用单因素和正交试验对实验室选育的黑曲霉XZ-3S（Aspergillus niger XZ-3S）菌株的发酵条件进行了研究。得到试验因素的产酶条件为天然原料麸皮与玉米芯的比例为5∶3,接种量1.0%（孢子悬液,孢子浓度5×107个/mL）,料水比例1∶1.7,培养基初始pH值为7.5,培养温度28℃、培养时间65h,其间翻曲2~3次,在上述条件下木聚糖酶的活力可达23612.38IU/g干曲。酶学性质初步研究显示,酶的最适反应温度和pH值分别为50℃和5.0,低于50℃、pH3.0~8.0酶稳定。
- 周晨妍刘振华郭伟云王燕李端
- 关键词：固态发酵木聚糖酶黑曲霉正交试验酶学性质
- 木聚糖酶的研究进展及其应用被引量：12
- 2011年
- 综述了木聚糖酶在饲料、食品、造纸及能源等领域的应用现状与研发热点,展望了木聚糖酶的应用前景。
- 付冠华李端周晨妍丰慧根
- 关键词：木聚糖酶基因克隆
- 黑曲霉XZ-3S木聚糖酶基因xynZF-2在毕赤酵母中的高效表达被引量：3
- 2015年
- 将黑曲霉XZ-3S木聚糖酶基因xyn ZF-2（成熟肽碱基）插入表达载体p PIC9K中,SalⅠ线性化后电击转化毕赤酵母GS115,经MD平板、G418梯度和摇瓶复筛筛选出多克隆阳性转化子。选择28h的种子,每隔24h补加1.5%的甲醇,发酵96h后,比酶活可达13210U/mg;SDS-PAGE分析表明,该蛋白相对分子质量为23.0ku;重组酶最适作用温度为45℃,最适作用p H为5.0,在温度35--40℃、p H5--7条件下有良好的稳定性,Ca2＋对酶的激活作用最明显。
- 王丹丹周晨妍李同彪张振群王亚杰梁真真张青路丹荣
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶毕赤酵母GS115
